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中心体複製のメカニズムの解明

中心体複製のメカニズムの解明
阐明中心体复制机制
批准号：
12878138
负责人：
戸所 一雄
金额：
$1.15万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2000
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2000 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12878138/
关键词：
中心体Cdk2-Cyclin E

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
中心体が複製されるにはCdk2-Cyclin Eが活性化されることが必要であることが最近判明したので、本研究では、Cdk2-Cyclin Eによってリン酸化される中心体構成蛋白質である基質を単離同定し、そのシグナル伝達経路と中心体複製の分子メカニズムを解明することを試みた。G1/S期に同調させたヒトHeLa細胞から中心体を精製し、バキュロで産生した活性化Cdk2-Cyclin Eによってリン酸化される中心体蛋白質を2Dゲルから単離し、そのアミノ酸配列を決定した。この時点で米国のグループが全く同じ方法によって同じ蛋白質NPM/B23を単離同定し、その特異的抗体の作成から局在と、中心体複製における機能の重要性をCellに発表した。そこで本研究としては、中心体複製の分子メカニズムの解析を行う為にNPM/B23の詳細な作用機序を現在解析中である。リン酸化部位を変異させた基質蛋白質を用いた解析、抗体による中心体複製への効果を調べている。さらにNPM/B23と相互作用する下流蛋白質を同定するために、pull down実験やtwo hybrid法を用いて単離同定を行っている。
英文摘要
中心体が複製されるにはCdk2-Cyclin Eが活性化されることが必要であることが最近判明したので、本研究では、Cdk2-Cyclin Eによってリン酸化される中心体構成蛋白質である基質を単離同定し、そのシグナル伝達経路と中心体複製の分子メカニズムを解明することを試みた。G1/S期に同調させたヒトHeLa細胞から中心体を精製し、バキュロで産生した活性化Cdk2-Cyclin Eによってリン酸化される中心体蛋白質を2Dゲルから単離し、そのアミノ酸配列を決定した。この時点で米国のグループが全く同じ方法によって同じ蛋白質NPM/B23を単離同定し、その特異的抗体の作成から局在と、中心体複製における機能の重要性をCellに発表した。そこで本研究としては、中心体複製の分子メカニズムの解析を行う為にNPM/B23の詳細な作用機序を現在解析中である。リン酸化部位を変異させた基質蛋白質を用いた解析、抗体による中心体複製への効果を調べている。さらにNPM/B23と相互作用する下流蛋白質を同定するために、pull down実験やtwo hybrid法を用いて単離同定を行っている。
期刊论文(7)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Ellinger-Ziegelbauer,H. ら: "Ste20-like kinase (SLK), a regulatory kinase for polo-like kinase(Plk) during the G2/M transition in somatic cells."Genes Cells. 5. 491-498 (2000)
Ellinger-Ziegelbauer, H. 等人：“Ste20 样激酶 (SLK)，一​​种体细胞 G2/M 转变期间 polo 样激酶 (Plk) 的调节激酶。”Genes Cells. 5. 491-498 ( 2000）
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Ueda,H. ら: "Cell-growth control by monomeric antigen : the cell surface expression of lsozyme-specific Ig V-domains fused to truncated Epo receptor."J.Immunol. Methods. 241. 159-170 (2000)
Ueda, H. 等人：“单体抗原的细胞生长控制：与截短的 Epo 受体融合的同酶特异性 Ig V 结构域的细胞表面表达。”J.Immunol。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
永田由香,戸所一雄: "血液・腫瘍科「MAPKとアポトーシス」"科学評論社. (2000)
Yuka Nagata、Kazuo Todokoro：“血液学/肿瘤学‘MAPK 和细胞凋亡’” Kagaku Hyoronsha (2000)。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Sugata,N. ら: "Human CENP-H multimers colocalize with CENP-A and CENP-C at active centromere-kinetochore complexes."Hum.Mol.Genet.. 9. 2919-2926 (2000)
Sugata, N. 等人：“人类 CENP-H 多聚体与 CENP-A 和 CENP-C 在活性着丝粒-动粒复合物上共定位。”Hum.Mol.Genet.. 9. 2919-2926 (2000)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 7 条
    造血細胞成熟分化の新たな制御メカニズムの解明
    タンパクの分解と輸送による制御
    造血幹細胞増殖因子の同定と造血幹細胞のex vivo培養法の確立
    • 批准号：
      12036226
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
    • 资助金额：
      $1.54万
    • 财政年份：
      2000
    • 负责人：
      戸所 一雄
    • 依托单位：
      The Institute of Physical and Chemical Research
    姉妹染色体分配の制御機構と発がん
    • 批准号：
      12213145
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
    • 资助金额：
      $3.07万
    • 财政年份：
      2000
    • 负责人：
      戸所 一雄
    • 依托单位：
      The Institute of Physical and Chemical Research