カルシニューリンとの拮抗的関係を利用したマップキナーゼ経路の分子遺伝学的解析

利用与钙调神经磷酸酶的拮抗关系对图谱激酶途径进行分子遗传学分析

基本信息

批准号：
15024244
负责人：
久野高義
金额：
$ 1.66万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.マップキナーゼ経路を制御する新規RNA結合蛋白質Rnc1の発見:カルシニューリンのKO表現型を相補する多コピー抑圧遺伝子の一つを単離し,配列決定をしたところ,酵母からヒトまで高度に保存されたKHドメインを持つ新規RNA結合蛋白質をコードしていた。Rnc1の遺伝子をノックアウトするとPmk1マップキナーゼの燐酸化が亢進している事が確認された。また、このRNA結合蛋白質は、Pmk1マップキナーゼを抑制すると思われるPmp1マップキナーゼホスファターゼのmRNAと結合する事が示された。Rnc1KO株ではPmp1mRNAが不安定である事も示された。さらに,Pmk1はRnc1を直接燐酸化し,燐酸化されたRnc1は燐酸化されていないRnc1よりも強くPmp1mRNAに結合し,安定化することが明らかになった。この結果,mRNAの増加は転写制御だけではなく,mRNAの安定性制御という別のメカニズムの存在が明らかになった。2.zinc finger型転写因子Prz1の同定:カルシニューリンの下流で働く転写因子Prz1を同定した。さらにカルシニューリンの下流にPrz1を介する経路と介さない経路があり,マップキナーゼと括抗するのはPrz1を介さない系であることも明らかにした。3.ユビキチンホメオスターシスとストレス応答に関与するLub1の発見:ストレス感受性を指標としたスクリーニングによりlub1遺伝子を発見したlub1遺伝子KO細胞は,細胞内ユビキチン量が著しく低下したことから,lub1遺伝子はユビキチン代謝に重要な役割を果たすことが示された。

1。调节MAP激酶途径的新型RNA结合蛋白RNC1的发现：抑制补体钙调蛋白的KO表型的多拷贝抑制基因被分离和测序，并编码了一种新型的RNA结合蛋白，该蛋白具有高度保守的KH结构域，从酵母到人类到人。淘汰RNC1基因证实，PMK1 MAP激酶的磷酸化增加了。还表明，该RNA结合蛋白与PMP1-MAP激酶磷酸酶的mRNA结合，这似乎抑制了PMK1-MAP激酶。还表明，RNC1KO菌株中PMP1 mRNA不稳定。此外，揭示了PMK1直接磷酸化RNC1，并且与非磷酸化的RNC1相比，磷酸化的RNC1结合并稳定PMP1 mRNA。这揭示了另一种机制的存在，不仅是转录调控，而且还存在mRNA的稳定性调节。 2。鉴定锌指转录因子PRZ1：我们确定了钙调神经酶下游作用的转录因子PRZ1。此外，据透露，有些途径不是介导的，也不是钙调蛋白下游介导的，并且PRZ1介导的系统集体抗拒MAP激酶是一个不介导的系统。 3. Discovery of Lub1 involved in ubiquitin homeostasis and stress response: The lub1 gene discovered by screening using stress sensitivity as an indicator of stress, and the lub1 gene KO cells found the lub1 gene significantly reduced the amount of ubiquitin intracellular ubiquitin, indicating that the lub1 gene plays an important role in ubiquitin metabolism.