加水分解酵素のプロセシングに関する研究

水解酶加工研究

• 批准号: 60214001
• 负责人: 牧田 章
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Special Project Research
• 财政年份: 1985
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1985 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-60214001/
• 关键词: プロセシング; リソゾーム酵素; アリルスルファターゼ; β-グルクロニダーゼ; リン酸化; 糖鎖

リソゾームの加水分解酵素はそれ自体が糖蛋白質であるが、酵素の成熟過程で蛋白部分と糖鎖部分は全く異る機序によるプロセシングを受ける。我々はアリルスルファターゼBの研究において次の事を見出した。人癌では塩基性のB酵素(PI〜9)の他に酸性亜型【B_1】(PI〜7.5)が検出された。【B_1】は癌のみならず正常の人白血球でも認められ、癌特有とは云えない。【B_1】とBはPI以外の酵素学的諸性質及び抗原性に差違は認められなかった。従って【B_1】はB酵素が酸性基で修飾された亜型とみなし、次の実験によってそれを証明した。【B_1】をホスファターゼ処理するとPIが少し上昇するが、エンド-β-N-アセチルグルコサミニダーゼ処理で糖鎖を解離するとほぼB酵素と同じPIのスルファターゼに変換した。リソゾーム酵素の高マンノース型糖鎖は非還元末端がリン酸化型(成熟型)のプロセシングを受けることが知られており、上記の我々の知見は癌細胞や白血球では酵素糖鎖のプロセシング中間体が増加することを示している。その原因については今後の研究にまたなければならない。【B_1】酵素のリン酸化を直接証明するため酵素の【^(32)P】リン酸化実験を行った。【^(32)P】-リン酸を人癌を移植したヌードマウスに投与し、in vivo標識した【B_1】酵素を得て糖鎖と蛋白画分に分けた。糖鎖画分からマンノース-6-リン酸が検出され、上記の糖鎖リン酸化が実証された。他方、標識酵素の蛋白画分からも、リン酸化アミノ酸が同定されそれらは、リン酸化セリンとスレオニンであった。リソゾーム酵素の蛋白リン酸化は全く知られておらず新知見である。正常人肝の本酵素も程度は低いがリン酸化蛋白である事がわかり、癌化によってリン酸化が亢進すると見られる。糖鎖と蛋白のリン酸化はスルファターゼのみならず、β-グルクロニダーゼでも証明され、リソゾーム酵素の多くに共通した新しい修飾現象とみられ、他の酵素についても検索を進めている。

リ ソ ゾ ー ム の hydrolysis enzyme は そ れ autologous が sugar protein で あ る が で の mature process, enzyme protein parts と sugar lock は く all different る machine sequences に よ る プ ロ セ シ ン グ を by け る. I 々 は ア リ ル ス ル フ ァ タ ー ゼ B の research に お い て time something の を shows し た. Human cancer で で basic <s:1> B enzyme (PI ~ 9) <s:1> it に acidic 亜 type [B_1] (PI ~ 7.5)が検 out された. 【B_1】 cancer <s:1> normal <s:1> human white blood cells で are likely to recognize められ, cancer-specific と と cloud えな えな えな. 【B_1】 The properties of <s:1> enzymes other than とB PI and the び antigenicity に differences are recognized that められな った った. Youdaoplaceholder0 [B_1] が B enzyme が acidic group で modified された亜 type とみな によってそれを, secondary <s:1> experimental によってそれを proved that た た. を B_1 】 【 ホ ス フ ァ タ ー ゼ 処 Richard す る と PI が し rise less す る が, エ ン ド - beta - N - ア セ チ ル グ ル コ サ ミ ニ ダ ー ゼ 処 Richard で す lock を dissociation sugar る と ほ ぼ と B enzyme with じ PI の ス ル フ ァ タ ー ゼ に variations in し た. リ ソ ゾ ー ム high enzyme の マ ン ノ ー ス type sugar lock は the end of the yuan also が リ ン acidification model (mature) の プ ロ セ シ ン グ を by け る こ と が know ら れ て お り, written の I 々 の knowledge は cancer や leukocyte で は ferment sugar lock の プ ロ セ シ ン グ intermediates が raised plus す る こ と を shown し て い る. Youdaoplaceholder0 そ the reason is に に て て にまたなければならな future research on にまたなければならな にまたなければならな. 【B_1】 Enzyme リ <s:1> acidification を directly proves するため enzyme するため 【^(32)P】リ <s:1> acidification experiment を work った. 【 ^ (32) P 】 - リ ン acid を carcinoma を transplants し た ヌ ー ド マ ウ ス に cast and し, in vivo identification し た enzyme B_1 】 【 を て lock と protein sugar painting points に points け た. Sugar painting points lock か ら マ ン ノ ー ス - 6 - リ ン acid が 検 out さ れ, written の sugar lock リ ン acidification が card be さ れ た. Fang, identifying protein enzyme の draw points か ら も, リ ン acidification ア ミ が ノ acid with fixed さ れ そ れ ら は, リ ン acidification セ リ ン と ス レ オ ニ ン で あ っ た. Youdaoplaceholder0 リソゾ ム enzyme <s:1> protein リ <s:1> acidification <e:1> complete く knowledge られておらず new knowledge found である. Low degree of normal liver の this enzyme も は い が リ ン acidic protein で あ る matter が わ か り, canceration に よ っ て リ ン acidification が hyperthyroidism す る と see ら れ る. Sugar protein lock と の リ ン acidification は ス ル フ ァ タ ー ゼ の み な ら ず, beta グ ル ク ロ ニ ダ ー ゼ で も prove さ れ, リ ソ ゾ ー ム enzyme の く more common に し た new し い modified phenomenon と み ら れ, he の enzymes に つ い て も 検 cable を into め て い る.

项目成果

Biochem.Biophys.Res.Commun.126-2. (1985)

Biochem.Biophys.Res.Commun.126-2。

J.Biochem.98-3. (1985)

J.Biochem.98-3。

Tohoku.J.Exp.Med.145-3. (1985)

Tohoku.J.Exp.Med.145-3。