分裂酵母モデル系を用いた細胞質分裂制御機構の解明

使用裂殖酵母模型系统阐明胞质分裂控制机制

• 批准号: 13043033
• 负责人: 久野 高義
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13043033/
• 关键词: カルシニューリン; 分裂酵母モデル系; 細胞質分裂; Septation Initiation Network(SIN); 蛋白質脱リン酸化酵素; 免疫抑制薬; Cdc7 kinase; TypeII ミオシン

本研究は、分裂酵母においてカルシニューリン(CN)遺伝子破壊カミ細胞賛分裂異常を惹起する事に注目し、CNと細胞質分裂において機能的に関連する遺伝子群を分子遺伝学的アプローチで取得し,機能解析を行うことにより,細胞質分裂制御のネットワークとメカニズムを分子レベルで解明することを目的としている。分裂酵母においてCNの活性を抑制しても(CN遺伝子を破壊した場合、あるいは免疫抑制薬FK506の存在下)通常の増殖には影響がないが、細胞質分裂に著しい異常が認められる。我々は<細胞増殖に活性型のCNを必須とする分裂酵母変異体(免疫抑制薬に感受性を示す)>の取得と解析により,多くの変異体が細胞質分裂異常を示すことを見いだした。本年度はこれらの変異体の原因遺伝子のクローニングにより,Type II Myosinをコードするmp2,低分子量GTP結合蛋白質rabファミリーに属するypt3,およびSeptation Initiation Network(SlN)の構成因子であるCdc7をコードする遺伝子を同定し,これらの遺伝子群が細胞質分裂においてCNと機能的に関連することを見いだした。myp2変異体とypt3変異体はCNの活性を抑制すると多核・多隔壁という表現型を示し,細胞増殖を停止する。一方cdc7変異体はCNの活性を抑制すると,制限温度にシフトしたときと同様に多核だが中隔を形成できないSIN欠損(septation initiation defective(sid)の表現型が増悪した。他のSINの構成因子であるcdc11やcdc14の変異体も同様の表現型を示した。さらにCNの構成的活性型を発現するとこれらの変異体のsidの表現型が改善した。以上の結果から,CNは細胞質分裂においてSINの制御を含めて複数のステップに関与することが示唆された。また,CNが細胞内輸送を制御する可能性も示唆された。

は, this study divided the yeast に お い て カ ル シ ニ ュ ー リ ン (CN) posthumous son 伝 broken 壊 カ ミ abnormal cells dividing 賛 を provoked す に attention し る, CN と cytoplasmic division に お い て functionary に masato even す る heritage 伝 subgroup を molecules but 伝 learn ア プ ロ ー チ で し, function analytical line を う こ と に よ り, cytoplasmic division suppression の ネ ッ ト ワ ー ク と メ The カニズムを molecule レベ で で で explains the purpose of する と とを とを and と て て る る る る. Split yeast に お い て CN の inhibition し を て も (CN heritage 伝 son を broken 壊 し た occasions, あ る い は immunosuppression 薬 FK506) in the presence of の usually の raised colonization に は influence が な い が, and cytoplasm divided に し い abnormal が recognize め ら れ る. I 々 は < cells raised colonization に activity type の CN を must と す る split yeast - variants (immunosuppression 薬 に susceptibility を shown す) > の obtained analytical に と よ り, more く の - variant が abnormal cytoplasmic division を shown す こ と を see い だ し た. This year's は こ れ ら の - cause of allograft の survived 伝 の ク ロ ー ニ ン グ に よ り, Type II Myosin を コ ー ド す る mp2, low molecular weight GTP binding protein made rab フ ァ ミ リ ー に genus す る ypt3, お よ び Septation Initiation Network (SLNS) detected の constitute factor で あ る Cdc7 を コ ー ド す る posthumous son 伝 を with し, こ れ ら の heritage 伝 subgroup が cytoplasmic division に お い て CN と functionary に masato even す る こ と を see い だ し た. Myp2 - variant と ypt3 - variant は CN の inhibition す を る と multicore, next door と い う phenotype を し, cells raised colonization を stop す る. Party cdc7 - variant は CN の inhibition す を る と, system limit temperature に シ フ ト し た と き と with others に multi-core だ が septal を form で き な い SIN owe loss (septation initiation defective (sid) の phenotype が raised 悪 し た. His <s:1> SIN <e:1> constituent factors であるcdc11やcdc14 <s:1> variant <s:1> similar <s:1> phenotype を shows <s:1> た. The active type を composed of さらにCN <e:1> shows すると <s:1> れら <s:1> variant <s:1> sid <e:1> phenotype が improvement <s:1> た た. の above results か ら, CN は cytoplasmic division に お い て SIN の suppression を containing め て plural の ス テ ッ プ に masato and す る こ と が in stopping さ れ た. Youdaoplaceholder0,CNが intracellular transport を control する possibility indicates された.

项目成果

矢田 朋子: "Fission yeast homologue of Mcd4 and Pig-n, is involved in GPI anchor synthesis and shares an essential function with calcineurin in cytokinesis"J. Biol. Chem.. 276. 13579-13586 (2001)

Tomoko Yada：“Mcd4 和 Pig-n 的裂殖酵母同源物参与 GPI 锚定合成，并与胞质分裂中的钙调神经磷酸酶共享重要功能”J. Biol. 276. 13579-13586 (2001)

杉浦麗子: "Molecular genetic analysis of the calcineurin signaling pathways"Cell. Mol. Life Sci.. 58. 278-288 (2001)

Reiko Sugiura：“钙调神经磷酸酶信号通路的分子遗传学分析”细胞生命科学 58. 278-288 (2001)

杉浦 麗子: "細胞内シグナル伝達研究 フローチャートでみる先端バイオ研究の進め方"辻本豪三,田中利男 共編(羊土杜). 192 (2001)

Reiko Sugiura：“细胞内信号转导研究：如何从流程图中进行先进的生物技术研究”，Gozo Tsujimoto 和 Toshio Tanaka 共同编辑（Yodo Mori）192（2001）。

籠田智美: "Downregulation of vascular soluble guanylate cyclase induced by high salt intake in spontaneously hypertensive rats"Br J Pharmacol. 134. 737-744 (2001)

Tomomi Kagota：“自发性高血压大鼠中高盐摄入诱导的血管可溶性鸟苷酸环化酶的下调”Br J Pharmacol. 134. 737-744 (2001)

杉浦麗子: "シグナル伝達カスケードと分子シャペロン 分子シャペロンによる細胞機能制御"永田和宏, 森正敬, 吉田賢右 共編(シュプリンガー・フェアラーク東京). 220 (2001)

Reiko Sugiura：“信号转导级联和分子伴侣：分子伴侣对细胞功能的控制”，由 Kazuhiro Nagata、Masataka Mori 和 Kensuke Yoshida 共同编辑（Springer-Verlag Tokyo）220（2001）。