神経回路形成におけるNMDA受容体チャネルの役割

NMDA受体通道在神经回路形成中的作用

• 批准号: 09260210
• 负责人: 崎村 建司
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09260210/
• 关键词: NMDA受容体チャネル; コンディショナルジーンターゲッティング; シナプス可塑性; 神経回路形成; ノックアウトマウス

NMDA受容体チャネルは、シナプス伝達効率の変化や、発生期におけるシナプスの構築、安定化に深く関与することが示唆されており、神経ネットワーク形成の鍵を握る分子と考えられている。我々はこれまでに、NMDA受容体チャネルの機能の多様性を決定する4種類のεサブユニットをノックアウトしたマウスを作成し解析をおこなってきた。このうち、ε2サブユニット欠損個体は、哺乳反射の消失により生後24時間以内に死亡する。このサブユニットが成体で果たす役割を解析するために、成体でのみε2サブユニットを欠失するマウスの作成を試みた。発達初期より発現し、生後その発現が減少するε4サブユニット遺伝子プロモーターを利用し、ε4サブユニットの3^1非翻訳領域にIRES(Internal Ribosome Entry Site)とε2サブユニットのcDNAをつなぎ、ε4サブユニット遺伝子座に相同組換えによってこの遺伝子を導入したマウスを作成した。この遺伝子導入マウスでは、ε4-ε2融合mRNAが野生型ε4サブユニットmRNAと同程度発現していたので、ε2サブユニット欠損マウスをかけ合わせ新生時期致死の回避をめざした。しかし、融合mRNAからのε2サブユニットの翻訳効率が低く、ε2サブユニットを欠損マウスの新生仔死を回避することはできなかった。現在、P1ファージのcre-loxPの組換え系を用いて成体でε2サブユニットをノックアウトするために、ε2サブユニット遺伝子にloxP配列を組み込んだマウスと時期特異的にcreを発現するマウスの作成を進めている。

NMDA by let body チ ャ ネ ル は, シ ナ プ ス 伝 の of unseen rate variations や, 発 stage に お け る シ ナ プ ス の constructs, stabilization に deep く masato and す る こ と が in stopping さ れ て お り, god 経 ネ ッ ト ワ ー ク form の key を grip る molecules と exam え ら れ て い る. I 々 は こ れ ま で に, NMDA let body チ ャ ネ ル の function の many others in sexual を decide す る 4 kinds の epsilon サ ブ ユ ニ ッ ト を ノ ッ ク ア ウ ト し た マ ウ ス を made し parsing を お こ な っ て き た. <s:1> うち, ε2サブユニット underdamaged individuals うち, disappearance of mammalian reflex <s:1> によ に death する within 24 hours after birth. こ の サ ブ ユ ニ ッ ト が adult で fruit た す "を cut parsing す る た め に, adult で の み epsilon 2 サ ブ ユ ニ ッ ト を owe lost す る マ ウ ス の made を try み た. 発 of early よ り 発 し, postnatal そ の 発 が now reduce す る epsilon4 サ ブ ユ ニ ッ ト heritage 伝 son プ ロ モ ー タ ー を using し, epsilon 4 サ ブ ユ ニ ッ ト の 3 ^ 1 non 訳 field に IRES (Internal Ribosome Entry Site) と epsilon 2 サ ブ ユ ニ ッ ト の cDNA を つ な ぎ, epsilon 4 サ ブ ユ ニ ッ ト heritage 伝 stroma に in same group え に よ っ て こ の posthumous son 伝 を import し た マ ウ ス を made し た. こ の posthumous son 伝 import マ ウ ス で は, epsilon 4 - epsilon 2 fusion mRNA が wild-type epsilon4 サ ブ ユ ニ ッ ト mRNA と 発 now the same extent し て い た の で, epsilon 2 サ ブ ユ ニ ッ ト owe loss マ ウ ス を か け close わ せ lethal の newborn period to avoid を め ざ し た. し か し, fusion mRNA か ら の epsilon 2 サ ブ ユ ニ ッ ト の turn 訳 が low く working rate, epsilon 2 サ ブ ユ ニ ッ ト を owe loss マ ウ ス の newborn larvae die を avoid す る こ と は で き な か っ た. Now, P1 フ ァ ー ジ の cre - loxP の group in department of え を with い て adult で epsilon 2 サ ブ ユ ニ ッ ト を ノ ッ ク ア ウ ト す る た め に, epsilon 2 サ ブ ユ ニ ッ ト posthumous son 伝 に loxP with column group を み 込 ん だ マ ウ ス と period specific に cre を 発 now す る マ ウ ス の made を into め て い る.

项目成果

Kurihara, H.: "Impaired parallel fiber-Purkinje cell synapse stabilization during cerebellar development of mutant mice lacking GluRδ 2" J. Neurosci.17. 9613-9623 (1997)

Kurihara, H.：“缺乏 GluRδ 2 的突变小鼠小脑发育过程中平行纤维浦肯野细胞突触稳定性受损”J. Neurosci.17 (1997)。

〓村建司: "NMDA受容体チャネルのノックアウト" 神経研究の進歩. 41. 746-755 (1997)

Kenji Mura：“NMDA 受体通道的敲除”神经学研究进展 41. 746-755 (1997)。

Ito, I.: "Synapse-selective impairment of NMDA receptor functions in mice lacking NMDA receptor ε1 or ε2 subunit" J. Physiol. (Lond. ). 500.2. 401-408 (1997)

Ito, I.：“缺乏 NMDA 受体 ε1 或 ε2 亚基的小鼠中 NMDA 受体功能的突触选择性损伤”J. Physiol. (Lond.) 401-408 (1997)。

〓村建司: "脳:高次機能と分子機構からさぐる脳疾患" メジカルビュー社, 175 (1997)

〓Kenji Mura：《脑：从高阶功能和分子机制探索脑疾病》Medical View Publishing，175（1997）

Minami,T.: "Absence of prostaglandin E_2-induced hyperalgesia in NMDA receptor ε subunit knockout mice." Br.J.Pharmacol.120. 1522-1526 (1997)

Minami, T.：“NMDA 受体 ε 亚基敲除小鼠中不存在前列腺素 E_2 诱导的痛觉过敏。Br.J.Pharmacol.120 (1997)。