高等植物ミオシンのカルシウムイオンによる制御機構の解析

钙离子对高等植物肌球蛋白的调控机制分析

• 批准号: 08740625
• 负责人: 横田 悦雄
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Himeji Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08740625/
• 关键词: 原形質流動; ミオシン; カルモジュリン; カルシウムイオン; アクチン

ユリ花粉管から単離された170-kDaミオシンは、軽鎖サブユニットであるカルモジュリンを介して、その活性がカルシウムイオン依存的に調節されている。他の高等植物に存在する170-kDaオシンも同様な性質を有するのかを調べるために、タバコ培養細胞BY-2から170-kDaミオシンの単離を試みた。ユリ花粉管の170-kDaミオシン重鎖に対する抗体を用いて解析した、各精製段階におけるBY-2細胞170-kDaミオシンの存在画分と、運動再構成法を用いて測定したミオシンの運動活性が存在する画分とはよく一致していた。また170-kDaミオシンを含む画分中には、カルモジュリンが必ず存在しており、170-kDaミオシンの運動活性はマイクロモル程度のカルシウムイオンによって阻害された。これらの結果は、BY-2細胞に含まれている170-kDaミオシンも、ユリ花粉管170-kDaミオシンと同様な生化学的性質を有することを示唆している。おもしろいことに、170-kDaミオシンを全く含んでいない画分中にも、ミオシンの運動活性が認められた。この画分中に含まれているミオシンを同定するために精製を進めた結果、170-kDaミオシン重鎖とは免疫性が全く異なる分子量172-kDa重鎖からなるミオシンが単離された。またこのミオシン画分中にも、カルモジュリンが含まれていた。更に、このミオシンとF-アクチンとのATPに依存した結合性を解析したところ、172-kDa重鎖とカルモジュリンは同じ挙動を示した。そして、このミオシンの運動活性も、マイクロモル程度のカルシウムイオンによって阻害された。これらの結果から、BY-2細胞から新しく同定された172-kDa重鎖からなるミオシンも、カルモジュリンが軽鎖サブユニットであり、その活性がカルシウムイオンによって制御されていることが明らかになった。現在、このミオシンの172-kDa重鎖に対する抗体を作製して、細胞内での局在を解析しているところである。

Pollen tube cleavage is regulated by 170-kDa protein, protein, protein and protein. The existence of 170-kDa isoforms in higher plants and their properties were investigated in vitro BY cell culture with 170-kDa isoforms The 170-kDa protein relocation-related antibody was analyzed by the method of molecular analysis, and the protein relocation-related activity of BY-2 cells was determined by the method of molecular reorganization. The 170-kDa protein contains the protein in the middle of the molecule, and the protein in the middle of the molecule has to be present. The protein in the 170-kDa protein has the activity of protein in the middle of the molecule. The results showed that BY-2 cells contained 170-kDa protein, pollen tube 170-kDa protein and similar biochemical properties. The 170-kDa protein was used as an indicator of the activity of the protein. The molecular weight of 172-kDa is different from that of 170-kDa. This is the first time I've ever seen a picture of you. In addition, the ATP dependence of the protein on the protein was analyzed and the 172-kDa protein was re-linked. The movement activity of the system is controlled by the system. The results of this study were as follows: BY-2 cells were newly isolated from the 172-kDa DNA, and the 172-kDa DNA was re-isolated from the 172-kDa DNA. Now, the 172-kDa relocation-related antibody is produced and the intracellular protein is resolved.

项目成果

Yokota E. McDonald A. R. et al.: "Localization of a 170-kDa myosin heavy chain in plant cells." Protoplasma. 185. 178-187 (1995)

Yokota E. McDonald A. R. 等人：“植物细胞中 170 kDa 肌球蛋白重链的定位”。

Yokota E. Shimmen T.: "Isolation and characterization of plant myosin from pollen tubes of lily." Protoplasma. 177. 153-162 (1994)

Yokota E. Shimmen T.：“从百合花粉管中分离和表征植物肌球蛋白。”

Shimmen T. Yokota E.: "Physiological and biochemical aspects of cytoplasmic streaming." International Review of Cytology. 155. 97-139 (1994)

Shimmen T. Yokota E.：“细胞质流的生理和生化方面。”

Yokota E. Mimura T. Shimmen T.: "Biochemical, immunochemical and immunohistochemical identification of myosin heavy chains in cultured cells of Catharanthus roseus." Plant Cell Physiology. 36(8). 1541-1547 (1995)

Yokota E. Mimura T. Shimmen T.：“长春花培养细胞中肌球蛋白重链的生化、免疫化学和免疫组织化学鉴定。”