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核のリモデリングに伴う核膜孔複合体の機能・構造・動態変化の解析

分析与核重塑相关的核孔复合体的功能、结构和动态变化

基本信息

批准号：
15657049
负责人：
今本尚子
金额：
$ 2.11万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

核膜孔複合体は2層の脂質2重膜に埋め込まれた細胞核の表面に存在する超分子構造体である。これまで、核膜孔複合体の分布や数といった情報の殆どは、電子顕微鏡観察によって得られていた。しかし、輸送反応の1分子可視化技術の経験から、1つ1つの核膜孔複合体の観察が、光学顕微鏡の蛍光観察からも十分可能であることがわかった。FG-リピートの他、Nup153、Nup98、Nup62などの各種核膜孔複合体構成因子に対する抗体を作成し、細胞核の状態変化に伴った核膜孔複合体の分布や数といった動態変化を観察した。アフリカツメガエル(Xenopus laevis)卵の間期抽出液を利用した細胞核の無細胞構築系では、核膜孔複合体は染色体の脱凝縮に伴って数が増加し、DNA合成が進行するのに伴って均一一化することを確認することができた。一方、ヒトの培養細胞を用いた実験からは以下の知見が得られた。様々な細胞周期マーカーを組み合わせてHeLa細胞における核膜孔の分布の変化を解析した結果、G1期には核膜孔の分布に大きな偏りがあり、細胞周期の進行にしたがって徐々に解消されることが明らかになった。一方、細胞周期の進行に伴い、核膜孔の密度は増加する。このような核膜孔の分布の大きな偏りは、HeLaのようなガン細胞ばかりでなく、ヒト2倍体の正常細胞でも観察された。その分布はquiescenceのような休止状態、senescenceのような老化状態で大きく変化することがわかり、核膜孔の分布は細胞周期や分化の過程で大きく変化することが示唆された。これらの観察から、核膜の表面に存在する核膜孔複合体が細胞核構築を考える上で1つの興味深い指標になることが考えられる。今後、核膜孔を指標にして細胞核の構造や動的な構築過程を追求したいと考えている。

There is a supramolecular structure on the surface of the nucleus of the nuclear pore complex. The distribution of nuclear membrane pore complex and nuclear membrane pore complex is very difficult, and the electron micrograph can be used to detect it. It is very possible that the molecules can be chemically modified, the nuclear membrane hole complex can be detected at 1: 1, and the optical micrometer will be used to detect the molecular weight of the nuclear membrane hole. All kinds of nuclear pore copies of FG-, Nup153, Nup98, and Nup62 were detected by the formation of factors, the formation of nuclei, the transformation of nuclei, and the distribution of nuclear membrane pore complexes. The extractive fluid from the oocyte phase of Xenopus laevis was extracted by using the nuclei of the cell line, the cell line of the nuclear pore complex, the decoagulation of the chromosome of the nuclear pore complex with the addition of the number of DNA, and the synthesis of DNA. All the samples were homogenized to make sure that the cells were isolated. On the other hand, you can use the following words to know what you have heard. The results of the analysis of the distribution of nuclear membrane pores in G _ 1 phase, the distribution of nuclear membrane pores in G _ 1 phase, the distribution of nuclear membrane pores in G _ 1 phase, the distribution of nuclear membrane pores in G _ 1 phase, the distribution of nuclear membrane pores in G _ 1 phase, the distribution of nuclear membrane pores in G _ 1 phase, the distribution of nuclear membrane pores in G _ 1 phase, the distribution of nuclear membrane pores in G _ 1 phase, the distribution of nuclear membrane pores in G _ 1 phase, the distribution of nuclear membrane pores in G _ 1 phase, the distribution of nuclear membrane pores in G _ 1 phase, the distribution of nuclear membrane pores in G _ 1 phase. On the other hand, the cell cycle is accompanied, and the density of the nuclear pore is increased. The distribution of nuclear membrane pores is large, HeLab, diploid, normal, and normal. The distribution of quiescence, aging, aging, cell cycle differentiation, cell cycle differentiation and cell cycle differentiation. On the surface of the nuclear membrane, there is a copy of the nuclear membrane pore, the nucleus, the nucleus, the smell, the smell, the surface of the nuclear membrane, the surface of the nuclear membrane, the nuclear pore complex, the nucleus, the nucleus, the smell, the smell. In the future, the nuclear membrane foramen refers to the process of nuclear activation.