Aufklärung von Proteinfunktionen durch Transformation von Plasmodium falciparum

通过恶性疟原虫的转化阐明蛋白质功能

• 批准号: 5095812
• 负责人: Professor Dr. Klaus Lingelbach (†)
• 金额: --
• 依托单位: Fachbereich 17: Biologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Priority Programmes
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1997-12-31 至 2002-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5095812?language=en
• 关键词: Aufkl; rung; von; Proteinfunktionen; durch

Plasmodium falciparum ist ein intrazellulärer Parasit humaner Erythrozyten. Er entwickelt sich innerhalb einer parasitophoren Vakuole, deren Membran die Oberfläche des Parasiten vom Zytosol der Wirtszelle trennt. Mit Hilfe der kürzlich entwickelten Transfektionstechnologie möchten wir im wesentlichen 2 Fragestellungen beantworten. (1) Erfordert der Verbleib sezernierter Parasitenproteine in der parasitophoren Vakuole oder der Transport über die Vakuolenmembran spezifische Signale? Wir haben die sekretorische Signalsequenz eines Parasitenproteins an ein fremdes Reporterprotein, das über keine Sortierungssignale im infizierten Erythrozyten verfügen sollte, fusioniert. Wenn dieses Protein nach seiner Sekretion aus dem Parasiten innerhalb der Vakuole verbleibt, ist zu erwarten, daß der Weitertransport über die Vakuolenmembran spezifische Signale erfordert. Im ungekehrten Fall würden wir Signale postulieren, die für eine Retention des Proteins in der Vakuole notwendig sind. (ii) Ist das msp1-Gen essentiell? msp1 codiert für das Hauptoberflächenprotein der extrazellulären Entwicklungsstadien. Da die Ausschaltung eines potentiell essentiellen Gens in einem haploiden Genom problematisch ist, beabsichtigen wir, zunächst eine transgene Parasitenlinie herzustellen, die in Bezug auf das msp1-Gen 'pseudo-diploid' ist. Diese transgenen Parasiten werden dann die Grundlage für 'knock-out'-Experimente bilden.

恶性疟原虫是细胞内寄生虫红细胞。寄生虫的内层是 Vakuole，是 Zytosol der Wirtszelle trennt 上寄生虫的膜。 Mit Hilfe der kürzlich entwickelten Transfektionstechnologie möchten wir im wesentlichen 2 Fragestellungen beantworten。 (1) Erfordert der Verbleib sezernierter Parasiten Proteine in der parasitophoren Vakuole oder der Transport über die Vakuolenmembran spezifische Signale？我们知道寄生蛋白和报告蛋白的特殊信号序列，它是红细胞酶信号中最重要的信号序列，是融合的。蛋白质与寄生虫内部的蛋白质分泌有关，是一种特殊的蛋白质运输方式。我将在秋季发出信号后，将蛋白质保留在液泡中。 (ii) msp1-Gen 是否重要？ msp1 是细胞外蛋白质的主要成分。 Da die Ausschaltung eines ential essentiellen Gens in einem haploiden Genom Problematisch ist, beabsichtigen wir, zunächst eine transgene Parasitenlinie herzustellen, die in Bezug auf das msp1-Gen 'pseudo-diploid' ist.转基因寄生虫将在“淘汰”实验中进行。