カルシニューリンとの拮抗的関係を利用したマップキナーゼ経路の分子遺伝学的解析

利用与钙调神经磷酸酶的拮抗关系对图谱激酶途径进行分子遗传学分析

• 批准号: 15024244
• 负责人: 久野 高義
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15024244/
• 关键词: マップキナーゼ; 細胞増殖; 蛋白質燐酸化; RNA結合蛋白質; カルシニューリン

1.マップキナーゼ経路を制御する新規RNA結合蛋白質Rnc1の発見:カルシニューリンのKO表現型を相補する多コピー抑圧遺伝子の一つを単離し,配列決定をしたところ,酵母からヒトまで高度に保存されたKHドメインを持つ新規RNA結合蛋白質をコードしていた。Rnc1の遺伝子をノックアウトするとPmk1マップキナーゼの燐酸化が亢進している事が確認された。また、このRNA結合蛋白質は、Pmk1マップキナーゼを抑制すると思われるPmp1マップキナーゼホスファターゼのmRNAと結合する事が示された。Rnc1KO株ではPmp1mRNAが不安定である事も示された。さらに,Pmk1はRnc1を直接燐酸化し,燐酸化されたRnc1は燐酸化されていないRnc1よりも強くPmp1mRNAに結合し,安定化することが明らかになった。この結果,mRNAの増加は転写制御だけではなく,mRNAの安定性制御という別のメカニズムの存在が明らかになった。2.zinc finger型転写因子Prz1の同定:カルシニューリンの下流で働く転写因子Prz1を同定した。さらにカルシニューリンの下流にPrz1を介する経路と介さない経路があり,マップキナーゼと括抗するのはPrz1を介さない系であることも明らかにした。3.ユビキチンホメオスターシスとストレス応答に関与するLub1の発見:ストレス感受性を指標としたスクリーニングによりlub1遺伝子を発見したlub1遺伝子KO細胞は,細胞内ユビキチン量が著しく低下したことから,lub1遺伝子はユビキチン代謝に重要な役割を果たすことが示された。

1. マ ッ プ キ ナ ー ゼ 経 road を suppression す る new rules rna-binding protein Rnc1 の 発 see: カ ル シ ニ ュ ー リ ン の KO phenotype を phase fill す る more コ ピ ー 圧 suppression heritage 伝 son の a つ を 単 し, with columns decided を し た と こ ろ, yeast か ら ヒ ト ま で highly に save さ れ た KH ド メ イ ン を hold つ new rules rna-binding protein を コ ー ド Youdaoplaceholder0 て た. Rnc1 の posthumous son 伝 を ノ ッ ク ア ウ ト す る と Pmk1 マ ッ プ キ ナ ー ゼ の 燐 acidification が hyperthyroidism し て い る が sure さ れ た. ま た, こ の rna-binding protein は, Pmk1 マ ッ プ キ ナ ー ゼ を inhibit す る と think わ れ る Pmp1 マ ッ プ キ ナ ー ゼ ホ ス フ ァ タ ー ゼ の mRNA と combining す が る things in さ れ た. The Rnc1KO strain で で Pmp1mRNAが instability である event された. さ ら に, Pmk1 は Rnc1 を 燐 acidification し directly, 燐 acidification さ れ た Rnc1 は 燐 acidification さ れ て い な い Rnc1 よ り も strong く Pmp1mRNA に し, stabilization す る こ と が Ming ら か に な っ た. こ の results, mRNA の raised は requirement by planning to write suppression だ け で は な く, mRNA の stability suppression と い う don't の メ カ ニ ズ ム の is が Ming ら か に な っ た. 2. Any zinc finger type planning write factor Prz1 の with: カ ル シ ニ ュ ー リ ン の obscene で 働 く planning write factor Prz1 を be し た. さ ら に カ ル シ ニ ュ ー リ ン の obscene に Prz1 を interface す る 経 road と interface さ な い 経 road が あ り, マ ッ プ キ ナ ー ゼ と enclosed resistance す る の は Prz1 を interface さ な い department で あ る こ と も Ming ら か に し た. 3. ユ ビ キ チ ン ホ メ オ ス タ ー シ ス と ス ト レ ス 応 answer に masato and す る Lub1 の 発 see: ス ト レ ス susceptibility を index と し た ス ク リ ー ニ ン グ に よ り Lub1 posthumous son 伝 を 発 see し た Lub1 heritage 伝 は KO cells, the cells ユ ビ キ チ ン quantity が the し く low し た こ と か ら, Lub1 heritage 伝 son は ユ ビ キ チ ン metabolism Youdaoplaceholder0 important な harvest を results たす された とが とが show された.

项目成果

Hirayama Sonoko: "Zinc Finger Protein Prz1 Regulates Ca2+ but Not Cl- Homeostasis in Fission Yeast"J.Biol.Chem.. 278(20). 18078-18084 (2003)

平山园子：“锌指蛋白 Prz1 调节裂殖酵母中的 Ca2，但不能调节 Cl- 稳态”J.Biol.Chem.. 278(20)。

Ogiso Yasunari: "Lub1 Participates in Ubiquitin Homeostasis and Stress Response via Maintenance of Cellular Ubiquitin Contents in Fission Yeast."Mol.Cell.Biol.. 24(6). 2324-2331 (2004)

Ogiso Yasunari：“Lub1 通过维持裂殖酵母中的细胞泛素含量参与泛素稳态和应激反应。”Mol.Cell.Biol.. 24(6)。

Sugiura Reiko: "Upregulation of mRNA in MAPK Signaling : Transcriptional Activation or mRNA Stabilization?"Cell Cycle. 3(3). (2004)

Sugiura Reiko：“MAPK 信号传导中 mRNA 的上调：转录激活还是 mRNA 稳定？”细胞周期。

Maeda Takuya: "Pmr1, a P-type ATPase, and Pdt1, an Nramp Homolog, Cooperatively Regulate Cell Morphogenesis in Fission Yeast"Genes.Cells. 9(1). 71-82 (2004)

Maeda Takuy​​a：“Pmr1（一种 P 型 ATP 酶）和 Pdt1（一种 Nramp 同源物）协同调节裂殖酵母中的细胞形态发生”Genes.Cells。

Sugiura Reiko: "Feedback regulation of MAPK signalling by an RNA-binding protein"Nature. 424(6951). 961-965 (2003)

Sugiura Reiko：“RNA 结合蛋白对 MAPK 信号的反馈调节”《自然》。