カルシウムチャネルの局在と機能を制御する膜複合体の解析

控制钙通道定位和功能的膜复合物的分析

• 批准号: 20056009
• 负责人: 大塚 稔久
• 金额: $ 3.01万
• 依托单位: University of Yamanashi (2009)University of Toyama (2008)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20056009/
• 关键词: シナプス; 神経; チャネル; ELKS; CAST; アクティブゾーン; 神経伝達物質放出; RIM1

学習や記憶などの脳の高次機能は、神経シナプスにおける情報伝達が適切に行われることで成り立っている。神経シナプスのアクティブゾーンを構成する骨格タンパク質としてはCAST, ELKS, Bassoon, Piccolo, RIM1, Munc13-1などが知られている。一方で、神経終末へのカルシウムイオンの流入を制御するカルシウムチャネルも、アクティブゾーンにおいて重要な役割を担っている。すでにCASTおよびカルシウムチャネルがin vitroで複合体を形成していることを明らかにしている。本年度は、生体内における結合を明らかにするために免疫沈降実験の検討を行った。ラット大脳ホモジネートを可溶化し、カルシウムチャネルbetaサブユニットを用いた抗体で免疫沈降実験を行ったところ、CASTが共沈することが明らかとなった。一方、ショウジョウバエでは、カルシウムチャネルalphaサブユニットがCASTと直接結合することが報告されていたが、高等動物のCASTとカルシウムチャネルalphaサブユニットの結合は免疫沈降実験においては明らかにできなかった。ファミリーメンバーELKSのコンディショナルノックアウト(flox)を作製済みであり、今後、成熟した脳においてCreを発現するマウスとの交配を開始する。最終的には、CAST/ELKSダブルノックアウトマウスを作製し、カルシウムチャネルの局在および機能異常を総合的に解析する。

Learning や memory な ど の 脳 の は function of high order, god 経 シ ナ プ ス に お け る intelligence 伝 line of adequate に が わ れ る こ と で made into り っ て い る. God 経 シ ナ プ ス の ア ク テ ィ ブ ゾ ー ン を constitute す る bone タ ン パ ク qualitative と し て は CAST, ELKS, Bassoon, Piccolo, RIM1, Munc13-1 な ど が know ら れ て い る. One party で, god 経 terminal へ の カ ル シ ウ ム イ オ ン の inflows を suppression す る カ ル シ ウ ム チ ャ ネ ル も, ア ク テ ィ ブ ゾ ー ン に お い cut を bear っ て important な service て い る. す で に CAST お よ び カ ル シ ウ ム チ ャ ネ ル が in vitro で complex を form し て い る こ と を Ming ら か に し て い る. This year, <s:1>, in vivo における binding を in vivo ら にするために にするために immune degradation experiments における 検 explore を in った. Big ラ ッ ト 脳 ホ モ ジ ネ ー ト を solubilization し, カ ル シ ウ ム チ ャ ネ ル beta サ ブ ユ ニ ッ ト を with い で た antibody immune sink be 験 を line っ た と こ ろ, CAST が shen total す る こ と が Ming ら か と な っ た. Side, シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ で は, カ ル シ ウ ム チ ャ ネ ル alpha サ ブ ユ ニ ッ ト が CAST と directly combined す る こ と が report さ れ て い た が, higher animals の CAST と カ ル シ ウ ム チ ャ ネ ル alpha サ ブ ユ ニ ッ ト の combining は immune sink be 験 に お い て は Ming ら か に で き な か っ た. フ ァ ミ リ ー メ ン バ ー ELKS の コ ン デ ィ シ ョ ナ ル ノ ッ ク ア ウ ト (flox) を cropping 済 み で あ り, in the future, mature し た 脳 に お い て Cre を 発 now す る マ ウ ス と の mating を began す る. Final に は, CAST/ELKS ダ ブ ル ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス を as し, カ ル シ ウ ム チ ャ ネ ル の bureau in お よ び parafunction を 総 に of parsing す る.

项目成果

Involvement of ELKS, an active zone protein, in exocytotic release from RBL-2H3 cells.

ELKS（一种活性区域蛋白）参与 RBL-2H3 细胞的胞吐释放。

• 发表时间: 2009
• 期刊: Cellular Immunology 258
• 作者: 藤本聡志;根岸学;加藤裕教;Nomura H.
• 通讯作者: Nomura H.

神経終末アクティブゾーンにおけるシグナル伝達

神经末梢活跃区的信号传导

• 发表时间: 2008
• 作者: 藤本聡志;根岸学;加藤裕教;Nomura H.;大塚稔久
• 通讯作者: 大塚稔久