薬物排出トランスポーターの活性制御と機能性SNPを基盤としたがん化学療法の戦略

基于药物外排转运蛋白活性和功能性SNP调节的癌症化疗策略

• 批准号: 18015045
• 负责人: 杉本 芳一
• 金额: $ 6.46万
• 依托单位: Kyoritsu University of Pharmacy
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18015045/
• 关键词: ABC transporter; ABCG2; BCRP; estrogen; MDR1; P-glycoprotein; ABCB1; SNP

(1)estrogenにより、MCF-7などのヒト乳がん細胞のP-糖タンパク質発現が低下することを見いだした。この発現抑制機構の解明のために、マイクロアレイを用いてMCF-7でestrogenにより発現が変化し、かつタンパク質の生合成.分解に関与する候補遺伝子を402個抽出した。候補遺伝子のsiRNAをMCF-7/MDRに導入することにより、これまでにsiRNA導入によってP-糖タンパク質の発現が低下する遺伝子を14個、発現が上昇する遺伝子を2個同定した。これらの中には、タンパク質分解酵素、ユビキチン関連タンパク質、リン酸化酵素、GTPase関連タンパク質などが含まれていた。(2)種々のBCRP強制発現細胞におけるgefitinibの輸送を調べた。PC-9/BCRP、HCT-116/BCRP、KB/BCRPなど、いずれの細胞においてもBCRPの強制発現によるgefitinibの取り込みの低下と排出の促進が観察された。これらの細胞のうち、EGFRに変異を持つPC-9/BCRPのみがgefitinibに耐性となった。PC-9/BCRPでは、EGF刺激の下流のシグナル分子のリン酸化の阻害にPC-9よりも高濃度のgefitinib必要であった。しかし他の細胞株ではBCRPの強制発見はgefitinibによるシグナル分子のリン酸化の阻害にほとんど影響しなかった。以上より、BCRPはgefitinibの排出ポンプであり、gefitinibに感受性ながん細胞の耐性因子であることが示された。(3)BCRP遺伝子の機能性SNPについて、変異型BCRPの薬物輸送と阻害剤の効果の特異性を解析した。その結果、BCRP-C421A(Q141K)ではタンパク質発見が量的に低下するが輸送基質に対する親和性に変化がないこと、BCRP-T1291C(F431L)ではSN-38などの抗がん剤に対する輸送活性が低下していることが明らかとなった。

(1)Estrogen, MCF-7, and P-glycoprotein production in breast cancer cells were significantly lower than those in control group. The development of MCF-7 is an important part of the mechanism of inhibition of development. 402 candidates were extracted. The siRNAs of MCF-7/MDR were introduced into 14 of the 14 siRNAs and 2 of the 14 siRNAs that were introduced into the MCF-7/MDR and the siRNAs that were introduced into the MCF-7/MDR. This is the case with the enzyme in the middle, the enzyme in the middle. (2)The expression of gefitinib in BCRP stressed cells is regulated by the expression of BCRP. PC-9/BCRP, HCT-116/BCRP, KB/BCRP, BCRP, PC-9/BCRP and EGFR are resistant to gefitinib. PC-9/BCRP is essential for EGF-stimulated down-stream molecular acidification inhibition of PC-9. Other cell lines respond to BCRP stress by responding to the effects of gefitinib on the inhibition of molecular acidification. The above mentioned factors indicate that BCRP is sensitive to gefitinib (3) The functional SNPs of BCRP gene were analyzed for the specificity of the effects of different BCRP drug delivery and inhibition agents. As a result, BCRP-C421A (Q141K) has a low affinity for the transport substrate, and BCRP-T1291C (F431L) has a low affinity for the transport substrate.

项目成果

The Identification of Two Germ-line Mutations in the Human Breast Cancer Resistance Protein Gene that Result in the Expression of a Low/Non-functional Protein

• DOI: 10.1007/s11095-007-9235-2
• 发表时间: 2007-03
• 期刊: Pharmaceutical Research
• 影响因子: 3.7
• 作者: S. Yoshioka;K. Katayama;Chikako Okawa;Sachiko Takahashi;Satomi Tsukahara;J. Mitsuhashi;Y. Sugimoto

Breast cancer resistance protein (BCRP) affected acquired resistance to gefitinib in a "never-smoked" female patient with advanced non-small cell lung cancer

• DOI: 10.1016/j.lungcan.2007.05.019
• 发表时间: 2007-11-01
• 期刊: LUNG CANCER
• 影响因子: 5.3
• 作者: Usuda, J.;Ohira, T.;Kato, H.
• 通讯作者: Kato, H.

Retroviral integration site analysis and the fate of transduced clones in an MDR1 gene therapy protocol targeting metastatic breast cancer.

针对转移性乳腺癌的 MDR1 基因治疗方案中的逆转录病毒整合位点分析和转导克隆的命运。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Hum Gene Ther. 18
• 作者: Mitsuhashi J;et. al.
• 通讯作者: et. al.

Functional interplay between EBV oriP-dependent DNA replication/maintenance and host cell Orc1 protein.

EBV oriP 依赖性 DNA 复制/维持与宿主细胞 Orc1 蛋白之间的功能相互作用。

• 发表时间: 2007
• 作者: Takahashi;S.;Usuda J;Katayama K;杉本 芳一;吉岡 翔;三橋 純子;野口 耕司
• 通讯作者: 野口 耕司

Flavonoids inhibit breast cancer resistance protein-mediated drug resistance: transporter specificity and structure-activity relationship

• DOI: 10.1007/s00280-007-0426-7
• 发表时间: 2007-11-01
• 期刊: CANCER CHEMOTHERAPY AND PHARMACOLOGY
• 影响因子: 3
• 作者: Katayama, Kazuhiro;Masuyama, Kazuto;Sugimoto, Yoshikazu
• 通讯作者: Sugimoto, Yoshikazu