チログロブリン分子内における甲状腺ホルモン合成反応とその制御

甲状腺激素合成反应及其在甲状腺球蛋白分子内的调控

基本信息

批准号：
62580146
负责人：
近藤洋一
金额：
$ 0.83万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では甲状腺の特異的タンパク質チログロブリン(Tg)分子のホルモン合成に関連する構造的特性を調べ, 効率の高いホルモン合成機構を明らかにしようとした. Tgは330Kサブユニット2つからなる球状タンパク質である. チロシン残基のヨウ素化, 2個のヨウ素化チロシンのカップリングによりドナーヨードチロシン残基からヨードフェニル基がアクセプターヨードチロシン残基に移り, ホルモン残基となる. アクセプター残基はサブユニットあたり数個しかなく, 数種の動物につき, 一次構造上の位置が特定されている. 我々はドナー残基がデヒドロアラニン(△Ala)残基としてペプチド中に保持されることを4アミノフェノールによる△Alaの特異的反応により証明したが, 本研究では同じ反応を利用してウシTgの△Ala残基をラベルした後, リジルエンドペプチターゼによる部分水解物から, 固定化反応試薬によって△Ala残基を含むペプチドのみを回収し精製した後, エドマン分解によりアミノ酸配列を調べた. その結果, 1)精製したペプチドの中3個はN末端から900-1500番に含まれる3ケ所のアミノ酸配列に, 2)1個はN端から始まるアミノ酸配列に相当した. 3)アミノ酸配列, あるいは組成の分析により, N端から5番のチロシンを含む4個のドナーチロシン残基が推定された. 3)2次構造予測および親水性分析の結果, ドナー残基もアクセプター残基同様, 分子表面付近に存在すると推定され, ホルモンが分子表面の特定の位置にあると言う電顕観察と符合した. 一方, 放射性ヨウ素でラベルしたマウスTg部分水解ペプチドのSDS-PAGE分析, およびヨードアミノ酸分析, さらに, 培養ブタ甲状腺細胞を用いた実験で, これらアクセプター, ドナー残基が特にヨウ素化されやすいことが示され, ホルモン生成に必要な高次構造の存在, およびそれを維持する1次構造の特異性が推測された.

在这项研究中，我们研究了与甲状腺特异性蛋白甲状腺球蛋白（TG）分子的激素合成相关的结构特性，并试图揭示高效的激素合成机制。 TG是由两个330K亚基组成的球状蛋白。酪氨酸残基的碘化和两种碘化酪氨酸的耦合导致碘苯基从供体碘酪氨酸残基到受体碘酪氨酸残基，这成为激素残基。每个亚基只有少数受体残基，已经确定了几只动物的主要结构位置。 We demonstrated that the donor residue is retained in the peptide as a dehydroalanine (△Ala) residue by 4 aminophenol, but in this study, after labeling the △Ala residue in bovine Tg, From partial hydrolysates using lysyl endopeptidase, only peptides containing △Ala residues were recovered and purified by immobilization reaction reagent, and then the amino acid sequence was由Edman分解检查。结果，1）3个纯化的肽对应于N末端的900-1500时包含的三个氨基酸序列，2）1氨基酸序列从N末端开始。 3）通过分析氨基酸序列和组成来估计来自N末端的四个供体酪氨酸残基。 3）二级结构预测和亲水性分析表明，据估计，供体残基在分子表面附近，就像受体残基一样，并且与电子显微镜观察结果一致，即激素位于分子表面的特定位置。另一方面，对放射性碘标记的小鼠TG部分水解肽和碘氨基酸分析的SDS-PAGE分析，此外，使用培养的猪甲状腺细胞进行实验表明，这些受体和供体残留物特别易于碘化，对碘的结构尤其敏感，并且具有较高的阶层的生产，并且具有较高的生产力。