权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

機能付加型の癌特異的複製型ヘルペスウイルスベクターの基礎開発

具有附加功能的癌症特异性复制疱疹病毒载体的基础开发

基本信息

批准号：
20015013
负责人：
藤堂具紀
金额：
$ 7.04万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20015013/
关键词：
癌ウイルスバイオテクノロジーゲノム遺伝子

项目摘要

本研究は、ウイルスゲノムを遺伝子工学的に改変して癌細胞で選択的に複製する単純ヘルペスウイルスI型(HSV-1)ベクターに直接免疫刺激遺伝子などの外来遺伝子を挿入し、ウイルス複製に伴う直接的な殺細胞効果に加え特別な機能を有する次世代の癌特異的増幅型ベクターの基礎開発を目的とした。治療域の広い増殖型第三世代HSV-1のG47Δを基本骨格として用い、BACプラズミドと2つの組換え酵素系を利用して、任意の外来遺伝子をHSV-1ゲノムに容易かつ的確に組み込むことができる独自の作製システムを活用した。腫瘍特異性の高い抗腫瘍免疫惹起型のHSV-1開発を目的に、可溶型マウスB7-1を発現するHSV-1(T-mB7.1-Ig)を作製した。HSV-1に感受性の高いA/Jマウスに、低免疫原性のNeuro2a神経芽腫細胞を植えた皮下腫瘍モデルで評価を行ったところ、T-mB7.1-Igは低用量の腫瘍内投与でも、対照ウイルスT-01に比べ高い抗腫瘍効果を示した。更に、基質依存的に発光するCBRルシフェラーゼを発現する遺伝子組換えHSV-1を作製した。CMVプロモータとHSV-1の後期発現型プロモータを用い、感染後すぐに発現が得られるタイプと、ウィルスの複製が開始してから発現が得られるタイプの2種類を作製したところ、前者のHSV-1(T-luc)の方が格段に高いルシフェラーゼ発現を示した。さまざまな経路でT-lucをマウスに投与した後にIVISで観察し、遺伝子組換えHSV-1の体内動態を追跡した。機能付加型HSV-1を活用し、さまざまながんに対するウイルス療法の治療効果向上と最適化を目指していく。

This study aims to improve the gene engineering of cancer cell selection, to replicate pure HSV-1 gene, to introduce direct immunostimulatory gene and foreign gene, to replicate HSV-1 gene with direct cytocidal effect, to enhance specific function, and to develop the next generation of cancer-specific amplitude-dependent gene. The basic framework of HSV-1 and G47 delta in the therapeutic domain is used, and BAC is used. The enzyme system of HSV-1 is used, and any foreign gene is easy to use. HSV-1(T-mB7.1-Ig) is a tumor-specific, highly anti-tumor immune-eliciting HSV-1 development target and a soluble HSV-1 development target. HSV-1 has high sensitivity to A/J and low immunogenicity to Neuro2a neuroblastoma cells. T-mB7.1-Ig has low sensitivity to T-01 and high sensitivity to T-01. In addition, the sub-component HSV-1 is controlled by the CBR system. The late development type of CMV virus and HSV-1 was detected in the middle of the infection, and after infection, it was detected in the middle of the infection, and its replication began. The two types of CMV virus were detected in the middle of the infection, and the HSV-1(T-luc) was detected in the middle of the infection. The T-luc gene was used to detect HSV-1 in vivo. The function of HSV-1 is to optimize the therapeutic effect of HSV-1.