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移動細胞先導端におけるアクチン動的システムの時空間的制御機構

迁移细胞前沿肌动蛋白动力系统的时空控制机制

基本信息

批准号：
19037002
负责人：
水野健作
金额：
$ 3.46万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

移動細胞の先導端にはラメリポディアとよばれるアクチン骨格を主成分とする突起構造が形成され、細胞運動を制御する生体ナノシステムとして機能する。アクチン脱重合因子であるコフィリンは先導端ラメリポディアに局在し、アクチン繊維の脱重合を促進すると考えられているが、細胞内では、刺激に応答したアクチン重合ならびにラメリポディアの形成と伸長に必要であることが知られている。このような刺激依存的な細胞内アクチン重合の促進機構を解明するため、可逆的な光活性化蛍光蛋白質であるDronpaとアクチンの融合蛋白質の蛍光強度の減衰量の測定による細胞内アクチンモノマーの時空間的変化を生細胞で測定できるFDAP(fluorescence decay after photOactivation)-time lapse imaging系の開発に成功した。本法を用いて、ニューレグリン刺激依存的なラメリポディアの形成過程における細胞内のアクチンモノマー量の経時的変化を測定し、刺激後2-3分後にアクチンモノマーは大きく減少することを見出した。コフィリンを不活性化した細胞では、刺激前のアクチンモノマー量が低く、ラメリポディア形成が阻害された。さらに、ラメリポディア形成細胞における細胞内のアクチンモノマー量の空間的変化の測定にも成功した。本研究で開発したFDAP time lapse imaging法という新しい顕微鏡イメージング技術はアクチンモノマーの時空間的変化を測定できるだけでなく、他の多くの可溶性因子の変化の測定にも応用可能であり、今後広く応用されることが期待される。

The leading end of mobile cells is the main component of mobile cells. The structure of the protrusions is formed and the movement of cells is controlled and the function of the body is controlled.アクチン decoupling factor であるコフィリンは leading end ラメリポディThe game is in progress Intracellular stimulationメリポディアの Formation and elongation are necessary to know られている.このようなstimulation-dependent intracellular アクチン coincidence promotion mechanism を解明するため, reversible なphotoactivated photoprotein であるDronpa とアクチンのfusion Measurement of the amount of attenuation of light intensity of proteins, measurement of changes in time and space in cells, measurement of the amount of attenuation of light intensity in cells, measurement of FDAP (fluorescence) decay after photoOactivation)-time lapse imaging system is successful. This method uses いて and ニューレグリン to stimulate the formation process of the dependent なラメリポディアのにおける intracellular のアクチンモノMeasurement of change during the measurement of the amount of stimulation, and the reduction of the large amount of stimulation after 2-3 minutes of stimulation. Cell inactivation of コフィリンをしたcell では, pre-stimulation のアクチンモノマーamount of がlow く, ラメリポディア formation inhibition された.さらに、ラメリポディア Formation of cells におけるThe measurement of the transformation of the amount of space in the cells was successful. This study is based on FDAP time lapse Imaging method and new micro-mirror technology are used to measure the change of time and space in time and space. It is possible to use the soluble factor in the determination of the soluble factor in the test, and it is expected that the use of the soluble factor will be used in the future.