ファンコニ貧血と骨髄異形成症候群におけるゲノム不安定性の分子機構の解明

阐明范可尼贫血和骨髓增生异常综合征基因组不稳定性的分子机制

基本信息

批准号：
15023215
负责人：
山下孝之
金额：
$ 4.1万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

Fanconi貧血(FA)は遺伝的に異なる少なくとも11群に分類され、このうち8群の遺伝子が同定されている。これらの遺伝子産物のうちFANCA/C/E/F/G/Lを含む核内複合体(FA複合体)の形成に依存してFANCD2がユビキチン化により活性化され、この活性型FANCD2がBRCA1,BRCA2/FANCD1と相互作用してゲノムを安定化すると考えられる。本研究では、FA複合体の動態とFANCD2活性化の関係を明らかにするために、FANCAのN末領域に含まれるFANCG結合部位と核局剤化シグナルのアミノ酸をアラニンに置換した変異体を用いて解析を行った。我々の結果は、FANCD2の活性化にとって安定なFA複合体全体の形成は必須ではなく、特にFANCA/Lの核移行が重要であること、またFANCGはFANCAに結合してその核移行を抑制的に制御することを示唆した。さらに、我々はFANCA結合蛋白としてHsc70を同定した。同時にFANCAにはHsp90/HSP40が結合しており、dominant-negative体や特異的阻害剤の効果はこれらのシャペロン複合体がFANCAの発現レベルおよび核移行の制御に重要であることを示唆した。FA患者検体の解析では、27家系でFANCAの変異を同定し、特にlarge deletionの新しい発生機構を見出した。また、FAにおいてはリンパ球におけるrevefsionが高頻度で見出されるが、我々は骨髄細胞系統に選択的に見られるreversionとこれによる造血の長期的維持を示す症例をはじめて見出した。これは、FAにおける早期の遺伝子治療の有用性を示唆する。

Fanconi贫血（FA）被分类为至少11个遗传学不同的组，其中已鉴定出八组基因。在这些基因产物中，FANCD2可能会被泛素化激活，具体取决于含有fanca/c/c/e/e/f/g/l的核复合物（FA复合物）的形成，而这种活跃形式的FANCD2与BRCA1和BRCA1和BRCA2/FANCD1相互作用。在这项研究中，为了阐明FA复合物的动力学与FANCD2激活之间的关系，我们使用一个突变体进行了分析，其中FANCG结合位点在FANCA的N末端区域中包含的fancg结合位点与核定位信号的氨基酸替换为丙氨酸。我们的结果表明，整个FA复合物的形成，稳定于FANCD2激活，并不是必需的，Fanca/L的核易位尤为重要，Fancg与Fanca结合并抑制其核易位。此外，我们将HSC70鉴定为FANCA结合蛋白。同时，HSP90/HSP40与FANCA结合，这表明主导体和特定抑制剂的影响对于控制FANCA表达水平和核转运很重要。对FA患者标本的分析鉴定了27个家庭的Fanca突变，并发现了新的大型缺失的新发育机制。此外，尽管在FA中发现了淋巴细胞中的Revefsion，但我们发现在首次显示髓样细胞系中选择性恢复和长期维持造血的病例。这表明早期基因治疗在FA中的实用性。