新しい発癌プロモーター及び抑制物質の探索とその特性に関する研究

寻找新的致癌启动子和抑制子并研究其性质

• 批准号: 63010086
• 负责人: 藤木 博太
• 金额: $ 9.98万
• 依托单位: National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1987
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1987 至 1988
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63010086/
• 关键词: okadaic acid; dinophysistoxin-1(35-methylokadaic acid); C-H-ras; (-)indolactam-V; LM-5、LM-6; protein kinase C

(1) non-TPAタイププロモーターであるokadaic acidの誘導体、dinophysistoxin-1 (35-methylokadaic acid) はokadaic acidと同様に種々の生物活性を誘導した。今回、dinophysistoxin-1の発癌二段階実験を行い,okadaic acidと同等に強力な発癌プロモーション活性を証明した。DMBA+okadaic acidで生じた腫瘍からDNAを分離し、PCRの方法を用い、C-H-rasの構造を検討した。興味あることに、C-H-ras遺伝子のコドン61の2番目のヌクレオチドがA→Tと突然変異を起こしていた。この突然変異はDMBA+TPAタイププロモーターによって生じた腫瘍に於いても認められた。この結果から、発癌プロモーターはC-H-ras遺伝子の突然変異をもつ細胞(所謂initiated cells)を特異的に増殖させることが示された。okadaic acid及びdinophysistoxin-1はprotein phosphataseの強力な抑制を示す。その結果、リン酸化された蛋白質の量は総量として増加することが見い出された。この外見状のprotein kinaseの活性化がokadaic acidクラスによる発癌プロモーションの最初のシグナルであると考えられる。(2) Telecidinの中間産物である(-)-indolactam-VのN原子を置換し、B-デアザ-Bオキサイドラクタム-Vを合成した。活性は(-)-indolactam-Vより弱いことが認められた。LyngbyatoxinAを含むハワイの海藻から、(-)-indolactam-Vは見い出されなかったが、LM-5、LM-6と呼ぶ、lyngbyatoxin Aの新規な誘導体が発見され、その構造も決定された。これらは弱い発癌プロモーション活性があると考えられる。(3) ラット脳ライブラリーにおけるprotein kinase CのcDNAクローニングの詳細な解析を行った。従来得られたクローンとは異なる、新たな3種のクローンδ、ε、ζが見い出された。これらの新しいprotein kinaseは発癌プロモーターによって活性化されるか検討する必要性がある。

(1)The inducer of okadaic acid, dinophysitoxin-1 (35-methylokadaic acid) and the biological activity of okadaic acid are induced by non-TPA. In this study, dinophysitoxin-1 was demonstrated to be an equally potent cancer promoter in the second stage of cancer development. DMBA+okadaic acid was used to isolate DNA, PCR and C-H-ras. The C-H-ras gene has two different types of genes: A→T and A→T. This sudden change in the DMBA+TPA profile is a major factor in the success of the project. As a result, cancer development and mutation of C-H-ras genes are detected in cells (so-called initiated cells). okadaic acid and dinophysitoxin-1 strongly inhibit protein phosphatase As a result, the amount of protein in the protein was increased. The activation of protein kinase in the outer surface of the cell is called okadaic acid. (2)The intermediate of Telecidin was synthesized by substitution of N atom of (-)-indolactam-V, and synthesis of B-indolactam-V. Active (-)-indolactam-V Lyngbyatoxin A is a new inducer of (-)-indolactam-V, LM-5, LM-6 and lyngbyatoxin A. The first is to test the activity of the enzyme. (3)Detailed analysis of cDNA for protein kinase C The three kinds of new products, such as δ, ε and ε, are available in the market. This new protein kinase is essential for the development of cancer.