TCF4とβ-catenin複合体により転写活性化される遺伝子群の同定

TCF4 和 β-catenin 复合物转录激活基因的鉴定

• 批准号: 12213157
• 负责人: 山田 哲司
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12213157/
• 关键词: P-glycoprotein; multidrug resistance-1 (MDR1) gene; β-catenin; T-cell factor-4; 大腸発がん; 家族性大腸腺腫症

β-cateninとTCF4転写複合体形成により発現される標的遺伝子群を同定し、大腸発がんの分子生物学的な機構を解明するために、テトラサイクリン調節性プロモータによる発現誘導システムを用い、テトラサイクリンの添加でβ-cateninとの結合部位を欠きdominant-negativeにTCF4の転写活性を抑制するTCF4BΔN30を発現誘導できる大腸がん細胞DLD-1 Tet-ON TCF4B ΔN30を樹立した。2色蛍光プローブによるcDNA microarray hybridization法で約7000遺伝子、Affymetrix社製のGeneChip法で約5600遺伝子についてテトラサイクリン誘導前後での発現変化を解析した。その結果、dominant-negative TCF4の誘導にて発現抑制される遺伝子としてMultidrug resistance gene-1(MDR1)を同定した。MDR1遺伝子のプロモーター領域には複数のβ-catenin/TCF4応答部位があり、実際に家族性大腸腺腫症患者の腺腫組織でβ-cateninの細胞内蓄積と相応したMDR1遺伝子産物p-glycoproteinの発現亢進を証明した。MDR1遺伝子は大腸上皮細胞においてβ-cateninとTCF4の転写複合体の直接の標的遺伝子の一つであると結論した。MDR1遺伝子産物p-glycoproteinの発現抑制、あるいは機能阻害により大腸腺腫形成を抑制にし、特に外科的切除を行わなければ確実に発癌に至る家族性大腸腺腫症患者や大腸癌の高危険群での発症予防への応用が期待できる。

β-catenin and TCF4 gene complex formation in the development of target gene groups identified, large intestine development and molecular biology mechanisms to understand the use of regulatory mechanisms for development induction The binding site of β-catenin was not dominant-negative, the activity of TCF4 was inhibited, TCF4 BΔN30 was induced, and DLD-1 Tet-ON TCF4 B Δ N30 was induced. About 7000 genes by cDNA microarray hybridization method and 5600 genes by Affytrix GeneChip method were analyzed before and after induction. As a result, dominant-negative TCF4 induction was inhibited by Multidrug resistance gene-1(MDR1). There are multiple β-catenin/TCF4 receptor sites in the field of MDR1 gene expression. In fact, the intracellular accumulation of β-catenin in adenomatous tissues of patients with familial colorectal adenomatosis and the increased expression of the MDR1 gene product p-glycoprotein have been demonstrated. MDR1 gene is a direct marker of β-catenin in colorectal epithelial cells. MDR1 gene product p-glycoprotein production inhibition, functional inhibition, inhibition of colorectal adenoma formation, special surgical resection, accurate cancer development to familial colorectal adenomas patients and high-risk groups of colorectal cancer prevention is expected.

项目成果

Naishiro Y,Yamada T. et al.: "Restoration of epithelial cell polarity in a colorectal cancer cell line by suppression of beta-catenin/T-cell factor 4-mediated gene transactivation."Cancer Res.. (In press). (2001)

Naishiro Y、Yamada T. 等人：“通过抑制 β-连环蛋白/T 细胞因子 4 介导的基因反式激活来恢复结直肠癌细胞系中的上皮细胞极性。”Cancer Res..（正在出版）。

Niki T,Yamada T. et al.: "Expression of vascular endothelial growth factors A,B,C,and D and their relationships to lymph node status in lung adenocarcinoma."Clin.Cancer Res.. 6(6). 2431-2439 (2000)

Niki T、Yamada T. 等人：“肺腺癌中血管内皮生长因子 A、B、C 和 D 的表达及其与淋巴结状态的关系。”Clin.Cancer Res. 6(6)。

Yamada T. et al..: "Transactivation of the multidrug resistance 1 gene by T-cell factor 4/beta-catenin complex in early colorectal carcinogenesis."Cancer Res.. 60(17). 4761-4766 (2000)

Yamada T. 等人：“早期结直肠癌发生中 T 细胞因子 4/β-连环蛋白复合物对多药耐药 1 基因的反式激活”。Cancer Res.. 60(17)。

Ishii Y,Yamada T. et al.: "Integrin alpha6 beta4 as a suppressor and a predictive marker for peritoneal dissemination in human gastric cancer."Gastroenterology. 118(3). 497-506 (2000)

Ishii Y、Yamada T. 等人：“整合素 alpha6 beta4 作为人类胃癌腹膜播散的抑制因子和预测标记。”胃肠病学。

Araki N,Yamada T. et al.: "Actinin-4 is preferentially involved in circular ruffling and macropinocytosis in mouse macrophages : analysis by fluorescence ratio imaging."J.Cell Sci.. 113(Pt 18). 3329-3340 (2000)

Araki N、Yamada T. 等人：“Actinin-4 优先参与小鼠巨噬细胞中的圆形褶皱和巨胞饮作用：通过荧光比率成像进行分析。”J.Cell Sci.. 113（Pt 18）。