アクチニン4とβカテニンの作用による大腸がんの浸潤転移の分子機構解明

通过actinin-4和β-catenin作用阐明结直肠癌侵袭和转移的分子机制

• 批准号: 18013052
• 负责人: 山田 哲司
• 金额: $ 7.94万
• 依托单位: National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18013052/
• 关键词: T-cell factor 4(TCF4); 大腸癌; Wnt シグナル; β-catenin; splicing factor1(SF1); 大腸がん; actinin-4; splicing factor-1; pre-mRNA splicing; T-cell factor-4; 質量分析; プロテオミクス

癌抑制遺伝子APCの不活化によりWntシグナル経路の伝達因子であるβ-cateninが細胞内に蓄積し,転写因子であるT-cell factor 4(TCF4)と結合し,TCF4の標的遺伝子の転写を活性化することで大腸癌の前駆病変である腺腫形成を生じると考えられている.大腸癌発生のメカニズムを解明し,Wntシグナル伝達系を遮断する治療標的分子を探索するため,超低流速液体クロマトグラフィ-と高分解能質量分析機を用い,β-catenin/TCF4複合体の標的分子や複合体の構成分子を同定した.1)β-cateninとTCF4転写複合体の標的蛋白質の網羅的解析β-cateninとの結合部位を欠きドミナントネガティブにTCF4の転写活性を抑制するTCF4BΔN30を発現誘導できる大腸癌細胞を樹立し,蛋白質の発現変動解析を行い,TCF4BBΔN30の誘導により2倍以上発現が変動する蛋白質を80種同定した.それらの内,β-catenin/TCF4複合体により発現の制御を受けるsplicing factor1(SF1)はβ-atenin/TCF4複合体の構成分子でもあり,大腸癌細胞の転写活性と増殖を抑制した.また,β-catenin/TCF4複合体により制御されるER-βΔ5-6,WISP1v,FGFR3-ATIIなどのsplice variantの誘導に必須であることを明らかにした.2)大腸発癌制御過程におけるSF1の役割さらにSF1の発癌過程への関与を明らかにするため,ノックアウトマウスを作製した.野生型のマウスに比べ,SF1のヘミ欠失マウスは大腸発癌誘導剤のアゾキシメタンに対する感受性が著しく充進し,SF1の細胞増殖抑制効果を裏付けた.

Inactivation of APC, a cancer suppressor gene, causes accumulation of β-catenin in cells, and activation of T-cell factor 4(TCF4), a target gene for TCF4, in colorectal cancer. Colorectal cancer development and detection of target molecules, ultra-low flow rate of liquid, high resolution energy analyzer The target molecule of β-catenin/TCF4 complex and the constituent molecules of the complex are identified. 1) Analysis of the target protein network of β-catenin/TCF4 complex. The binding site of β-catenin and TCF4 complex is not identified. The binding site of β-catenin and TCF4 is inhibited. TCF4 BΔN30 is induced. Colorectal cancer cells are established. TCF4 BBΔN30 is induced by more than 2 times, and 80 kinds of proteins are identified. In addition, splicing factor1(SF1), a component of β-catenin/TCF4 complex, inhibits the proliferation of colorectal cancer cells. The β-catenin/TCF4 complex is involved in the regulation of ER-βΔ5-6, WISP1v, FGFR3-ATII splice variants. Compared with wild-type, SF1 gene expression is deficient in the ability to respond to colorectal cancer induction agents, and SF1 gene expression inhibits cell proliferation.

项目成果

ゲノミクス・プロテオミクス解析によるバイオマーカー探索と臨床への応用

通过基因组学和蛋白质组学分析发现生物标志物和临床应用

• 发表时间: 2007
• 作者: Yamaguchi U;Nakayama R;Honda K;Ichikawa H;Hasegawa T;Shitashige M;Ono M;Shoji A;Sakuma T;Ruwabara H;Shimada Y;Sasako M;Shimoda T;Kawai A;Hirohashi S;Yamada T;山田 哲司;山田 哲司
• 通讯作者: 山田 哲司

I dentification of biomarkers and therapy targets by oncogenomics and oncoproteomcs

I 通过肿瘤基因组学和肿瘤蛋白质组学鉴定生物标志物和治疗靶点

• 发表时间: 2007
• 作者: Tesshi Yamada;Kazufumi Honda;Miki Shitashige;Masaya Ono;Setsuo Hirohashi
• 通讯作者: Setsuo Hirohashi

Ku70 and poly(ADP-ribose) polymerase-1(PARP-1) competitively regulate β-catenin/TCF-4mediated gene transactivation

Ku70和聚（ADP-核糖）聚合酶-1（PARP-1）竞争性调节β-连环蛋白/TCF-4介导的基因反式激活

• 发表时间: 2007
• 作者: Masashi Idogawa;Mitsuko Masutani;Kohzoh Imai;Setsuo Hirohashi;Yasuhisa Shinomura;Takashi Tokino;Tesshi Yamada
• 通讯作者: Tesshi Yamada

プロテオーム解析による癌の基礎研究と臨床への応用

通过蛋白质组分析进行基础癌症研究和临床应用

• 发表时间: 2008
• 作者: Yamaguchi U;Nakayama R;Honda K;Ichikawa H;Hasegawa T;Shitashige M;Ono M;Shoji A;Sakuma T;Ruwabara H;Shimada Y;Sasako M;Shimoda T;Kawai A;Hirohashi S;Yamada T;山田 哲司
• 通讯作者: 山田 哲司

Mass spectrometry analysis of the native protein complexcontaining actinin-4 in prostate cancer cells.-Arole of actinin-4protein complex in the intracellular traffickingof cell surface proteins-

前列腺癌细胞中含有肌动蛋白-4的天然蛋白复合物的质谱分析。-肌动蛋白-4蛋白复合物在细胞表面蛋白的细胞内运输中的作用-

• 发表时间: 2007
• 作者: Kazufumi Honda;Miki Shitashige;Masaya Ono;Setsuo Hirohashi;Tesshi Yamada
• 通讯作者: Tesshi Yamada