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ニューロン及びグリア細胞における細胞特量蛋白遺伝子の転写制御機構の研究

ニューロン及びグリア細胞における細胞特量蛋白遺伝子の転写制御機構の研究
神经元和胶质细胞细胞特异性蛋白基因转录调控机制研究
批准号：
62620507
负责人：
高橋 康夫
金额：
$1.28万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1987
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1987 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-62620507/
关键词：
ニューロングリア細胞遺伝子転写制御因子蛋白プロモーターエンハンサーゲルシフト分析

项目摘要

项目成果

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中枢神経系細胞はニューロンアストログリアオリゴデンドログリアの3種類の細胞から構成されているがその発生分化は殆ど解明されていない. 我々はニューロン特量蛋白としてニューロン特量エノラーゼ(NSE)コレンストキニン(CCK)アストログリア特量蛋白としてS-100βオリゴデンドログリア特量蛋白として2′, 3′環状ヌクレオチド水解酵素(CNP)について夫々遺伝子クローニングを行い現在前3者では成功した. そこでこれらの遺伝子を使用して以下の転写実験を行った.(1)HeLa細胞由来の無細胞転写系を使用してNSE, CCK, S-100β遺伝子の転写を検討しNSE, CCKでは忠実な転写産物を得ることができた. プロモーター領域の固定を行うこともできた. しかしS-100βでは成功しなかった. 脳核抽出液やニューロブラストームグリオーム培養細胞抽出液で試みたが未だ成功しなかった.(2)NSE, S-100βの遺伝子の5′隣接領域のDNA断片とCAT遺伝子或はlacZ遺伝子とを結合した融合遺伝子を作成し培養細胞に導入しinvivo転写実験を行った. 欠失DNA断片を使用した結果プロモーター領域やサイレンサーなどの存在を立証した.(3)NSE, CCK, S-100βの遺伝子の5′隣接領域のDNA断片と結合して転写を制御すると考えられる脳細胞核内蛋白因子を検索し夫々の遺伝子に結合する蛋白の存在をゲルシフト分析法ExonucleaseIII法, DNaseIfootprinting法により証明することが出来た. この中S-100βについてはSouth-Wastern法でその蛋白の分子量を測定し約67000であることを見出した.
期刊论文(12)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Hiroshi Usui: Biochemisyry Internat.15. 809-816 (1987)
臼井宏：生物化学国际.15。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
高橋 康夫: 実験医学. 6. 32-36 (1988)
高桥康夫：实验医学。6. 32-36 (1988)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Tadaoki Kurihara: J.Biol.Chem.262. 3256-3261 (1987)
栗原忠兴：J.Biol.Chem.262。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Kenji Sakimura: Gene. 60. 103-113 (1987)
崎村健二：基因。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 6 条
    史料としての「使琉球詩」の研究
    • 批准号：
      16656187
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Exploratory Research
    • 资助金额：
      $2.11万
    • 财政年份：
      2004
    • 负责人：
      高橋 康夫
    • 依托单位：
      Kyoto University
    中世社会と寄合-その建築史的研究-
    • 批准号：
      06451120
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
    • 资助金额：
      $4.1万
    • 财政年份：
      1994
    • 负责人：
      高橋 康夫
    • 依托单位：
      Kyoto University
    プラズマ窒化プロセスに及ぼすイオン化と発熱効果に関する研究
    • 批准号：
      04650666
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
    • 资助金额：
      $0.0万
    • 财政年份：
      1992
    • 负责人：
      高橋 康夫
    • 依托单位：
      Osaka University
    ニューロン及びグリアに局在する機能蛋白質の遺伝子発現調節蛋白の分離と超微量分析
    • 批准号：
      63638505
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $0.96万
    • 财政年份：
      1988
    • 负责人：
      高橋 康夫
    • 依托单位：
      Niigata University
    海外基金