NMRを用いた紫外線損傷DNA修復機構の構造生物学的解析

使用 NMR 对紫外线损伤 DNA 修复机制进行结构生物学分析

• 批准号: 18011001
• 负责人: 寺沢 宏明
• 金额: $ 7.62万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18011001/
• 关键词: 紫外線損傷DNA; 光修復酵素; CPD; CPD-photolyase; (6-4) photolyase; NMR; 高熱菌; 第二補酵素; (6-4)photolyase

生体に紫外線を照射すると、細胞内のDNAが損傷を受ける。損傷塩基は複製・転写時に変異を誘発し、細胞死やがん化の原因になる。生体には光を用いて紫外線損傷DNAを修復する酵素が存在する。その修復機構を解明し、修復効率を飛躍的に高めることが出来れば、損傷DNA治療によるがん化の予防という実用的な応用も可能となる。本研究は、代表的な紫外線損傷DNAであるシクロブタンピリミジンダイマー(CPD)の光修復酵素であるCPD-photolyaseによる認識・修復機構を原子レベルで解明し、さらに、高い修復効率を有する分子を創製すること、および、もう1つの代表的な光損傷DNAである(6-4)photoproductとその修復酵素である(6-4)photolyaseについても、認識・修復機構を明らかにすることを目的とする。平成19年度は、(6-4)photolyaseの分子内運動と修復活性の相関を、NMR法を用いて解析した。異なる化学シフトを持つ複数の状態をマイクロ秒〜ミリ秒の時定数で交換している原子のNMRシグナルは、交換により横緩和速度が増大する。この交換による横緩和速度の増大は、スピンエコー実験により選択的に観測することが可能である。そこで、(6-4)photolyaseの反応部位に存在する原子のNMRシグナルのスピンエコー実験を行うことにより、(6-4)photoproductとoxetane中間体の交換を検出することを試みた。その結果、活性に重要と考えられるヒスチジン残基近傍において部位特異的な分子内運動が検出された。このことは、(6-4)photoproduct修復に必須である中間体の生成に寄与することが示唆される。

The ultraviolet rays of the living body were irradiated with ultraviolet rays, and the intracellular DNA were exposed to radiation. When a copy is written, the cause is changed, and the cause is changed. In vivo, the ultraviolet ray was used to repair the enzyme enzyme in the UV DNA. The repair organization explains the information, repairs the high frequency of the system, and applies the DNA treatment system to the prevention and treatment of the disease. In this study, the representative of the "Ultraviolet Line", "DNA", "optical", "CPD", "optical repair,"enzyme", "CPD-photolyase", "knowledge institution", "atomic chemistry", "understanding", "high" repair rate, "molecular", " The light source (6-4) photoproduct which is represented by the DNA device (6-4) is used to modify the enzyme enzyme (6-4) photolyase device, and the knowledge repair machine is able to recognize the target of the computer. The activity of intramolecular kinetic assay of Pingcheng 19 and (6-4) photolyase was analyzed by NMR method. On the other hand, the chemical system maintains the status of the copy number in seconds ~ the number of seconds to determine the number of seconds, the number of atoms, the speed of the NMR, and the speed is very high. The cross-section and the speed profile are high, the speed is high, and the speed is high. There are atoms in the reverse part of the photolyase, (6-4) photoproduct, and there is an attempt to make an attempt in the oxetane. The results of the results and the importance of the activity test showed that the intramolecular chain reaction of the complex near the residue was detected by the intramolecular enzyme assay. Please contact me for (6-4) photoproduct repair. You must send a message to your client and send it to you to indicate your request.

项目成果

Structural basis of the collagen-binding mode of discoidin domain receptor 2

• DOI: 10.1038/sj.emboj.7601833
• 发表时间: 2007-09-19
• 期刊: EMBO JOURNAL
• 影响因子: 11.4
• 作者: Ichikawa, Osamu;Osawa, Masanori;Shimada, Ichio
• 通讯作者: Shimada, Ichio

Mechanism of mRNA deadenylation: evidence for a molecular interplay between translation termination factor eRF3 and mRNA deadenylases

• DOI: 10.1101/gad.1597707
• 发表时间: 2007-12-01
• 期刊: GENES & DEVELOPMENT
• 影响因子: 10.5
• 作者: Funakoshi, Yuji;Doi, Yusuke;Hoshino, Shin-ichi
• 通讯作者: Hoshino, Shin-ichi

Ligand-induced Structural Changes of the CD44 Hyaluronan-binding Domain Revealed by NMR*

• DOI: 10.1074/jbc.m608425200
• 发表时间: 2006-12
• 期刊: Journal of Biological Chemistry
• 影响因子: 4.8
• 作者: M. Takeda;Shinji Ogino;R. Umemoto;M. Sakakura;M. Kajiwara;K. Sugahara;Haruko Hayasaka;M. Miyasaka;H. Terasawa;I. Shimada

Pairwise NMR experiments for the determination of protein backbone dihedral angle Phi based on cross-correlated spin relaxation.

基于互相关自旋弛豫确定蛋白质主链二面角 Phi 的成对 NMR 实验。

• 发表时间: 2007
• 期刊: J.Biomol.NMR 37
• 作者: Saetre;Rune;Kazuhiro Yoshida;Makoto Miwa;Takuya Matsuzaki;Yoshinobu Kano;Junichi Tsujii.;Takahashi H. et al.
• 通讯作者: Takahashi H. et al.

Utilization of methyl proton resonances in cross-saturation measurement for determining the interfaces of large protein-protein complexes

• DOI: 10.1007/s10858-006-0008-8
• 发表时间: 2006-03-01
• 期刊: JOURNAL OF BIOMOLECULAR NMR
• 影响因子: 2.7
• 作者: Takahashi, H;Miyazawa, M;Shimada, I
• 通讯作者: Shimada, I