ミオシンレールとしてのアクチン高次構造複合体 : その役割を探る

肌动蛋白构象复合物作为肌球蛋白轨道：探索其作用

• 批准号: 19037005
• 负责人: 石川 良樹
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19037005/
• 关键词: アクチン; ミオシン; アクチン結合蛋白質

生体内ではアクチン線維は種々のアクチン結合蛋白質と高次構造を形成している。この高次構造とミオシンとの相互作用を探る事を目的とし、種々のアクチン結合蛋白質を結合させたアクチンレール上でのミオシン滑り運動解析を行った。従来のin vitro motilityアッセイ法に(1)非標識アクチン線維を混合し、(2)全反射蛍光顕微鏡を利用する事でバックグラウンドを大幅に改善し、高濃度アクチン線維/アクチン結合蛋白質下でアクチンミオシン相互作用を直接観察できるよう工夫した。筋織維蛋白質であるトロポミオシンを飽合させた場合、ミオシン上の滑り速度は裸のアクチン上の1.3倍に上昇、また同じく筋繊維蛋白質カルデスモンを飽和結合させた場合は1/3の速度となった。ミオシンと相互作用するアクチン線維の数に差はみられなかったことから、トロポミオシン、カルデスモンはミオシンとアクチンとの結合に影響を与えるのではなく、滑り運動速度そのものに影響を与える可能性が示唆される。一方、アクチン脱重合促進因子のコフィリン、脳特異的アクチン結合蛋白質ドレブリンを飽和結合したアクチン線維においては、ミオシンに結合るアクチン線維の数が大幅に減少したことから、コフィリンとドレブリンはアクチンとミオシンとの結合を阻害する可能性が示唆される。ちなみに、この観察条件と同一条件下において、トロポミオシンはアクチン活性化ミオシシATPase活性を促進、カルデスモン、コフィリン、ドレブリンはともに減衰させたが、上記理由により減衰の中身は異なると考えられる。以上、裸のアクチンとミオシンとの相互作用様式と、実際の生体で起っているであろうアクチンとミオシンとの相互作用様式は、かなり異なっている事が示唆される。今後、より生体に近いアクチンレールを作成し、同様の解析を行って行きたい。

In vivo, protein binding proteins and higher-order structures are formed. The high-order structure and interaction of protein binding protein are analyzed. The new in vitro motility approach includes (1) non-labeled linear dimensional mixing,(2) total reflection microscopy, and direct detection of linear dimensional interactions at high concentrations of protein. In the case of saturation, the sliding speed of the muscle protein increases by 1.3 times, and in the case of saturation, the sliding speed of the muscle protein increases by 1/3 The influence of the combination of the number of linear dimensions of the interaction and the possibility of the influence of the speed of motion of the slip are shown. The number of binding proteins that bind to one or more of these factors is significantly reduced, and the possibility of binding inhibition is reduced. Under the same conditions, the activity of ATPase was promoted, the degradation was reduced, and the reasons for the degradation were noted above. The interaction between the above, naked and different, and the interaction between the above, and the interaction between the above. In the future, the biological analysis of the near future, the same way to create a new line

项目成果

Brain specific actin-binding protein Drebrin inhibits the cofilin-dependent actin dynamics

脑特异性肌动蛋白结合蛋白 Drebrin 抑制丝切蛋白依赖性肌动蛋白动力学

• 发表时间: 2008
• 作者: Ishikawa R.;Katoh K.;Ebihara S.;Takahashi A.;Igarashi M.;Nakamura A.;Kohama K.
• 通讯作者: Kohama K.

Sliding of F-actin on myosin II under the conditions fully saturated with variety of actin-binding proteins

在各种肌动蛋白结合蛋白完全饱和的条件下，F-肌动蛋白在肌球蛋白 II 上的滑动

• 发表时间: 2009
• 作者: Ishikawa R.;Takahashi A.;Nakamura A.;Kohama K.
• 通讯作者: Kohama K.

Drebrin attenuates the interaction between actin and myosin-V

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2007.05.123
• 发表时间: 2007-07-27
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Ishikawa, Ryoki;Katoh, Kaoru;Kohama, Kazuhiro
• 通讯作者: Kohama, Kazuhiro

Actin-binding proteins in nerve cell growth cones

• DOI: 10.1254/jphs.cp0070071
• 发表时间: 2007-09-01
• 期刊: JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES
• 影响因子: 3.5
• 作者: Ishikawa, Ryoki;Kohama, Kazuhiro
• 通讯作者: Kohama, Kazuhiro

Nonkinase activity of MLCK in elongated filopodia formation and chemotaxis of vascular smooth muscle cells toward sphingosylphosphorylcholine.

• DOI: 10.1152/ajpheart.00965.2008
• 发表时间: 2009-02
• 期刊: American journal of physiology. Heart and circulatory physiology
• 作者: Hong Hui Wang;A. Nakamura;A. Matsumoto;S. Yoshiyama;Xiao-ran Qin;L. Ye;Ce Xie;Yue Zhang;Ying Gao;R. Ishikawa;K. Kohama