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カルシウムチャネルの局在と機能を制御する膜複合体の解析

控制钙通道定位和功能的膜复合物的分析

基本信息

批准号：
20056009
负责人：
大塚稔久
金额：
$ 3.01万
依托单位：
University of Yamanashi (2009)University of Toyama (2008)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20056009/
关键词：
シナプス神経チャネル ELKS CAST アクティブゾーン神経伝達物質放出 RIM1

项目摘要

学習や記憶などの脳の高次機能は、神経シナプスにおける情報伝達が適切に行われることで成り立っている。神経シナプスのアクティブゾーンを構成する骨格タンパク質としてはCAST, ELKS, Bassoon, Piccolo, RIM1, Munc13-1などが知られている。一方で、神経終末へのカルシウムイオンの流入を制御するカルシウムチャネルも、アクティブゾーンにおいて重要な役割を担っている。すでにCASTおよびカルシウムチャネルがin vitroで複合体を形成していることを明らかにしている。本年度は、生体内における結合を明らかにするために免疫沈降実験の検討を行った。ラット大脳ホモジネートを可溶化し、カルシウムチャネルbetaサブユニットを用いた抗体で免疫沈降実験を行ったところ、CASTが共沈することが明らかとなった。一方、ショウジョウバエでは、カルシウムチャネルalphaサブユニットがCASTと直接結合することが報告されていたが、高等動物のCASTとカルシウムチャネルalphaサブユニットの結合は免疫沈降実験においては明らかにできなかった。ファミリーメンバーELKSのコンディショナルノックアウト(flox)を作製済みであり、今後、成熟した脳においてCreを発現するマウスとの交配を開始する。最終的には、CAST/ELKSダブルノックアウトマウスを作製し、カルシウムチャネルの局在および機能異常を総合的に解析する。

Learning and memory, high-level functions, and high-level functions. CAST, ELKS, Bassoon, Piccolo, RIM1, Munc13-1などが知られている. One side, the end of the gods is the end of the world.ムチャネルも、アクティブゾーンにおいてimportantなservice cutを聣ている.すでにCASTおよびカルシウムチャネルがin vitroでComplexをformationしていることを明らかにしている. This year, the body's immune system is combined with immune sedimentation. It is used for ラット大脳ホモジネートをsoluble し, カルシウムチャネルbeta サブユニットをいたAntibody でimmunoprecipitation実験を行ったところ, CAST が全戙ることが明らかとなった. One side, ショウジョウバエでは, カルシウムチャネルalphaサブユニットがCASTとDirectly combined with することが reportされていたが, CAST of higher animalsニットの合はimmune sedimentation 実験においては明らかにできなかった.ファミリーメンバーELKSのコンディショナルノックアウト(flox)をproduced済みであり、From now on、Matureした脳においてCreを発appearsするマウスとのMATINGをStartする. Final には、CAST/ELKSダブルノックアウトマウスをし, カルシウムチャネルのbureau in および's abnormal function を総合's にanalytics する.