ペア型レセプターPILRの結晶構造解析

配对受体PILR的晶体结构分析

• 批准号: 17047032
• 负责人: 前仲 勝実
• 金额: $ 5.57万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17047032/
• 关键词: ペア型レセプター; 細胞表面受容体; 蛋白質; 蛋白質間相互作用; 表面プラズモン共鳴; NMR解析; X線結晶構造解析; 免疫制御

本年度は多様な免疫監視の制御に関わるペア型レセプターとして、CD99様分子を認識するPILR(Paired type2 Ig-like receptor)とMHCクラスI分子を認識するLILR(Leukocyte Ig-like receptor、別名ILT/LIR/CD85)について、リガンド分子認識機構の構造基盤を相互作用解析と立体構造解析(NMR、X線結晶構造解析)により明らかにすることに取り組んだ。昨年度おおよそ組み上げた大腸菌を用いた発現と巻き戻しにより、ヒト及びマウス由来のPILR群の、細胞外ドメイン全長と免疫グロブリンフォールドVsetドメインのみの2種類を調製した。また、マウス抑制型PILRαおよび活性型PILRβについて、リガンドPILR-Lとの結合実験を表面プラズモン共鳴により行い、特異的結合を示した(Tabata et al. PILRの発現及び機能解析についての論文投稿準備中)。他方、ヒトの抑制型PILRαのVsetについて結晶化に成功し、セレノメチオニン誘導体を用いた結晶から2Åの高分解能データのデータ収集に成功し、多波長異常分散(MAD)法による構造決定を現在進めている。他方、LILR受容体についてはLILRB2とHLA-Gとの複合体の結晶構造解析に成功し、上述の機能的な特徴の構造基盤を明らかにすることができた(Shiroishi et al., PNAS2006)。HLA-Gの特殊な2量体型に注目し、その機能および構造の特徴を明らかにした(Shiroishi et al., JBC2006a, BBA2006)。機能解析からavidity効果により、通常の単量体型よりも強く結合し、効率良く細胞内へのシグナル伝達を行えることがわかった。胎盤内での生理的意義が大きい可能性が高い。

は this year more than others in な immune surveillance の suppression に masato わ る ペ ア type レ セ プ タ ー と し て, CD99 others in molecular を know す る PILR (Paired type2 Ig - like receptor) と MHC ク ラ ス molecular を I know す る LILR (Leukocyte Ig - like Receptor, alias, ILT/LIR/CD85) に つ い て, リ ガ ン ド molecular understanding institutional base plate を の structure interaction と three-dimensional structure parse (NMR, X-ray crystal structure analysis) に よ り Ming ら か に す る こ と に group take り ん だ. Yesterday annual お お よ そ group on み げ た coliform を with い た 発 now と 巻 き 戻 し に よ り, ヒ ト and び マ ウ ス origin の PILR group の, extracellular ド メ イ ン span と immune グ ロ ブ リ ン フ ォ ー ル ド Vset ド メ イ ン の み の 2 kinds を modulation し た. ま た, マ ウ ス inhibitory PILR alpha お よ び activity type PILR beta に つ い て, リ ガ ン ド PILR -l と の combination be 験 を surface プ ラ ズ モ ン resonance に よ り い, the combination of specific を shown し た (Tabata et al. PILR の 発 now and び function analytical に つ い て の paper submitted to prepare). Fang, ヒ ト の inhibitory PILR alpha の Vset に つ い て crystallization に successful し, セ レ ノ メ チ オ ニ ン inductor を with い た crystallization か ら 2 a の high decomposition can デ ー タ の デ ー タ 収 に し success, many abnormal wavelength dispersion method (MAD) に よ る structure decision を now into め て い る. Fang, LILR let body に つ い て は LILRB2 と HLA - G と の complex analytical に success し の crystal structure, function of the above の な 徴 の structure substrate を Ming ら か に す る こ と が で き た (Shiroishi et al., PNAS2006). HLA-G <s:1> special な2 volume に notable <s:1>, そ <s:1> function および structure <s:1> characteristics を, ら ら に た た た(Shiroishi et al., JBC2006a, BBA2006). Functional analytic か ら avidity unseen fruit に よ り, usually の 単 quantity size よ り も く combining し, good working rate く intracellular へ の シ グ ナ ル 伝 line of を え る こ と が わ か っ た. The physiological significance of で <s:1> in the placenta is が large and the possibility of が high で.

项目成果

Structural basis for recognition of the non-classical MHC molecule HLA-G by the leukocyte lg-like receptor B2 (LILRB2/LIR2/ILT4/CD85d).

白细胞 lg 样受体 B2 (LILRB2/LIR2/ILT4/CD85d) 识别非经典 MHC 分子 HLA-G 的结构基础。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 103
• 作者: Nakano N.;Hosokawa H.;Kohyama M.;Hozumi N;九十九伸-;Hisaeda H;Minato Y;Shiroishi et al.
• 通讯作者: Shiroishi et al.

Preparation and crystallization of the disulfide-linked HLA-G dimer.

• DOI: 10.1016/j.bbapap.2005.10.006
• 发表时间: 2006-05
• 期刊: Biochimica et biophysica acta
• 作者: M. Shiroishi;D. Kohda;K. Maenaka

Entropically driven MHC class I recognition by human inhibitory receptor leukocyte Ig-like receptor B1 (LILRB1/ILT2/CD85j).

• DOI: 10.1016/j.jmb.2005.10.057
• 发表时间: 2006-01
• 期刊: Journal of molecular biology
• 影响因子: 5.6
• 作者: M. Shiroishi;K. Kuroki;K. Tsumoto;A. Yokota;A. Yokota;Takashi Sasaki;K. Amano;T. Shimojima

Efficient leukocyte Ig-like receptor signaling and crystal structure of disulfide-linked HLA-G dimer

• DOI: 10.1074/jbc.m512305200
• 发表时间: 2006-04-14
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Shiroishi, M;Kuroki, K;Maenaka, K
• 通讯作者: Maenaka, K

Crystal structure of the human monocyte activating receptor, "Group2" leukocyte lg-like receptor A5 (LILRA5/LIR9/ILT11).

人单核细胞激活受体“Group2”白细胞 lg 样受体 A5 (LILRA5/LIR9/ILT11) 的晶体结构。

• 发表时间: 2006
• 期刊: J. Biol. Chem. 281
• 作者: Nakano N.;Hosokawa H.;Kohyama M.;Hozumi N;九十九伸-;Hisaeda H;Minato Y;Shiroishi et al.;Shiroishi et al.
• 通讯作者: Shiroishi et al.