遺伝子の時期および部位特異的機能阻害の新手法

基因计时和位点特异性功能抑制的新方法

基本信息

  • 批准号:
    15011251
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 3.65万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    2003
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2003 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

ケージドアンチセンスオリゴの合成法の確立:アンチセンスオリゴを用いた時期および部位特異的な機能阻害を行うため、ケージドアンチセンスオリゴの合成をめざして研究を行った。様々なアンチセンスオリゴに共通する核酸塩基部分に光分解性保護基を導入する条件を検討した。その結果,我々のグループで開発した新しい光分解性保護基,Bhcmoc基とBmcmoc基を,デオキシアデノシンおよびシチジンのアミノ基に導入することに成功した。合成した新規ケージドデオキシヌクレオシドの光反応性を,これまでに報告されているケージドヌクレオシドと比較したところ,いずれの化合物も20-30倍高い効率であることが分かった。このことは,導入したケージ1個に付き照射する光の量を1/20から1/30に落とせることを意味する。アンチセンスオリゴは,通常15塩基程度の長さのものを用いるので,その活性を光制御するためには,複数個のケージを導入する必要がある。その場合,BhcmocおよびBmcmoc基で観測された高い光反応性は,大きな利点になる。さらに,ヒドロキシル基の新しい光分解性保護基を開発し,アデノシンのケージド化合物に応用することに成功した。ケージドRNAi法の確立:RNAi法の光制御を実現するために,2つのアプローチを検討した。まず,光解離性のdsRNAクロスリンカーを3種類設計合成した。これを用いて,合成siRNAの活性を光制御するための最適な反応条件を検討している。また,2つ目のアプローチとして,細胞内でshRNAを生成するプラスミドベクターのケージングを検討している。現在までのところ,ルシフェラーゼの発現を指標にして,プラスミドケージングに最適な条件を確立しつつある。
ケ ー ジ ド ア ン チ セ ン ス オ リ ゴ の synthesis の established: ア ン チ セ ン ス オ リ ゴ を with い た period お よ び site specific な function line resistance against を う た め, ケ ー ジ ド ア ン チ セ ン ス オ リ ゴ の synthetic を め ざ し を line っ て research た. Others 々 な ア ン チ セ ン ス オ リ ゴ に common す る nucleic acid salt base part に light of decomposition protection base を import す る conditions を beg し 検 た. そ の as a result, I 々 の グ ル ー プ で open 発 し た new し い photolysis protection base, Bhcmoc base と Bmcmoc を, デ オ キ シ ア デ ノ シ ン お よ び シ チ ジ ン の ア ミ ノ base に import す る こ と に successful し た. Synthetic し た new rules ケ ー ジ ド デ オ キ シ ヌ ク レ オ シ ド の light anti 応 を, こ れ ま で に report さ れ て い る ケ ー ジ ド ヌ ク レ オ シ ド と compare し た と こ ろ, い ず れ の compound も 20 to 30 times higher い sharper rate で あ る こ と が points か っ た. こ の こ と は, import し た ケ ー ジ 1 に pay き irradiation す る light の quantity を 1/20 か ら 1/30 に fall と せ る こ と を mean す る. ア ン チ セ ン ス オ リ ゴ は, usually 15 degree of salt base の long さ の も の を with い る の で, そ の を light active suppression す る た め に は, plural の ケ ー ジ を import す る necessary が あ る. In the case of そ そ,Bhcmocおよび and Bmcmoc basis で観 test された high <s:1> light reflectivity 応 そ, large <s:1> な advantage point になる. さ ら に, ヒ ド ロ キ シ ル の new し い light of decomposition to protect を open 発 し, ア デ ノ シ ン の ケ ー ジ ド compound に 応 with す る こ と に successful し た. Youdaoplaceholder0 ケ ジド ジドRNAi method <s:1> establishment :RNAi method <s:1> light control を occurrence するために,2 <s:1> アプロ チを検 チを検 discussion た. Youdaoplaceholder0, photodissociative <s:1> dsRNA ロスリ ロスリ カ カ を を3 types designed and synthesized た た. こ れ を with い て, synthetic siRNA の を light active suppression す る た め の optimum な anti 応 conditions を beg し 検 て い る. ま た, 2 つ の ア プ ロ ー チ と し て, intracellular で shRNA を generated す る プ ラ ス ミ ド ベ ク タ ー の ケ ー ジ ン グ を beg し 検 て い る. Now ま で の と こ ろ, ル シ フ ェ ラ ー ゼ の 発 now を index に し て, プ ラ ス ミ ド ケ ー ジ ン グ optimal な conditions に を establish し つ つ あ る.

项目成果

期刊论文数量(6)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
H.Mizuno et al.: "Photo-induced cleavage for the green-to-red conversion of a fluorescent protein"Molecular Cell. 12. 1051-1058 (2003)
H.Mizuno 等人:“荧光蛋白绿红转换的光诱导裂解”分子细胞。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
A.Z.Suzuki et al.: "Coumarin-4-ylmethoxycarbonyls as phototriggers for alcohols and phenols"Org.Lett.. 5. 4867-4870 (2003)
A.Z.Suzuki 等人:“香豆素-4-基甲氧基羰基作为醇和酚的光触发器”Org.Lett.. 5. 4867-4870 (2003)
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
古田寿昭: "先端の分析法-理工学からナノ・バイオまで"エヌ・ティー・エス. (2004)
Toshiaki Furuta:“高级分析方法 - 从科学和工程到纳米生物”NTS (2004)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
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  • 资助金额:
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知道了