マップキナーゼ経路の新規制御因子・阻害薬の分子遺伝学的スクリーニング

MAP 激酶途径新型调节剂和抑制剂的分子遗传学筛选

• 批准号: 18013032
• 负责人: 久野 高義
• 金额: $ 6.27万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18013032/
• 关键词: マップキナーゼ; 制御因子; 低分子量GTP結合たんぱく質; ファルネシル化; ホスファターゼ; タンパク質リン酸化; がん; 阻害薬; 抗がん薬; ファルネシルトランスフェラーゼ; Rho; Ras; 薬物スクリーニング; バルプロ酸; 細胞内輸送

(1)Pmk1シグナル伝達における新規の制御因子を同定することを狙った遺伝子スクリーニングを開発し、vic(免疫抑制薬や塩素イオンの存在下で生存可能の意)変異体を単離した。その変異体の1つであるvicl-1は、タンパク質フアルネシル基転移酵素のβ-サブユニットをコードしているcpp1^+遺伝子にミスセンス変異を起こさせ、Cpp1の155番目のアスパラギン酸のアスパラギノへのアミノ酸置換をもたらした(Cpp1(D155N))。また、生化学的解析により、Rho2はCpp1の新規の標的分子であることを明らかにした。以上の結果は、Cpp1が低分子量GTPアーゼであるRho2の空間的制御を介したPck2-Pmk1シグナル伝達の主要成分であることを示唆するものである。(2)Wis1-Spc1-Atf1ストレス活性型MAPキナーセシグナル経路を不活性化する因子として既に知られている2C型プロテインボスファターゼ(PP2C)をコードしているptcl^+とptc3^+過剰発現が、カルシニューリン欠損下においてCl^-過感受性を抑圧することを示した。また、これら2つのPP2Cs、およびSpc1の他の負の制御因子であるpyp2^+のmRNAレベルがPmk1依存的であることも示した。特に、Spc1ではなくAtf1の欠損下では細胞壁損傷薬に対して過感受性を示し、カルシニューリン欠損下においてC1^-過感受性をも抑圧した。これらはいずれもPmklMAPキナーゼ経路の構成要素の変異によって分けられる特徴的な表現型である。以上の結果から、PP2CがPmklシグナル伝達において負のフィードバックループに関わっており、またAtf1はPmklMAPキナーゼ経路の下流にある細胞完全性シグナル伝達の主要成分であることが示唆された。(3)マップキナーゼ経路の阻害薬のスクリーニング系を確立し、複数個のリード化合物を同定した。現在はその構造解析と化学合成を進めている。

