自然免疫シグナル伝達因子STINGに着目したエンドソームの選別輸送メカニズム解明

以先天免疫信号转导因子STING为中心阐明内涵体的选择性转运机制

• 批准号: 22KJ1908
• 负责人: 飯伏 純平
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ1908/
• 关键词: 自然免疫; A群レンサ球菌; STING; リソソーム分解経路

本年度では、A群レンサ球菌感染によるSTINGの局在変化について、DNAセンサータンパク質であるcGAS（cyclic GMP-AMP synthase）欠損細胞を用いて検証した。その結果、cGAS欠損細胞は野生型細胞と同様にA群レンサ球菌感染によりSTINGの局在変化が認められた。A群レンサ球菌が産生するサイクリックジヌクレオチドによりSTINGは反応して局在を変化する可能性が示唆された。またSTING欠損細胞における細菌の分解経路について、オートファジーは誘導せずに主にエンドソーム/リソソーム経路で分解されるStreptolysin O（SLO）欠損株を用いて細胞内の菌数を評価した。その結果、STING欠損細胞では野生型細胞と比較して細胞内の菌数が優位に減少していた。さらにエンドソーム/リソソーム経路で分解されるEGFRの分解ついて検証した結果、野生型よりもSTING欠損細胞で分解が促進していた。以上よりSTING欠損細胞においてエンドソーム/リソソーム分解経路が亢進していることが示唆された。次にエンドソーム/リソソーム分解経路で分解物の選別に関わるESCRTタンパク質に着目し、共免疫沈降法を用いて相互作用を検証した。その結果、複数のESCRTタンパク質とSTINGが相互作用することがわかった。

在今年，使用缺乏DNA传感器蛋白CGA（环状GMP-AMP合成酶）的细胞验证了由A组链球菌感染引起的刺激变化的定位变化。结果，类似于野生型细胞，由于A组缺乏CGA的细胞中A组链球菌感染，观察到了刺的定位。有人提出，A组产生的链球菌可能对刺痛和改变其定位反应。此外，关于细菌在刺激细胞中细菌的降解途径，使用链霉素O（SLO）降解菌株评估细胞中细菌的数量，这些菌株主要由内体/溶酶体途径降解而不诱导自噬。结果，与野生型细胞相比，细胞中细胞中细菌的数量主要减少。此外，我们研究了EGFR的降解，EGFR被内体/溶酶体途径降解，发现与野生型细胞相比，在缺陷细胞中降解在缺陷细胞中更加加速。以上表明内体/溶酶体降解途径在缺陷细胞中增强了。接下来，我们专注于通过内体/溶酶体降解途径参与选择降解产物的ESCRT蛋白，并使用共免疫沉淀验证了相互作用。结果，发现多种ESCRT蛋白与STING相互作用。

项目成果

オートファジー関連因子ATG9は細菌の細胞内侵入を制御する

自噬相关因子 ATG9 控制细菌侵入细胞

• 发表时间: 2022
• 作者: 飯伏純平;野澤孝志;中川一路
• 通讯作者: 中川一路

自然免疫シグナル伝達因子STINGが制御するリソソーム分解経路の解析

先天免疫信号因子STING调控的溶酶体降解途径分析

• 发表时间: 2023
• 作者: 飯伏純平;野澤孝志;中川一路
• 通讯作者: 中川一路