高内皮細静脈の分化形質を規定する細胞外環境に関する研究

决定高内皮微静脉分化特征的细胞外环境研究

基本信息

  • 批准号:
    18060034
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 3.07万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    2006
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2006 至 2007
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

高内皮細静脈(HEV;high endothelial venule)は,血流中を循環するリンパ球と特異的に接着し,リンパ球を免疫応答の起こる場であるリンパ節へ移行させる特殊な血管である。本研究においては,HEVのユニークな分化形質を規定する細胞外環境を,HEV培養細胞株を樹立することにより解明する事を目的とする。昨年度我々は,HEV特異的硫酸基転移酵素GlcNAc6ST-2の遺伝子座にEGFP(enhanced green fluorescent protein)遺伝子をノックインしたマウスよりHEV培養内皮細胞株を樹立した。この細胞株においては,EGFPの緑色蛍光を指標にしてHEV分化形質の一つである硫酸基転移酵素GlcNAc6ST-2の発現を容易に検出する事が可能である。本年度,20代継代を行ったHEV培養細胞株の表面抗原の発現をフローサイトメトリーにより解析したところ,血管内皮細胞マーカーとして知られているCD31の強い発現が確認された。また,HEV培養細胞株は,血管内皮細胞に特有の敷石状の培養形態を示した。HEV培養細胞株において,GlcNAc6ST-2により生合成される糖鎖抗原であるMECA-79抗原の発現はわずかに認められるものの,ほぼ消失していた。これは,通常の培養条件においては,GlcNAc6ST-2の発現に必要な細胞外環境が欠如しているためと考えられた。そこで,HEV培養細胞株を種々のサイトカインや細胞外マトリクス分子,およびリンパ節由来の種々の細胞を含む様々な細胞外環境のもとで培養を行い,GlcNAc6ST-2-EGFPレポータータンパク質の発現を誘導する細胞外環境の検討を試みた。現在までのところ,この発現誘導に関与する細胞外環境の同定には至っていないが,本研究で新たに樹立したHEV培養細胞株は,特殊血管であるHEVのHEVらしさ(HEVness)を規定する分子機構の解明に有用であると考えられる。
High endothelial venule (HEV) is a special blood vessel that circulates in the blood stream and is connected to the immune response field. In this study, HEV cell differentiation characteristics were determined, and HEV cell culture lines were established. In this paper,HEV specific sulfate transferase GlcNAc6ST-2 gene locus EGFP(enhanced green fluorescent protein) gene was established. In these cell lines, it is possible to easily detect the expression of sulfate transferase GlcNAc-6ST-2 in HEV differentiation by EGFP green fluorescence indicators. This year, the expression of surface antigen in HEV cultured cell lines at passage 20 was analyzed and the strong expression of CD31 in vascular endothelial cells was confirmed. HEV cell lines were cultured in vitro and the unique stone-like culture morphology of vascular endothelial cells was demonstrated. HEV cell culture line GlcNAc-6ST-2 was produced and purified by MECA-79 antigen. In this paper, we discuss the culture conditions of GlcNAc6ST-2, and find out the necessary conditions for the development of GlcNAc6ST-2. In this study,HEV cell lines were cultured and cultured to induce the expression of extracellular molecules, and the expression of extracellular molecules was induced by GlcNAc6ST-2-EGFP. In this study, HEV cultured cell lines were established to investigate the molecular mechanism of HEV in specific blood vessels.

项目成果

期刊论文数量(9)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Determination of chemokine-glycosaminoglycan interaction specificity.
趋化因子-糖胺聚糖相互作用特异性的测定。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2006
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Hiraoka N;Petryniak B;Kawashima H;Mitoma J;Akama TO;Fukuda MN;Lowe JB;Fukuda M;Kawashima H;Kawashima H
  • 通讯作者:
    Kawashima H
硫酸基転移酵素欠損マウスにおける鼻粘膜免疫応答の低下
磺基转移酶缺陷小鼠鼻粘膜免疫反应降低
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    平川 城太朗;ほか
  • 通讯作者:
    ほか
Functions of glycans revealed by gene inactivation of L-selectin ligand sulfotransferases in mice.
通过小鼠 L-选择素配体磺基转移酶基因失活揭示的聚糖功能。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2006
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Hiraoka N;Petryniak B;Kawashima H;Mitoma J;Akama TO;Fukuda MN;Lowe JB;Fukuda M;Kawashima H;Kawashima H;Kawashima H
  • 通讯作者:
    Kawashima H
Essential Role of Sulfated Glycans in Lymphocyte Recruitment to Nasal-Associated Lymphoid Tissues and Immune Responses against Inhaled Allergens
硫酸化聚糖在淋巴细胞募集至鼻相关淋巴组织和针对吸入过敏原的免疫反应中的重要作用
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Hirakawa J.;et. al.
  • 通讯作者:
    et. al.
簡便なσ結合型糖鎖分析法の確立とその応用
一种简单的σ-连接聚糖分析方法的建立及其应用
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    木村 文穂;ほか
  • 通讯作者:
    ほか
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