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高等植物小胞体のチューブ構造形成機構の解析

高等植物内质网管状结构形成机制分析

基本信息

批准号：
19039031
负责人：
横田悦雄
金额：
$ 2.69万
依托单位：
University of Hyogo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

小胞体(ER)チューブ形成を担っていると考えられているシロイヌナズナレティキュロン様タンパク質(RTN)を、一次構造の類似性からいくつかのグループに分類し、その内2つのグループ1、2に対するペプチド抗体をそれぞれ作製した。それらの抗体を用いて細胞染色を行ったところ、グループ1RTNは表層チューブ状構造が染色され、細胞内部にはシグナルが観察されなかった。そして植物体における発現を解析したところ、このグループに属するRTNの中で、RTN17とRTN18が発現しているごとがわかった。この2つのRTN遺伝子にGFPを連結したプラスミドをシロイヌナズナ培養細胞に導入して、これらのRTNを過剰発現させた。GFP-RTN17は表層チューブ構造と、過剰発現のためか細胞内部や核膜にも局在していた。またGFP-RTN18を過剰発現した細胞では、細長い袋構造溝観察されるようになった。この結果は、このRTN過剰発現によって、小胞体の形態変化が引き起こされた可能性を示唆した。一方グループ2に属するRTNは、抗体染色により細胞表層のチューブ構造、細胞質糸など、つまり小胞体全体に局在することが明らかになった。またMS解析によって、この抗体と反応しているRTNはRTN3であることがわかった。そしてサイトゾルとミクロゾームを含んだS2画分を用いて、in vitroにおけるERチューブ形成におけるミオシンの役割を解析した。その結果、チューブ伸長にはミオシンXIが重要であり、ミオシンVIIIは関与しないこと。まだミオシンXIが尾部領域で小胞体と相互作用あるいは結合して、アクチン繊維上をひっぱることによってERチューブ伸長が引き起こされる可能性が示唆された。

Small cell (ER) colony formation is involved in the study of the similarity of primary structure, classification, and production of antibodies. When these antibodies were used to stain the cells, the tube-like structures on the surface of the cells were stained, and the cells inside the cells were observed. In addition, the analysis of the occurrence of the plant body is carried out in the middle of RTN, RTN 17 and RTN 18. The 2 RTN gene GFP is linked to the cell culture system, and the RTN gene is introduced into the system. GFP-RTN 17 has a structure on the surface layer and a nuclear membrane inside the cell. GFP-RTN 18 is a new type of cell. These results indicate the possibility of the occurrence of RTN and the morphological change of small cells. The RTN and antibody staining of the cell surface layer, cytoplasm, and whole cell body were detected. RTN3 is the most important part of RTN3. The analysis of ER formation in vitro The result of this is that the length of the ring is greater than the length of the ring. The possibility of small cell interaction in the tail region is shown in the following table.

项目成果

期刊论文数量（7）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

An isoform of Arabidopsis myosin XI interacts with small GTPases in its C-terminal tail region.

拟南芥肌球蛋白XI的同工型与其C末端尾部区域的小GTPase相互作用。

DOI：
10.1093/jxb/ern202
发表时间：
2008
期刊：
JOURNAL OF EXPERIMENTAL BOTANY
影响因子：
6.9
作者：
Hashimoto, Kohsuke;Igarashi, Hisako;Mano, Shoji;Takenaka, Chikako;Shiina, Takashi;Yamaguchi, Masatoshi;Demura, Taku;Nishimura, Mikio;Shimmen, Teruo;Yokota, Etsuo
通讯作者：
Yokota, Etsuo

Microtubule- and actin filament-dependent motors are distributed on pollen tube mitochondria and contribute differently to their movement