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単層培養甲状腺細胞によるチログロブリンおよびチロキシン分泌のカルシウムによる調節

钙介导的单层培养甲状腺细胞甲状腺球蛋白和甲状腺素分泌的调节

基本信息

批准号：
60223007
负责人：
近藤洋一
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Special Project Research
财政年份：
1985
资助国家：
日本
起止时间：
1985 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

甲状腺のホルモン合成分泌機構には二様のカルシウムイオンの効果が知られていた。一つはチログロブリンのヨウ素によるホルモン合成反応が細胞外液のカルシウムイオンの存在下甲状腺刺激ホルモン(TSH)により促進されること、一つはヨウ素化チログロブリンの水解で生ずるチロキシンなど甲状腺ホルモンの分泌が細胞外液のカルシウムイオンによって抑制されることである。本研究では、これらの現象の関係を明らかにし、甲状腺細胞のホルモン生成調節機構におけるカルシウムイオンの役割をあきらかにする目的で、培養甲状腺細胞内外のカルシウムの動態をしらべた。1.単離したブタ甲状腺細胞にカルシウムイオンにより蛍光を発するキレート剤を導入し、相対蛍光強度から細胞内カルシウムイオン濃度を測定した。TSHを培養液に加え培養すると1日後よりカルシウムイオン濃度が高まり、コントロールの約2.5倍100nMで安定する。この間に細胞は袋状構造(瀘胞)を再構成する。2.上記培養細胞は洗浄後高濃度TSH(【10^(-6)】M)やアセチルコリンにより、カルシウムイオン濃度が低下する。同時にホルモン合成活性も低下する。後者はTSHの反対効果としてしられているが、カルシウムイオン濃度低下との関係はあきらかでない。3.極性ある甲状腺の両極で行われるホルモンの合成と分泌機構に対する細胞外カルシウムイオンの影響を分離検討するため、培養器中間をミリポアフィルターでしきり、一面にコラーゲンを塗布した上に細胞を単層培養した。コラーゲン側細胞外液にカルシウムイオン存在下TSHを加えるとホルモン合成が高まる。反対側外液におけるTSHとカルシウムイオンの変動はホルモン合成に影響しない、カルシウム依存性TSH受容機構の局在性をうかがわせた。この条件での細胞内カルシウムイオンの変動は現時点で結論が得られていない。

Thyroid synthesis and secretion mechanisms are two different types of hormones. The synthesis of anti-thyroid hormone in extracellular fluid in the presence of thyroid stimulating hormone (TSH) is promoted and the hydrolysis of anti-thyroid hormone in extracellular fluid in the presence of TSH is inhibited. The purpose of this study is to clarify the relationship between these phenomena and the regulation mechanism of thyroid cell production. The purpose of this study is to investigate the dynamics of thyroid cell production in and out of cultured thyroid cells. 1. Thyroid cells are isolated from the human body, and their concentrations are determined by light intensity. TSH was added to the culture medium and the concentration of TSH increased to about 2.5 times 100nM after incubation. The cells in between are re-formed into pocket structures. 2. Note that the cultured cells were washed with high concentrations of TSH([10^(-6)] M) and low concentrations of TSH ([10^(-6)] M). At the same time, the synthesis activity of the enzyme was low. The latter is the opposite of TSH. 3. To isolate and investigate the effects of extracellular cytokines on the synthesis and secretion mechanisms of polar thyroid glands, cells were cultured in a single layer with a thin layer of calcium in the middle of the incubator and gelatin coated on one side. In the presence of TSH, the synthesis of TSH in the extracellular fluid is high. The opposite side of the external fluid is affected by the change of the TSH receptor and the change of the TSH receptor. The conditions for this change in the intracellular structure of the cell are discussed below.