糖鎖を認識する白血球接着分子L-セレクチンの新しいリガンドの解析

L-选择素的新配体分析，L-选择素是一种识别糖链的白细胞粘附分子

• 批准号: 08770236
• 负责人: 川島 博人
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770236/
• 关键词: 接着分子; L-セレクチン; リガンド; リンパ節; バキュロウイルス

白血球接着分子L-セレクチンと高内皮細静脈(HEV)上のリガンド分子との結合は、リンパ球ホ-ミング現象の特異性の決定に重要である。すでに、リンパ節におけるL-セレクチンのリガンドとしてGlyCAM-1およびCD34が報告されているが、われわれはそれ以外の分子がラットリンパ節に存在する可能性を指摘してきた。本年度はラット可溶性L-セレクチン(LECーIgG)をプローブとして、このリガンドの大量精製を行い、その部分アミノ酸配列の解析を行うとともにその特異性を解析した。はじめに、固相化LEC-IgGーアフィニティーカラムを用いて、ラットリンパ節の組織片の可溶化物から180kDaのリガンド分子(p180)の大量精製を行った。得られた精製標品を用いてN-末端部分アミノ酸配列の解析を行ったところ、ヒトおよびマウスのC型レクチンの一つであるマンノースレセプターと高い相同性を有していた。マンノース-BSAを用いた結合実験から、p180が実際にマンノース特異的なレクチン活性を持つことが明らかとなった。さらに、p180とLEC-IgGの結合はαーメチルマンノシドによって濃度依存的に阻害され、100mMで完全に結合が阻害された。われわれはこれまでバキュロウイルス/かいこ発現系を用いて作製したLEC-IgGをプローブに用いてきたが、この発現系ではオリゴマンノース型の糖鎖付加が起こることが知られており、この糖鎖部分がマンノース特異的なレクチン活性を有するp180によって認識されたものと考えられた。そこで、COSー7細胞を用いた発現系により作製したLEC-IgGとp180の結合を調べたところ、全く結合は見られなかった。これらの結果から、p180とLECーIgGの相互作用はp180側のレクチン活性により担われており、p180はL-セレクチンの生理的なリガンドではないことが示唆された。

White blood cells are followed by molecules such as L-phenylephrine, high-level endothelial cells, high-level endothelial cells (HEV), high-level endothelial cells, high-level endothelial cells, leukocytes, endothelial cells, endothelial cells, endothelial cells, Please tell me that there is a possibility. This year, the soluble LECs (LECs IgG) have their own characteristics. This year, the contents of a large number of LECs have been analyzed, and some of them have been sorted with acid. Immobilized LEC-IgG, solid phase, 180kDa, solid phase, phase, temperature, temperature, To get the standard product, use the "N-terminal part", "acid", "parse", "line", "type C", "type C", "one", "one", one, one, two, six, one, two, six, four, four, four, Please use the combination of BSA and p180 to make sure that you are aware of the activity of the device. The combination of LEC-IgG and p180 LEC-LECs is based on the combination of alpha and alpha, and the complete combination of 100mM. In this case, you can tell me that there is a problem in the use of LEC-IgG equipment to make sure that you are not aware of the problem and that the activity of the device is not valid. The COS

项目成果

Hiroto Kawashima: "Characterization of a 180 kDa molecule apparently reactive with recombinant L-selectin." Glycoconjugate Journal. 14(in press). (1997)

Hiroto Kawashima：“180 kDa 分子的表征，明显与重组 L-选择素发生反应。”

Haruko Ishiwatari-Hayasaka: "Induction of cell death by chimeric L-selectin-Fas receptors." International Immunology. 9(in press). (1997)

Haruko Ishiwatari-Hayasaka：“嵌合 L-选择素-Fas 受体诱导细胞死亡。”