中枢神経系グリア細胞の分化における遺伝子制御ネットワーク

中枢神经系统胶质细胞分化中的基因调控网络

• 批准号: 08250201
• 负责人: 岡野 栄之
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08250201/
• 关键词: ショウジョウバエ; ホメオドメイン蛋白質; repo; グリア細胞; 転写因子

reverse polarity(repo)遺伝子産物はショウジョウバエのP-エレメントの挿入変異法により見い出されたpaired-likeホメオドメインを持つグリア細胞に特異的に発現する転写因子であり、repo機能欠損変異体における解析からグリア細胞の終分化に関わっていると考えられる。本研究はショウジョウバエ中枢神経系内での異所発現や酵母のone-hybrid法等の系を用いてrepo下流遺伝子産物を同定することにより、グリア細胞の分化決定機構の遺伝子ネットワークを明らかにすることを目的とする。本年度は以下4点の研究成果を挙げた。(1)repo遺伝子産物の全長或いは欠失変異体をGALAのDNA結合ドメインを融合し、酵母内で発現させてGALAレポーターの転写活性化を検討して、repo遺伝子産物が転写活性因子でありホメオドメイン外のN末側及びC末側に少なくとも一箇所ずつ活性化に必要なドメインが存在することが示唆された。(2)repo遺伝子産物のin vivoにおけるグリア細胞への分化促進機能を検討するために、神経芽細胞に異所発現させ、subsetのグリア細胞を染色するエンハンサー・トラップ系統において、部分的且つ間接的ではあるがマーカー遺伝子の発現の亢進を見いだした。現在責任遺伝子のクローニングを行っており、さらにこれらの遺伝子産物の発現がrepoに依存的或いは非依存的であるかについて、repoの上流であるglial cells missing(gcm)をrepo機能欠損変異下で異所発現させることにより検討する予定である。(3)repo遺伝子産物の下流標的遺伝子を同定するために、酵母のone-hybrid法によりrepo遺伝子産物に依存して転写活性化される可能性のあるゲノムクローンを約50個分離した。(4)repoと同様にpaired-likeホメオドメインを持つ遺伝子群を探索し、線虫のunc-4の相同分子(Dunc-4)をショウジョウバエより分離し、subsetの神経細胞において発現していることを明らかにした。現在Dunc-4が運動ニューロン或いは介在ニューロンに発現しているのか検討するために、poromoter領域を同定しtau-lacZとの融合遺伝子を作製している。またrepo遺伝子産物との構造機能的相同性を検討するために、転写抑制因子であるengrailedの転写抑制ドメインとの融合遺伝子を遺伝子導入してDunc-4の機能をdominant-interferする個体を作製を検討している。

