発がんプロモ-ションの機構とその阻害

致癌促进与抑制机制

• 批准号: 02151077
• 负责人: 藤木 博太
• 金额: $ 12.8万
• 依托单位: National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 1991
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02151077/
• 关键词: オカダ酸; オカダ酸クラス発がんプロモ-タ-; ミクロチスチン; 蛋白質脱リン酸化酵素2A; プロスタグランジンE_2; protein kinase C; CNーTPBP

新しい発がんプロモ-タ-、オカダ酸及びオカダ酸クラスの化合物を用いて、プロモ-ションの機構を解明している。オカダ酸クラスの発がんプロモ-タ-は、いづれも、そのレセプタ-である蛋白質脱リン酸化酵素1と2Aに結合し、その活性を抑制した。今回、光親和性オカダ酸誘導体, ^3Hーmethyl7ー0ー(4ーazidobenzoyl)okadaateを用い、精製した蛋白質脱リン酸化酵素2Aと反応させた。この精製した酵素は65kと42kの調節サブユニットと37kの触媒サブユニットからできている。反応液をSDSーPAGEで調べると、 ^3Hーアダクトは触媒サブユニットにのみ認められた。この結果から、オカダ酸は触媒サブユニットに結合し、その活性を抑制することが明らかになった。オカダ酸はNーmethylーN'ーnitroーNーnitroーsoguanidineでイニシエ-トしたラット腺胃に対し、微量で発がんプロモ-ション活性を示した。ミクロチスチンはdiethylnitrosamineでイニシエ-トしたラット肝に対し、微量で発がんプロモ-ション活性を示した。従って、脱リン酸化酵素の阻害を介するオカダ酸クラスの発がんプロモ-ション機構は、いろいろな臓器に共通することが証明された。NIHー3T3細胞と活性化したcーHー<ras>___ーをトランスフェクトしたF25ー15ー5細胞について、発がんプロモ-タ-によるプロスタグランジンE_2産生を比較検討すると,F25ー15ー5細胞の方が強く亢進していた。酵母に含まれる新しいタイプのprotein kinase Cを分離した。この酵素はジアシルグリセロ-ルの代わりに、ホルボ-ルエステルを加えても、活性化が認められなかった。TPAータイププロモ-タ-に特異的に結合する蛋白質(CNーTPBP)は細胞質でheat shock蛋白質90kDと複合体を形成する70kDの蛋白質であり、TPA処理により速やかに核へ移行することが見いだされた。3種のレチノイドレセプタ-は必ずしもmRNAレベルの分布と一致せず、それぞれ固有の役割を担うことが示唆された。

New developments in the use and mechanism of compounds such as chlorophos, chlorophos and chlorophos Protein deacidification enzymes 1 and 2A bind to and inhibit the activity of protein deacidification enzymes. This time, photoaffinity, acid inducer, ^3H methyl7 - 0-(4-azidosyl)okadaate, purified protein deacidification enzyme 2A, reverse osmosis The purification enzyme is 65k and 42k, and the catalyst is 37k. SDS PAGE was used to detect the presence of the enzyme. The result is that the acid catalyst is inhibited from binding to the substrate. N-methyl-N-nitro-N-nitro-soguanidine is active in small amounts. The activity of dimethylnitrosamine is demonstrated in small quantities. The mechanism for the inhibition of enzymes in the production of enzymes and enzymes is demonstrated. NIH-3T3 cells are <ras>activated and F25 - 15 cells are activated. F25 - 15 cells are activated. Yeast contains a new protein kinase C. The enzyme is active and active. TPA is a protein that binds specifically to the cytoplasm (CN-TPBP), heat shock protein 90kD, and complex formation 70kD protein. The distribution of three kinds of mRNA is consistent, and the distribution of three kinds of mRNA is consistent.

项目成果

Nakadate,T.,Nishikawa,k.,et al.: "Hー7,a protein kinase C inhibitor,inhibits phorbol esterーcaused ornithine decarboxylase induction but fails to inhibit phorbol esterーcaused suppression of epidermal growth factor binding in primary cultured mouse epidermal

Nakadate, T.、Nishikawa, K. 等人：“H-7 是一种蛋白激酶 C 抑制剂，可抑制佛波酯引起的鸟氨酸脱羧酶诱导，但不能抑制佛波酯引起的原代培养物中表皮生长因子结合的抑制小鼠表皮

Yoshizawa,S.,Fujiki,H.,et al.: "Tumorーpromoting activity of staurosporine,a protein kinese inhibitor on mouse skin." Cancer Res.50. 4974-4978 (1990)

Yoshizawa, S., Fujiki, H., et al.：“星形孢菌素（一种小鼠​​皮肤上的蛋白激酶抑制剂）的肿瘤促进活性。”Cancer Res.50 (1990)。

Hashimoto,Y.,et al.: "Cytosolicーnuclear tumor promoterーspecific binding protein (CNーTPBP) in human promyelocystic leukemia cells HLー60." Biochem.Biophys.Res.Commun.166. 1126-1132 (1990)

Hashimoto, Y., 等人：“人早幼粒细胞白血病细胞 HL-60 中的细胞核肿瘤启动子特异性结合蛋白 (CN-TPBP)。Biochem.Biophys.Res.Commun.1126-1132 (1990)。

Hashimoto,Y.,et al.: "The retionic acid receptors α and β are expressed in the human promyelocytic leukemia cell line HLー60." Molecular Endocrinology. 3. 1046-1052 (1989)

Hashimoto, Y., et al.：“维甲酸受体 α 和 β 在人类早幼粒细胞白血病细胞系 HL-60 中表达。” 分子内分泌学 3. 1046-1052 (1989)。

Fujiki,H.,et al.: "New Tumor promoters from marine sources:The okadaic acid class.in “Mycotoxins and Phycotoxins '88"" Elsevier,Holland, 8 (1989)

Fujiki, H., et al.：“海洋来源的新肿瘤促进剂：冈田酸类。见“霉菌毒素和藻毒素 88””Elsevier，荷兰，8 (1989)