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新規in vivo可視化技術を用いた真核細胞における遺伝情報発現機構の解析

利用新型体内可视化技术分析真核细胞遗传信息表达机制

基本信息

批准号：
13GS0013
负责人：
古久保哲朗
金额：
$ 217.73万
依托单位：
Yokohama City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Creative Scientific Research
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

すべての生命現象は必要な遺伝情報がプログラム通りに正しく発現することにより支えられている。遺伝子発現プログラムにおいて最も重要な制御段階は「転写」であり、その制御反応に関与する蛋白質の多くはすでに同定されたと考えられるが、それらの生体内における作用機構の詳細は依然として明らかではない。本研究の目的は、生物個体における遺伝子発現を非破壊的に計測する新規手法の開発を行い、その手法を用いて真核細胞の転写制御を支える分子的基盤及びその作動原理を明らかにすることである。無機リン酸のポリマーであるポリリン酸は、全ての生物に普遍的に存在し、^<31>P-NMRによる定量的なマイクロイメージングが可能であることから、遺伝子発現量をモニターする上で非常に有効なプローブになりうるものと考えられる。これまで我々は、出芽酵母、動物培養細胞、動物・植物個体を宿主とし、ポリリン酸合成酵素(または合成・蓄積に関与するタンパク質)を新規レポーター遺伝子として用いてプロモーター活性を効率よくモニタリングできる手法の開発を進めてきた。今年度は、^<31>P-MRI測定系の検出限界を打破するべく、T_1緩和時間の変化を^1H-MRIにより画像化する新規モニタリング手法の開発を行った。別途開発を進めてきた自動コロニースポッターと組み合わせることにより、少なくとも出芽酵母においては、極めて短時間に上流活性化配列(UAS)、及びコアプロモーター配列の決定を行うことが可能となった。

The essential information of life phenomena is transmitted from the source to the source. The most important regulatory step is to "write" and "control" proteins. The purpose of this study is to develop new methods for the detection of gene expression and non-destructive detection in individual organisms, and to clarify the molecular basis and mechanism of action of eukaryotic gene expression and control by using these methods. Inorganic acids are ubiquitous in all organisms and can be quantified by <31>P-NMR. The host, budding yeast, animal culture cells, animal and plant individuals are responsible for the development of new enzymes for acid synthesis (synthesis, accumulation and quality). This year, the detection limit of <31>P-MRI measurement system was broken, and the T_1 relaxation time was changed. The new imaging method was developed. In addition, it is possible to determine whether the yeast is active in a short period of time and whether the yeast is active in a short period of time

项目成果

期刊论文数量（22）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

N.Goda, T.Tenno, H.Takasu, H.Hiroaki, M.Shirakawa: "The PRESAT-vector. Asymmetric T-vector for high throughput screening of soluble protein domains for structural proteomics"Protein Science. 13・3. 652-658 (2004)

N.Goda、T.Tenno、H.Takasu、H.Hiroaki、M.Shirakawa：“PRESAT 载体。用于结构蛋白质组学的可溶性蛋白质结构域高通量筛选的不对称 T 载体”蛋白质科学 13・3。 -658 (2004)

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Z.Kato, J.-G.Jee, H.Shikano, M.Mishima, I.Ohki, H.Ohnishi, A.Li, K.Hashimoto, E.Matsukuma, K.Omoya, Y.Yamamoto, T.Yoneda, T.Hara, N.Kondo, M.Shirakawa: "The structure and binding mode of interleukin-18"Nature Structural Biology. 10・11. 966-971 (2003)

Z.Kato、J.-G.Jee、H.Shikano、M.Mishima、I.Ohki、H.Ohnishi、A.Li、K.Hashimoto、E.Matsukuma、K.Omoya、Y.Yamamoto、T.Yoneda ，T.Hara，N.Kondo，M.Shirakawa：“白细胞介素18的结构和结合模式”自然结构生物学10・11（2003）。