Molekularbiologische Charakterisierung des Flavoenzyms EpiD und biochemische Analyse der Peptidyl-Aminoenthiolat-Reaktionsprodukte

黄素酶 EpiD 的分子生物学表征和肽基氨基硫醇反应产物的生化分析

基本信息

批准号：
5137854
负责人：
Privatdozent Dr. Thomas Kupke
金额：
--
依托单位：
Zentrum für Molekulare Biologie (ZMBH)
依托单位国家：
德国
项目类别：
Research Grants
财政年份：
1998
资助国家：
德国
起止时间：
1997-12-31 至 2001-12-31
项目状态：
已结题

来源：
https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5137854?language=en
关键词：
Molekularbiologische Charakterisierung des Flavoenzyms EpiD

项目摘要

Der Schwerpunkt des beantragten Projektes ist die weitere molekularbiologische und biochemische Charakterisierung des FMNhaltigen Flavoenzyms EpiD. EpiD ist an der Biosynthese des Lantibiotikums Epidermin beteiligt. Unter Lantibiotika versteht man Peptide, die die Thioetheraminosäure Lanthionin enthalten, und antimikrobielle Aktivität besitzen. Lantibiotika werden als Vorläuferpeptide ribosomal synthetisiert und anschließend posttranslationell modifiziert. EpiD katalysiert die oxidative Decarboxylierung des C-terminalen Cysteinrestes des EpiderminVorläuferpeptids EpiA. EpiD gehört zu einer neuen Familie von Flavoproteinen, für die die Bezeichnung HEPG-Proteine eingeführt wird. Im bisherigen Verlauf des Forschungsprojektes wurden durch Ortsspezifische Mutagenese Aminosäurereste von EpiD identifiziert, die entweder wichtig für die Coenzymbindung (C8, S37, H67, P81, S83, N85, K89, G93, D96, P114) oder für die enzymatische Aktivität (H67, N115 und M120) sind. Ferner wurde das homologe Enzym der Mersacidinbiosynthese, MrsD, exprimiert, als Fusionsprotein gereinigt und als FAD-haltiges Flavoenzym identifiziert. In der Arbeitsgruppe von Dr. S. Steinbacher/Prof. Dr. R. Huber gelang die Kristallstrukturanalyse von EpiD. Außerdem gibt es erste Ergebnisse zur Kristallstruktur von MrsD. EpiD und MrsD liegen als Homododekamere vor (Tetramere von Trimeren). Die für die Strukturanalyse benötigten Überexpressionsklone wurden in Tübingen konstruiert.

der Schwerpunkt des beantragten projektes iSt die weitere molekularbiologische和biiochemische charakterisierung des fmnhaltigen flavoenzyms epid。 epid ist de des lantibiotikums表皮贝特利格特（Beteiligt）。 Unter Lantibiotika Versteht人肽，Diethioetheraminosäurelanthionin焓，und antimikrobielleaktivitätbesitzen。 Lantibiotika Werden alsvorläuuferpeptide核糖体该Epid旨在提供最具创新性和最具创造性的方法来创建一种新的，高技能，高技能的环境。 Epid旨在提供最具创新性和创造性的方式来创建一个新的，高技能，高技能的环境。 Epid旨在提供最具创新性和创造性的方式来创建一个新的，高技能，高技能的环境。对于共酶（C8，S37，H67，P81，S83，N85，K89，G93，D96，P114）的目的也是如此。 Ferner的死亡率对于共同酶，MRSD，Exprimiert和Fad-Haltiges avealenzyme鉴定是相同的。就Arbeitsgruppe von S. Steinbacher博士/教授而言。 R. Huber Gelang博士Kristallstrukturanalyse von Epid。 Epid und MRSD Liegen（Tetramere von Trimeren）。 diefürdie strukturanalysebenötigtenüber表达sklone wurden intübingenkonstruuiert。