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核膜孔複合体のダイナミクス:メカニズムと制御機構の解析

核孔复合体动力学：机制和控制机制分析

基本信息

批准号：
17050027
负责人：
今本尚子
金额：
$ 4.29万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

核膜孔複合体は、核膜上の最も顕著な構造体として観察され、細胞質と核をつなぐ分子流通の場として機能している。核膜孔を可視化してその挙動を調べると、分布と数が細胞周期に依存して規則的に変化することを見いだした(Maeshima et al.,2006)。本年度は、核膜孔複合体の挙動の変化が見られるG1初期に着目して、複合体形成過程をliveで捉えることのできる実験系の樹立を試みた。また、核膜と複合体本体をアンカーするPom121の核膜孔複合体形成における役割について解析した。Live観察に関しては、細胞融合法、photo-conversion法、並びにphoto-bleach法を試したが、Nup133-Venusの安定発現株を用いて、操作性の良いphoto-bleach法で、核膜孔形成過程を捉えることに成功した。複合体形成はG1〜S期にかけて観察された。正確な形成時期について、現在詳細な解析をおこなっている。Nup133は核膜孔複合体の土台となる構成因子の1つであることが知られており、複合体形成の良い指標になる。もう1つの複合体形成の要の因子として、核膜と複合体本体を繋ぐ膜貫通型構成因子が考えられる。その1つであるPom121をクローニングし(データベース上にヒト全長遺伝子が存在しない)、性状解析を行った。Pom121をsiRNAで検出不可のレベルまで除去すると、核膜上の核膜孔複合体そのものが消失した。一方、同じPom121をわずかに検出できる程度に除去すると、核膜上に存在する核膜孔複合体が凝集することが判明した。その凝集に伴って、ラミンA/Cが核膜上で凝集した。このことから、Pom121は核膜孔複合体形成に必須の因子であると同時に、核内膜タンパク質と何らかの構造的繋がりのある可能性が考えられる(Funakoshi et al.投稿中)。複合体形成時の核膜の性状解析の新たな指標となる。

Nuclear pore complexes are the most important structures on the nuclear membrane, and the molecular flow fields in the cytoplasm and nucleus are functional. (Maeshima et al., 2001). 2006)。This year, the transformation of nuclear pore complex has been observed in the early stage of G1, and the complex formation process has been live and established. Analysis of the formation of nuclear membrane pore complex in Pom121 Live observation, cell fusion, photo-conversion, and photo-bleed methods were successfully used to detect the stability of Nup133-Venus. Complex formation was observed during G1-S phase. Correct formation period, now detailed analysis Nup133 is a good indicator of the formation of nuclear pore complexes. The essential factors for complex formation are nuclear membrane and complex body. 1. Pom121:1 - 2:1 (1), character analysis: 1. Pom121 siRNA can be detected and removed, and the nuclear pore complex on the nuclear membrane can be removed. The presence of nuclear pore complexes on the nuclear membrane was identified. A/C is an aggregation on the nuclear membrane. Pom121 is an essential factor for the formation of nuclear membrane pore complexes (Funakoshi et al.). A new index for the analysis of nuclear membrane properties during complex formation

项目成果

期刊论文数量（12）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

細胞核の分子生物学-クロマチン・染色体・核構造-(第6章)

细胞核的分子生物学 - 染色质、染色体、核结构 -（第 6 章）

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
影响因子：
0
作者：
Aratani;S et al.;Satoko Aratani;今本尚子;Yuki Okada;Shingo Kose;Bunai Keigo;今本文男;今本尚子;今本尚子
通讯作者：
今本尚子

蛋白質核酸酵素11号増刊細胞核の世界「核膜孔複合体 : 分子構築と機能」

蛋白质核酸酶11号特别版细胞核的世界《核孔复合体：分子构造与功能》

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
影响因子：
0
作者：
Aratani;S et al.;Satoko Aratani;今本尚子;Yuki Okada;Shingo Kose;Bunai Keigo;今本文男;今本尚子
通讯作者：
今本尚子

生細胞への複数種cDNAの共導入と発現量の制御

将多个 cDNA 共同引入活细胞并控制表达水平

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
蛋白質核酸酵素 Vol.50 No.13
影响因子：
0
作者：
Kazuhiro Maeshima;前島一博;今本文男
通讯作者：
今本文男

The nuclear import of RNA helicase A is mediated by importin-α3

DOI：
10.1016/j.bbrc.2005.11.161
发表时间：
2006-02
期刊：
Biochemical and Biophysical Research Communications
影响因子：
3.1
作者：
S. Aratani;T. Oishi;Hidetoshi Fujita;M. Nakazawa;R. Fujii;N. Imamoto;Y. Yoneda;A. Fukamizu;
通讯作者：
S. Aratani;T. Oishi;Hidetoshi Fujita;M. Nakazawa;R. Fujii;N. Imamoto;Y. Yoneda;A. Fukamizu;

The crystal structure of mouse Nup35 reveals atypical RNP motifs and novel homodimerization of the RRM domain