Molekularbiologische Charakterisierung des Flavoenzyms EpiD und biochemische Analyse der Peptidyl-Aminoenthiolat-Reaktionsprodukte

Der Schwerpenkt des Beantangten Projektes is die weitere Molekularbioshe and BioChemische Charakterisierung des FMNhaltigen Flavozyms EpiD.Epid是一种生物合成细菌Epidermin Beteigt.在抗菌肽的作用下，硫代乙胺基硫代氨基酚的生成和抗硫杂多酸的生成。抗菌药物是ALS Vorläufer多肽的核糖体合成和翻译后修饰。EpiD Katalysiert De氧化脱羧基-C-末端半胱氨酸EpiderminVorläufertids EPIA。这是一种新的家庭和黄蛋白，也是一种新型蛋白质。我是Bisherigen Verlaf des Forschungsprojektes Wurden durch OrtsSpezifische Mutagenese Aminosäurerust von EpiD IDEFIZIert，在für die enzymatische Aktiität(H67，N115 and M120)sind(H67，N115 and M120)sind下，我是Bisherigen Verlaf des Forschungsprojektes Wurden duch OrtsSpezifische Mutagenese Aminosäerust von EpiD IDFIZIert，Di Bisherigen Verlaf des Forschungsprojektes Wurden Durden duch OrtsSpezifische Mutagenese Aminosäurerust von EpiD IDFIZIert，Won Bisherigen Verlaf des ForschungsProjektes Wurden Wurden dr OrtsSpezifische Mutagenese Aminosäurerust von EpiD Idizi肌萎缩侧索硬化症的生物合成同源酶，mrsD，expriert，ALS融合蛋白基因和ALS Fad-haltives黄酶鉴定。在Der Arbeitsgruppe von Dr.S.Steinbacher/Dr.R.Huber Gelang die Kristallstrukturanalys von EpiD.Au？Erdem gibt es Erste Ergebnisse zur Kristallstrukture von先生D.Epid and Mr D liegen ALS Homoddekamere vor(Tetramere Von Trimeren)。在Tübingen Konstruciert，我们将分析Benötigtenüber的表达方式。

Der Schwerpunkt des beantragten Projektes ist die weitere molekularbiologische und biochemische Charakterisierung des FMNhaltigen Flavoenzyms EpiD. EpiD ist an der Biosynthese des Lantibiotikums Epidermin beteiligt. Unter Lantibiotika versteht man Peptide, die die Thioetheraminosäure Lanthionin enthalten, und antimikrobielle Aktivität besitzen. Lantibiotika werden als Vorläuferpeptide ribosomal synthetisiert und anschließend posttranslationell modifiziert. EpiD katalysiert die oxidative Decarboxylierung des C-terminalen Cysteinrestes des EpiderminVorläuferpeptids EpiA. EpiD gehört zu einer neuen Familie von Flavoproteinen, für die die Bezeichnung HEPG-Proteine eingeführt wird. Im bisherigen Verlauf des Forschungsprojektes wurden durch Ortsspezifische Mutagenese Aminosäurereste von EpiD identifiziert, die entweder wichtig für die Coenzymbindung (C8, S37, H67, P81, S83, N85, K89, G93, D96, P114) oder für die enzymatische Aktivität (H67, N115 und M120) sind. Ferner wurde das homologe Enzym der Mersacidinbiosynthese, MrsD, exprimiert, als Fusionsprotein gereinigt und als FAD-haltiges Flavoenzym identifiziert. In der Arbeitsgruppe von Dr. S. Steinbacher/Prof. Dr. R. Huber gelang die Kristallstrukturanalyse von EpiD. Außerdem gibt es erste Ergebnisse zur Kristallstruktur von MrsD. EpiD und MrsD liegen als Homododekamere vor (Tetramere von Trimeren). Die für die Strukturanalyse benötigten Überexpressionsklone wurden in Tübingen konstruiert.