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ニューロン及びグリアに局在する機能蛋白質の遺伝子発現調節蛋白の分離と超微量分析

ニューロン及びグリアに局在する機能蛋白質の遺伝子発現調節蛋白の分離と超微量分析
神经元和神经胶质细胞中功能蛋白的基因表达调控蛋白的分离和超痕量分析
批准号：
63638505
负责人：
高橋 康夫
金额：
$0.96万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1988
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1988 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-63638505/
关键词：
ニューロングリア細胞遺伝子転写調節因子蛋白微量分析プロモーター

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神経回路網の形成に関与する蛋白のうち神経伝達物質として機能すると考えられるコレシストキニン(CCK)及びニューロンの突起伸長作用を有するS-100βの2つの機能蛋白の遺伝子をクローニングし、その構造を解明した。これらの遺伝子のプロモータ領域と結合してその遺伝子発現を制御すると考えられる微量蛋白についてこれを分離しその構造を解明しようと試みた。今年度はその中のCCKの遺伝子発現調節蛋白について述べる。(1)ゲルシフト分析法及びDNase footprinting法によって脳の細胞核抽出蛋白と結合すると考えられるDNA領域を明らかにすることができた。そこでゲルシフト分析法で見出した4コのバンドのうち脳特異的と認められた第4のバンドに相応する蛋白を精製しようと試みた。(2)精製の手段として以下の方法を使用した。先づ脳の細胞核の抽出液を硫安で分画し、10〜60%硫安画分を集めてヘパリン-アガロースクロマトグラフィーを行い、食塩による段階的溶出を行い、ゲルシフト分析で各溶出画分を検討して、第4バンドの蛋白を含む画分を26mp_2の合成したOligodeoxynucleotideをカップリングしたDNA affimtyカラムで精製を行った。また別にヘパリン-アガロースクロマトグラフィー後の画分をゲルシフトで分析しその第4バンドより直接蛋白を溶出した。(3)両者の方法で得た蛋白をSDS-PAGEで分析した処、何れの方法でも殆んど単一と思われるバンドを得ることが出来た。この蛋白について今後より詳細な検討を行う予定である。
期刊论文(16)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Toru,Ichimura: Proc.Natl.Acad.Sci. 85. 7084-7088 (1988)
市村彻：Proc.Natl.Acad.Sci。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Yasuo,Takahashi: "Proceeding of 6th international symposium on Calcium-binding proteins in health and disease" PLENUM PRESS,
Yasuo，Takahashi：“第六届健康与疾病中钙结合蛋白国际研讨会论文集”PLENUM PRESS，
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
高橋康夫: 蛋白質、核酸、酵素. 33. 1681-1687 (1988)
高桥康夫：蛋白质、核酸、酶。33。1681-1687 (1988)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Toru,Yamakuni: J.Neurochem.50. 282-284 (1988)
山国彻：J.Neurochem.50。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 8 条
    史料としての「使琉球詩」の研究
    • 批准号：
      16656187
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Exploratory Research
    • 资助金额：
      $2.11万
    • 财政年份：
      2004
    • 负责人：
      高橋 康夫
    • 依托单位：
      Kyoto University
    中世社会と寄合-その建築史的研究-
    • 批准号：
      06451120
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
    • 资助金额：
      $4.1万
    • 财政年份：
      1994
    • 负责人：
      高橋 康夫
    • 依托单位：
      Kyoto University
    プラズマ窒化プロセスに及ぼすイオン化と発熱効果に関する研究
    • 批准号：
      04650666
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
    • 资助金额：
      $0.0万
    • 财政年份：
      1992
    • 负责人：
      高橋 康夫
    • 依托单位：
      Osaka University
    ニューロン及びグリア細胞における細胞特異蛋白遺伝子の転写制御機構の研究
    • 批准号：
      63620505
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $1.28万
    • 财政年份：
      1988
    • 负责人：
      高橋 康夫
    • 依托单位：
      Niigata University
    海外基金