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茎の伸長生長制御の解析

茎伸长生长控制分析

基本信息

批准号：
15031221
负责人：
高橋陽介
金额：
$ 3.84万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15031221/
关键词：
ジベレリン転写調節因子 14-3-3 細胞内局在制御リン酸化

项目摘要

植物の主軸は茎頂-根端軸であり、その軸性を端的に現している器官が茎である。茎の細長い形態は器官を構成する個々の細胞の軸方向に偏った細胞伸長に依存している。ジベレリン(GA)は植物の伸長生長に顕著な促進作用を示す植物ホルモンである。RSGは我々がタバコからクローン化したbZIP型転写因子である。RSGの機能を阻害すると茎の伸長生長が著しく抑制される。我々はRSGの標的遺伝子の一つがGA合成系のent-カウレン酸化酵素遺伝子であることを見出した。さらに14-3-3タンパク質がRSGの細胞内局在制御を介してRSGの機能を負に調節していることを明らかにした。本研究ではGAによる茎の伸長生長制御の分子機構を明らかにすることを目的とし、転写因子RSGのGAによる機能制御について解析した。前年度までの解析から植物体のGA内生量をGA生合成阻害剤により低下させるとRSGは核に蓄積し、GAを投与すると逆にRSGは核から消失することを明らかにしてきた。14-3-3と結合しない変異型RSG(S114A)は野生型RSGと異なり.GAの刺激を受けても核に局在し続けることから、GAによるRSGの核からの消失には14-3-3との結合が必要であることが示された。RSGと14-3-3との複合体形成にはRSGのSer-114のリン酸化が必要である。これまでの解析でRSGのSer-114をリン酸化するキナーゼはCDPK(カルシウム依存性タンパク質リン酸化酵素)であることを明らかにしてきた。インフィルタレーション法によりN.benthamianaにおいてGST-RSGを一過的に発現させ、免疫沈降法とインゲルアッセイによる解析から、CDPKとRSGが植物細胞内で実際に複合体を形成していることが明らかにした。これらの結果はCDPKがRSGのSer-114のリン酸化を触媒するキナーゼであること示している。

The main stem of the plant-the root tip, the sexual end of the plant, the organ, the stem. The shape of the stem is divided into two parts. The growth of the cells is dependent on the growth of the cells. The growth and growth of GA plants plays an important role in promoting the growth of plants. RSG, write factor, write factor. The RSG machine can inhibit the growth of the stem and the growth of the plant. The first step of RSG synthesis is ent- synthesis, acidifying enzyme, acidifying enzyme, acid enzyme, enzyme. During the 14-3-3 period, the internal bureau of the RSG company is in charge of the control of the RSG machine to make sure that the information is clear. In this study, the molecular mechanism for the control of stem growth and growth in GA plants shows that the purpose and writing factors of RSG and GA growth factors are able to control the analysis of stem growth. In the previous year, we analyzed the endogenous amount of GA in plants, the inhibition of GA synthesis, the reduction of RSG, the accumulation of GA, the inverse of RSG, and the disappearance of nuclei. 14-3-3 combined with wild-type RSG (S114A) and wild-type RSG (S114A). The stimulation of GA was induced by the nuclear administration of the nuclear power bureau (GA). The results showed that the nuclei disappeared in the cells of 14-3-3 and 14-3-3 in combination with the necessary drugs. The complex of RSG 14-3-3 formed the necessary acidizing agent. This is the first step in the analysis of RSGG Ser-114 acidizing enzyme CDPK (dependence dependence enzyme). This method was used to detect the presence of N.benthamiana, immunoprecipitation, CDPK, RSG, plant intracellular DNA, and so on. The results showed that the catalyst was acidified by CDPK, RSG, Ser-114, and the catalyst was activated.