中枢神経系グリア細胞の分化における遺伝子制御ネットワーク

中枢神经系统胶质细胞分化中的基因调控网络

• 批准号: 08250201
• 负责人: 岡野 栄之
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08250201/
• 关键词: ショウジョウバエ; ホメオドメイン蛋白質; repo; グリア細胞; 転写因子

reverse polarity(repo)遺伝子産物はショウジョウバエのP-エレメントの挿入変異法により見い出されたpaired-likeホメオドメインを持つグリア細胞に特異的に発現する転写因子であり、repo機能欠損変異体における解析からグリア細胞の終分化に関わっていると考えられる。本研究はショウジョウバエ中枢神経系内での異所発現や酵母のone-hybrid法等の系を用いてrepo下流遺伝子産物を同定することにより、グリア細胞の分化決定機構の遺伝子ネットワークを明らかにすることを目的とする。本年度は以下4点の研究成果を挙げた。(1)repo遺伝子産物の全長或いは欠失変異体をGALAのDNA結合ドメインを融合し、酵母内で発現させてGALAレポーターの転写活性化を検討して、repo遺伝子産物が転写活性因子でありホメオドメイン外のN末側及びC末側に少なくとも一箇所ずつ活性化に必要なドメインが存在することが示唆された。(2)repo遺伝子産物のin vivoにおけるグリア細胞への分化促進機能を検討するために、神経芽細胞に異所発現させ、subsetのグリア細胞を染色するエンハンサー・トラップ系統において、部分的且つ間接的ではあるがマーカー遺伝子の発現の亢進を見いだした。現在責任遺伝子のクローニングを行っており、さらにこれらの遺伝子産物の発現がrepoに依存的或いは非依存的であるかについて、repoの上流であるglial cells missing(gcm)をrepo機能欠損変異下で異所発現させることにより検討する予定である。(3)repo遺伝子産物の下流標的遺伝子を同定するために、酵母のone-hybrid法によりrepo遺伝子産物に依存して転写活性化される可能性のあるゲノムクローンを約50個分離した。(4)repoと同様にpaired-likeホメオドメインを持つ遺伝子群を探索し、線虫のunc-4の相同分子(Dunc-4)をショウジョウバエより分離し、subsetの神経細胞において発現していることを明らかにした。現在Dunc-4が運動ニューロン或いは介在ニューロンに発現しているのか検討するために、poromoter領域を同定しtau-lacZとの融合遺伝子を作製している。またrepo遺伝子産物との構造機能的相同性を検討するために、転写抑制因子であるengrailedの転写抑制ドメインとの融合遺伝子を遺伝子導入してDunc-4の機能をdominant-interferする個体を作製を検討している。

reverse polarity (repo) legacy product はショウジョウバエのP-エレメントのinsert 変different method により见い出されたpaired-like ホメオドメイThe specific に発appears and writes the factor であり which is specific to the ンをholding つグリアcell, and the repo function is impaired The analysis of the terminal differentiation of allogeneic cells and the analysis of the terminal differentiation of allogeneic cells. This study is based on the use of the yeast one-hybrid method and other systems within the central nervous system.伝子 Product を同定することにより、グリア Cell Differentiation Determining Mechanism の缝子ネットワークを明らかにすることをpurpose とする. This year, we have the following four research results. (1) The full length of the repo sub-product or the DNA-binding version of the isoform GALAインをfusion し、Yeast で発appear させてGALAレポーターの転WRITE ACTIVATION を検して, the repo residue product is the active factor でありホメオドメイン外のN end and びC end There is a need for activation of the side of the house and there is a need for activation of the place. (2)repo legacy product のin Vivo Cells Differentiation Promotion Functions Cellsをdyeing するエンハンサー・トラップ system において、partial and つIndirect ではあるがマーカー缝子の発 appear の Hyperactivity を见いだした. Now we are responsible for the remaining products of the remaining products.であるかについて which is dependent on epo or non-dependent, repo is high flow であるglial Cells missing(gcm)をrepo function is damaged and the difference is different. (3) The downstream target of the repo product is the same as the one-hybrid method of yeast and one-hybrid method.りrepo's remaining sub-products depend on the possibility of activation and activation, and the possibility of separation is about 50. (4)repoと同様にpaired-like ホメオドメインをhold つ伝子群をExplorationし, nematode のunc-4の same molecule (Dunc-4) をショウジョウバエよりseparationし、subsetの神経外围 Cellsにおいて発成していることを明らかにした. Now Dunc-4 ニューロン or いはsuke in ニューロンに発appears しているのか検検曰するために, poromoter field を同定しtau-lacZ とのfusion legacy 伝子を产している. The identity of the structure and function of the またrepo legacy product とのを検曰するために、転WRITING Suppressor であるengrailedの転WRITE SUPpression ドメインとのfusion remaining 伝子 を remain 伝子 import してDunc-4のFUNCTION をdominant-interferする Individual を 検椟している.

项目成果

Sawamoto, K., Okano, H. et al.: "Argos is required for optic lobe development and projection of photoreceptor axons." Developmental Dynamics. 205. 162-171 (1996)

Sawamoto, K.、Okano, H. 等人：“Argos 是视叶发育和光感受器轴突投射所必需的。”

Kume,S.,Okano,H.et al.: "Developmental expression of Inositol 1,4,5-trisphosphate receptor and structural changes in the endoplasmic reticulum during oogenesis and meiotic maturation of Xenopus laevis." Developmental Biology. (印刷中). (1997)

Kume, S., Okano, H. 等人：“爪蟾卵子发生和减数分裂成熟过程中肌醇 1,4,5-三磷酸受体的发育表达和内质网的结构变化（正在出版）。” (1997)

Okano,H.,et al.: "Basic Neuroscience in Invertebrate" Ed.H.Koike,Y.Kidokoro,K.Takahashi and T.Kanasei Japan Scientific Societies Press, 61-80 (1996)

Okano,H.,et al.：“无脊椎动物的基础神经科学”Ed.H.Koike、Y.Kidokoro、K.Takahashi 和 T.Kanasei 日本科学会出版社，61-80 (1996)

Muto,A.,Okano,H.et al: "Calcium wave and oscillation during cleavage stage of Xenopus laevise embryo and its inhibition by Heparin." J.Cell Biol.135. 181-190 (1996)

Muto,A.,Okano,H.等人：“爪蟾胚胎卵裂阶段的钙波和振荡及其肝素的抑制。”

Okabe.M,.Sawamoto,K.,and Okano,H.: "The function of Drosophila argos gene product in the development of embryonic chordotonal organs." Developmental Biology. 175. 37-49 (1996)

Okabe.M、Sawamoto,K. 和 Okano,H.：“果蝇 argos 基因产物在胚胎脊索器官发育中的功能。”