ウイルス感染防御機構における2本鎖RNA結合および合成タンパク質の機能解析

双链RNA结合和合成蛋白在病毒感染防御机制中的功能分析

• 批准号: 15028207
• 负责人: 福原 敏行
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokyo University of Agriculture and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15028207/
• 关键词: 2本鎖RNA; 2本鎖RNA結合タンパク質; RNA依存RNA合成酵素; Dicer; ジーンサイレンシング; アグロバクテリウム; Co-infiltration; 遺伝子破壊株

2本鎖RNA結合タンパク質(dsRBP)およびRNA依存RNA合成酵素(RdRp)のウイルス感染防御機構における役割を解明することを目的として、N末端に2つの2本鎖RNA結合モチーフ(dsRBM)を含みRNAiに関与するタンパク質RDE-4と構造が似ているHYL1、DRB2,DRB4,DRB5、4種のDicer様タンパク質(DCL1-DCL4)およびRNaseIII様タンパク質RTL2、これら計9種のシロイヌナズナのタンパク質について主に生化学的に解析した。その結果、1)5種,(HYL1,DRB2,DRB4,DRB5,DCL1)が2本鎖RNA特異的結合活性の確認、2)RTL2において2本鎖RNA分解活性の確認、3)HYL1の2個のdsRBMのうちC末側のモチーフ(dsRBM2)は2本鎖RNA結合能がなく、N末側のモチーフ(dsRBM1)のみに2本鎖RNA結合能があること、4)これらのdsRBPは、dsRBMを介してお互いに相互作用し、その中でもHYL1とDCL1、DRB4とDCL4の相互作用が強いこと、5)DCL1、HYL1,DRB4は核に局在し、DRB2は細胞質に局在すること等を明らかにした。これら2本鎖RNA結合タンパク質のウイルス感染防御機構(ジーンサイレンシング)に対する影響を解析するため、アグロバクテリウムを用いたCo-infiltration法によりDCL1,DCL3,HYL1,DRB2,DRB4等のジーンサイレンシングに及ぼす影響を解析したが、影響を及ぼすという結果はまだ得られていない。また、これらdsRBPおよびRdRp遺伝子破壊株を確立しその表現型を解析したが、DCL1遺伝子破壊株のような目立った形態異常は観察されなかった。現在miRNA、siRNAの蓄積量の解析を進めている。

2. This RNA is combined with RNA synthetic enzyme (dsRBP)-dependent RNA synthetic enzyme (RdRp). The infection prevention mechanism is used to understand the target gene. The N-terminal is 2. 2. This RNA is integrated with HYL1 (dsRBM). It is similar to HYL1, DRB2,DRB4 and so on. DRB5, DCL1-DCL4 (DCL1-DCL4), RNaseIII, RTL2, and the analytical biochemistry of the main biochemistry of 9 kinds of biochemistry. Results, 1) 5, (HYL1,DRB2,DRB4,DRB5) DCL1) confirmation of the binding activity of 2 copies of the RNA special edition, 2) confirmation of the RNA decomposition activity of the 2 books, 3) confirmation of the binding activity of the 2 copies of the dsRBM template (dsRBM2), 2 copies of the RNA binding activity, 4) the dsRBP binding activity of the RNA, 4) the dsRBP binding activity, the dsRBM interaction, the HYL1 binding, the DCL1, the dsRBM binding activity, the dsRBP binding activity, the dsRBP binding activity, the HYL1 binding activity, the dsRBM binding activity, the RNA binding activity, the dsRBM binding activity, the RNA binding activity, the dsRBM binding activity, the dsRBM binding activity, the RNA binding activity, the dsRBM binding activity, the RNA binding activity, the dsRBM binding activity, the dsRBM binding activity, the RNA binding activity, the dsRBM binding activity, the dsRBM binding activity, the RNA binding activity, the dsRBM binding activity, the RNA binding activity, the dsRBM binding activity, the dsRBM binding activity, DRB4 "DCL4" interaction "strong", 5) DCL1, HYL1 The DRB4 nuclear bureau is in the center, the DRB2 is in the cell office, and so on. In this paper, the RNA is used to analyze the infection prevention mechanism (the infection prevention mechanism). The Co-infiltration method is used to analyze the information, and the DCL1,DCL3,HYL1,DRB2,DRB4 method is used to analyze the results. DsRBP, dsRBP, RdRp, make sure that the tree is broken, the table is analyzed, the tree is broken, the shape is often observed. At present, miRNA and siRNA are actively analyzing and improving their performance.

项目成果

Horiuchi H., Moriyama H., Fukuhara T.: "Inheritance of Oryza sativa endornavirus in F1 and F2 hybrids between japonica and indica rice."Genes & Genetic Systems. 78. 299-234 (2003)

Horiuchi H.、Moriyama H.、Fukuhara T.：“粳稻和籼稻 F1 和 F2 杂交种中稻内核病毒的遗传。”基因

Koga R., Horiuchi H., Fukuhara T.: "Double-stranded RNA replicons associated with chloroplasts of a green alga, Bryopsis cinicola."Plant Molecular Biology. 51(6). 991-999 (2003)

Koga R.、Horiuchi H.、Fukuhara T.：“与绿藻 Bryopsis cinicola 叶绿体相关的双链 RNA 复制子。”植物分子生物学。