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マウスフェロモンファミリーとG蛋白質共役受容体の相互作用ネットワークに関する研究

小鼠信息素家族与G蛋白偶联受体相互作用网络的研究

基本信息

批准号：
19036022
负责人：
寺沢宏明
金额：
$ 4.03万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19036022/
关键词：
フェロモン受容体 NMR 安定同位体標識構造生物学

项目摘要

マウスは鼻腔下部にある鋤鼻器官においてフェロモンを感知する。東原らは、オス特異的なフェロモン活性物質を涙腺から単離、精製を行った。その結果、分子量約7kDaの蛋白質を同定し、ESP1と命名した。ESP1をコードする遺伝子は、数十種類からなる新規の多重遺伝子ファミリーの一つであった。ESP1は、G蛋白質共役受容体V2Rによって受容される(Nature, 2005)。構造生物学に基づくG蛋白質共役受容体とリガンドとの相互作用に関する情報は、その重要性にもかかわらず、ほぼ皆無である。その主な理由に、従来の構造生物学的解析を行うために必要な膜蛋白質の可溶化が、しばしば失活や安定性の低下を伴うことが挙げられる。膜蛋白質は、本来脂質二重膜に組み込まれた状態で機能するため、その状態で解析することが望ましい。しかし、その場合分子量は非常に大きくなり、かつ不均一になるため、従来法の適用が困難である。寺沢・嶋田らは、巨大かつ不均一な対象にも適用可能な新規NMR手法である転移交差飽和法を開発した(Methods Enzymology, 2004)。一方、昆虫細胞を用いて発現したG蛋白質共役受容体が発芽バキュロウイルス(budded virus : BV)上に機能を保持した状態で発現することが明らかにされている。本研究は、ESP1の立体構造決定を行い、BV上に発現したESP1受容体に転移交差飽和法を適用し、ESP1上の受容体結合面の同定を行う。さらに、ESPファミリー・ESPファミリー受容体間の特異的な相互作用ネットワークを解析し、フェロモンによるマウスの個体認識システムを立体構造の見地から明らかにすることを目的とする。20年度は、ESP1の立体構造決定に成功した。ESP1の立体構造は、他のESPファミリーと構造的にも相同性が高いと予想される領域をもつが、付加的な構造領域も含むことが示唆された。

The lower part of the nasal cavity, the nasal organs, the sensation. The active substances of the original and special drugs are isolated from the glands, and the essence is fine. The results showed that the molecular weight was about 7kDa, the protein was identical, and the ESP1 was named. ESP1 is responsible for all kinds of new regulations, such as the number of new regulations, and the number of new regulations. ESP1 receptor and G protein receptor co-operated receptor (Nature, 2005). To construct the biological basis, G protein, co-capacitor, interaction, relationship, importance, importance, and so on. The main reason, the analysis of biology, the necessary membrane proteins, the solubility, the inactivation, the low stability, the low stability, the low stability. Membrane protein, lipid double membrane tissue, lipid double membrane, membrane protein, lipid double membrane, membrane protein, lipid double membrane, lipid double membrane, membrane protein, lipid double membrane, lipid double membrane, lipid double membrane The molecular weight is very high, the molecular weight is The monastery, the Tada, the giant and the unevenness of the temple use possible new NMR methods to compare the handover of the poor and the legal (Methods Enzymology, 2004). On the one hand, insect cells were used to detect the presence of G protein in the co-capacitive body (budded virus: BV). The machine was able to maintain the state of the cell, so that it was clear that the G protein was active. In this study, the decision line of the stereoscopic construction of the ESP1, the transfer difference and the method of the ESP1 recipient on the BV, and the conjoint surface of the acceptor on the ESP1. The interaction between the recipients is analyzed in terms of the interaction between the recipients, and the purpose of the system is to understand the purpose of the system. The interaction between the recipients is analyzed in terms of the interaction between the recipients, and the interaction between the recipients is analyzed in terms of the interaction between them. In the year 20, the success of the project was decided by the three-dimensional construction of the ESP1. ESP1's three-dimensional manufacturing system, the other ESP manufacturing system, and the other manufacturing industry are similar to each other. They are expected to be similar to each other.