(1) Pmk1 シ グ ナ ル 伝 da に お け る new rules の suppression factor を with fixed す る こ と を previously っ た posthumous son 伝 ス ク リ ー ニ ン グ を open 発 し, vic (immunosuppression 薬 や salt element イ オ ン の で survival may be in the presence of の) - variant を 単 from し た. そ の - variant 1 つ の で あ る は vicl - 1, タ ン パ ク qualitative フ ア ル ネ シ ル base planning shift enzyme の beta サ ブ ユ ニ ッ ト を コ ー ド し て い る cpp1 ^ + heritage 伝 son に ミ ス セ ン ス - different を up こ さ せ, cpp1 の 155's mesh の ア ス パ ラ ギ ン acid の ア ス パ ラ ギ ノ へ の ア ミ ノ acid replacement を も た ら し た (cpp1 ( D155N)). Youdaoplaceholder0, biochemical analysis によ によ, Rho2 によ Cpp1 new regulation target molecules である とを とを light ら に に た. の above results は, Cpp1 が low molecular weight GTP ア made ー ゼ で あ る Rho2 の suppression of the space を interface し た Pck2 - Pmk1 シ グ ナ ル 伝 ingredient of の で あ る こ と を in stopping す る も の で あ る. (2) Wis1 Spc1 - Atf1 ス ト レ ス activity type MAP キ ナ ー セ シ グ ナ ル 経 を not activeness す る factor と し て に know both ら れ て い る type 2 c プ ロ テ イ ン ボ ス フ ァ タ ー ゼ (PP2C) を コ ー ド し て い る PTCL ^ + と ptc3 ^ + a turning 発 が, カ ル シ ニ ュ ー リ ン owe loss under に お い て Cl^- hypersensitive を suppression する とを とを indicates た た. ま た, こ れ ら 2 つ の PP2Cs, お よ び Spc1 の he の negative の suppression factor で あ る pyp2 ^ + の mRNA レ ベ ル が Pmk1 dependent で あ る こ と も shown し た. に, Spc1 で は な く Atf1 の owe loss under で は cell wall damage 薬 に し seaborne て a susceptibility を し, カ ル シ ニ ュ ー リ ン owe loss under に お い て C1 ^ - a susceptibility を も 圧 suppression し た. The な phenotype である of the けられる characteristics of the <s:1> constituent elements <e:1> of the <s:1> channel <s:1> variation によって sub-け られる. の above results か ら, PP2C が Pmkl シ グ ナ ル 伝 da に お い て negative の フ ィ ー ド バ ッ ク ル ー プ に masato わ っ て お り, ま た Atf1 は PmklMAP キ ナ ー ゼ 経 road の obscene に あ る cells completeness シ グ ナ ル 伝 ingredient of の で あ る こ と が in stopping さ れ た. (3) マ ッ プ キ ナ ー ゼ の 経 road resistance against 薬 の ス ク リ ー ニ ン グ を established し, plural の リ ー を ド compounds with fixed し た. Now, そ そ <s:1> structural analysis と chemical synthesis を enter めて る る る.

项目成果

Genetic evidence for phospholipid-mediated regulation of the Rab GDP-dissociation inhibitor in fission yeast

• DOI: 10.1534/genetics.106.064709
• 发表时间: 2006-11-01
• 期刊: GENETICS
• 影响因子: 3.3
• 作者: Ma, Yan;Kuno, Takayoshi;Sugiura, Reiko
• 通讯作者: Sugiura, Reiko

Rho2 is a Target of the Farnesyltransferase Cppl and Acts Upstream of Pmk1 MAP Kinase Signaling in Fission Yeast

Rho2 是裂殖酵母中法尼基转移酶 Cppl 的靶标并作用于 Pmk1 MAP 激酶信号传导的上游

• 发表时间: 2006
• 期刊: Molecular Biology of the Cell 17・12
• 作者: 石井 哲;三村 覚;小布施 力史;嘉村 巧;房 月;高田 宏文;堤 聡;松嶋 隆;馬 艶;宮武 信;宮武 信;馬 艶
• 通讯作者: 馬 艶

Sourcebook of models for biomedical research

• DOI: 10.1007/978-1-59745-285-4
• 发表时间: 2008
• 作者: P. Conn

Studies on Fungal Pumilio Gene Family through Mining Multiple Genome-Scale Data Sets.

通过挖掘多基因组规模数据集对真菌 Pumilio 基因家族进行研究。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Kobe Journal of Medical Sciences 53
• 作者: 石井 哲;三村 覚;小布施 力史;嘉村 巧;房 月;高田 宏文;堤 聡;松嶋 隆
• 通讯作者: 松嶋 隆

PHドメインを有するタンパク質Slp2のイノシトールリン脂質シグナル伝達経路における役割

Slp2（一种具有 PH 结构域的蛋白）在肌醇磷脂信号通路中的作用

• 发表时间: 2007
• 作者: 石井 哲;三村 覚;小布施 力史;嘉村 巧;房 月;高田 宏文;堤 聡;松嶋 隆;馬 艶;宮武 信;宮武 信;馬 艶;馬 艶;Deng Lu;村上 貴之;西山 雄哉
• 通讯作者: 西山 雄哉