reverse Polarity (repo) but the latter's 伝 は シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ の P - エ レ メ ン ト の scions into - different method に よ り see い out さ れ た paired - like ホ メ オ ド メ イ ン を hold つ グ リ ア cells に specific に 発 now す る planning write factor で あ り, repo functional owe loss - variant に お け る parsing か ら グ リ の ア cells The division of に is related to わって ると examines えられる. This study は シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ で within central 経 god is の 発 や now by different yeast の one - hybrid method の を with い て repo dirty legacy 伝 zi chan content を with fixed す る こ と に よ り, グ リ ア cells の decision institutions の heritage 伝 son ネ ッ ト ワ ー ク を Ming ら か に す る こ と を purpose と す る. The following four research achievements of this year are を挙げた. (1) the repo heritage 伝 zi chan の span or い は owe lost - variant を GALA の dna-binding ド メ イ ン を fusion し, yeast で 発 now さ せ て GALA レ ポ ー タ ー の planning write activeness を beg し 検 て, 'but the latter's 伝 が planning write activity factor で あ り ホ メ オ ド メ イ ン の N at the end of the side and び C at the end of the side outside に less な く と も what a ず つ Activation に necessary なドメ する が が する が indicates された. (2)repo leaves 伝 offspring in Vivo に お け る グ リ ア cells へ の differentiation function of promoting を beg す 検 る た め に, god 経 bud cells に 発 now さ せ, subset の グ リ ア cells を dyeing す る エ ン ハ ン サ ー · ト ラ ッ プ system に お い て, partial and つ indirect で は あ る が マ ー カ ー heritage 伝 son の 発 is の hyperthyroidism を see い だ し た. Now responsibility heritage 伝 son の ク ロ ー ニ ン グ を line っ て お り, さ ら に こ れ ら の heritage 伝 zi chan content の 発 が now repo に interdependent or い は of interdependent で あ る か に つ い て, repo の upper で あ る glial cells missing(gcm)をrepo function deficiency changes で abnormalities occur させる させる とによ 検 検 seek する to determine である. (3) of the latter's repo but 伝 content の dirty mark heritage 伝 を son be す る た め に, yeast の one - hybrid method に よ り repo heritage 伝 zi chan content に dependent し て planning write activeness さ れ る possibility の あ る ゲ ノ ム ク ロ ー ン を about 50 separate し た. (4) the repo と with others に paired - like ホ メ オ ド メ イ ン を hold つ heritage 伝 subgroup を explore し and nematodes の unc - 4 の molecules (Dunc - 4) same を シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ よ り separation し, subset の god 経 cells に お い て 発 now し て い る こ と を Ming ら か に し た. Now Dunc - 4 が movement ニ ュ ー ロ ン or い は interface in ニ ュ ー ロ ン に 発 now し て い る の か beg す 検 る た め に, を poromoter field with し tau - lacZ と を son survived 伝 の fusion system し て い る. ま た repo heritage 伝 zi chan content と の phase structure function of same-sex を beg す 検 る た め に, planning to write inhibitory factor で あ る engrailed の planning write inhibit ド メ イ ン と の fusion heritage 伝 child を but 伝 import し て の function を Dunc - 4 dominant - interfer す る individual を cropping を beg し 検 て い る.

项目成果

Sawamoto, K., Okano, H. et al.: "Argos is required for optic lobe development and projection of photoreceptor axons." Developmental Dynamics. 205. 162-171 (1996)

Sawamoto, K.、Okano, H. 等人：“Argos 是视叶发育和光感受器轴突投射所必需的。”

Kume,S.,Okano,H.et al.: "Developmental expression of Inositol 1,4,5-trisphosphate receptor and structural changes in the endoplasmic reticulum during oogenesis and meiotic maturation of Xenopus laevis." Developmental Biology. (印刷中). (1997)

Kume, S., Okano, H. 等人：“爪蟾卵子发生和减数分裂成熟过程中肌醇 1,4,5-三磷酸受体的发育表达和内质网的结构变化（正在出版）。” (1997)

Okano,H.,et al.: "Basic Neuroscience in Invertebrate" Ed.H.Koike,Y.Kidokoro,K.Takahashi and T.Kanasei Japan Scientific Societies Press, 61-80 (1996)

Okano,H.,et al.：“无脊椎动物的基础神经科学”Ed.H.Koike、Y.Kidokoro、K.Takahashi 和 T.Kanasei 日本科学会出版社，61-80 (1996)

Muto,A.,Okano,H.et al: "Calcium wave and oscillation during cleavage stage of Xenopus laevise embryo and its inhibition by Heparin." J.Cell Biol.135. 181-190 (1996)

Muto,A.,Okano,H.等人：“爪蟾胚胎卵裂阶段的钙波和振荡及其肝素的抑制。”

Okabe.M,.Sawamoto,K.,and Okano,H.: "The function of Drosophila argos gene product in the development of embryonic chordotonal organs." Developmental Biology. 175. 37-49 (1996)

Okabe.M、Sawamoto,K. 和 Okano,H.：“果蝇 argos 基因产物在胚胎脊索器官发育中的功能。”