X染色体連座免疫不全症に関与する遺伝子の同定と治療への応用

X连锁免疫缺陷相关基因的鉴定及其在治疗中的应用

• 批准号: 60227009
• 负责人: 黒澤 良和
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Fujita Health University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Special Project Research
• 财政年份: 1985
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1985 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-60227009/
• 关键词: Bruton病; SCID; 免疫グロブリンD遺伝子; RFLP解析; cDNAライブラリー

Bruton型患者の骨髄細胞より、EBウイルスを用いて5株cell line化するのに成功した。細胞膜表面マーカーの検索から、それらはすべて典型的preB細胞の性質を有していたのでJh領域の遺伝子配列を調べた。その結果ヒトの新しいD遺伝子の同定に成功し、またその細胞中では再編成かDJh結合でとどまっていることを見い出した。SCID患者でも同様にして株化するのに成功し、その場合はpreB細胞であるがJh領域にDNA再編成は見られなかった。SCID患者ではT細胞レセプター及び免疫グログリン遺伝子のDNA再編成過程に関与する共通の遺伝子の欠陥であること、一方Bruton病は【V_h】D配列過程の異常であるという仮説が導かれた。新しいヒトD遺伝子の発見と共にD遺伝子の5′側上流の塩基配列を調べたところ、特徴的な16ヌクレオチドが20数回繰り返されている構造を見い出した。これがDNA再配列を引き起すDNA結合タンパクの認識部位ではないかという仮説を提出した。Bruton病,SCID,Wiskott-Aldrich症候群の欠陥遺伝子のX染色体上の位置をRFLP解析によって決定するために、X染色体各部由来のプローブを9種類作製した。これを用いてX染色体を8ヶ所に分けて同定することが可能になった。現在上記る種類の疾患について、家族のDNAを用いてRFLP解析を行っている。少くともBruton患者で、その欠陥遺伝子はセントロメア近傍には位置しないことがわかっている。proB細胞に発現され、T細胞では発現されていない遺伝子からなるcDNAライブラリーを作製した。約300個のcDNAクローンのDNAを調製し、その中でX染色体上にコードされているものをさがしている。HTLV-1や癌遺伝子を用いた幹細胞及びT細胞のcell line化も試みている。

Bruton type patients' bone marrow cells and EB cells were successfully line-lined with 5 strains of cells. The surface of the cell membrane is a マーカーの検SO から、それらはすべてTypical properties of preB cells を有していたのでJh field の伝子配arrayを Adjustmentべた.そのRESULTS ヒトの新しいD 伝子の同定に成し, またその中では reorganized into かDJh combined でとどまっていることを见い出した. SCID patients have successfully reprogrammed the DNA of the preB cells in the Jh domain and reprogrammed it into the DNA of the SCID patients. The DNA reprogramming process of SCID patients' T cells and immune cells is a common process. The child's condition is abnormal, the Bruton's disease is abnormal, and the D alignment process is abnormal.新しいヒトD 伝子の発见と公にD 伝子の5′lateral upper flowの塩综合arrayを动べたところ、Special な16ヌクレオチドが20 times 粲り回されているstructuralを见い出した.これがDNA rearrangement をinduced きすDNA combination タンパクのcognitive part ではないかという仮说をproposed した. Bruton's disease, SCID, Wiskott-Aldrich syndrome, RFLP analysis of the position on the X chromosome, determination of the position on the X chromosome, and the origin of each part of the X chromosome, 9 types of production are available. The これを is divided into けて and することが based on the いてX chromosome を8ヶ. Now let’s take a look at the types of diseases and family DNA analyzed by RFLP. The Bruton patients are less and less likely to be affected by the disease. ProB cells are produced and T cells are produced. About 300 のcDNAクローンのDNAをmodulationし, その中で on the X chromosome にコードされているものをさがしている. HTLV-1 cancer cells are being tested using stem cells and T cells.