発がんプロモ-ションの機構とその阻害

点击翻译按钮获取中文摘要

新しい発がんプロモ-タ-、オカダ酸及びオカダ酸クラスの化合物を用いて、プロモ-ションの機構を解明している。オカダ酸クラスの発がんプロモ-タ-は、いづれも、そのレセプタ-である蛋白質脱リン酸化酵素1と2Aに結合し、その活性を抑制した。今回、光親和性オカダ酸誘導体, ^3Hーmethyl7ー0ー(4ーazidobenzoyl)okadaateを用い、精製した蛋白質脱リン酸化酵素2Aと反応させた。この精製した酵素は65kと42kの調節サブユニットと37kの触媒サブユニットからできている。反応液をSDSーPAGEで調べると、 ^3Hーアダクトは触媒サブユニットにのみ認められた。この結果から、オカダ酸は触媒サブユニットに結合し、その活性を抑制することが明らかになった。オカダ酸はNーmethylーN'ーnitroーNーnitroーsoguanidineでイニシエ-トしたラット腺胃に対し、微量で発がんプロモ-ション活性を示した。ミクロチスチンはdiethylnitrosamineでイニシエ-トしたラット肝に対し、微量で発がんプロモ-ション活性を示した。従って、脱リン酸化酵素の阻害を介するオカダ酸クラスの発がんプロモ-ション機構は、いろいろな臓器に共通することが証明された。NIHー3T3細胞と活性化したcーHー<ras>___ーをトランスフェクトしたF25ー15ー5細胞について、発がんプロモ-タ-によるプロスタグランジンE_2産生を比較検討すると,F25ー15ー5細胞の方が強く亢進していた。酵母に含まれる新しいタイプのprotein kinase Cを分離した。この酵素はジアシルグリセロ-ルの代わりに、ホルボ-ルエステルを加えても、活性化が認められなかった。TPAータイププロモ-タ-に特異的に結合する蛋白質(CNーTPBP)は細胞質でheat shock蛋白質90kDと複合体を形成する70kDの蛋白質であり、TPA処理により速やかに核へ移行することが見いだされた。3種のレチノイドレセプタ-は必ずしもmRNAレベルの分布と一致せず、それぞれ固有の役割を担うことが示唆された。