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安定同位体ラベル-NMRスペクトルによる蛋白質の動的高次構造の研究

使用稳定同位素标记核磁共振谱研究蛋白质的动态构象

基本信息

批准号：
61230021
负责人：
甲斐荘正恒
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Tokyo Metropolitan University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Special Project Research
财政年份：
1986
资助国家：
日本
起止时间：
1986 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

蛋白性プロテアーゼインヒビターSSIの主鎖カルボニル炭素【^(13)C】-NMRスペクトルの帰属を大幅に進行させた。SSI生産菌の培養培地の再検討を行い、従来は極めて低いラベルアミノ酸取り込み率しか得られなかった、二,三の残基について良好な結果を得た。特にグルタミン酸およびグルタミンは従来の結果は著しく不満足であったが、無糖培地でのSSI生産条件の確立から、直ちに全ての残基の帰属を【^(15)N】,【^(13)C】-ダブルラベル法を用いて完了させることができた。このようにして帰属を一歩一歩追うたことから、主鎖金113残基の約70%もの残基の位置特異的帰属を達成した。このように数多くの帰属の確定したカルボニルシグナルを持つ蛋白質は他になく、我々の年来主張している、カルボニルシグナルのネットワークを利用する蛋白質の溶液内を体構造(変化)の"モニターシステム"の完成へ向って大きな一歩を印した。当該年度における実施計画は概ね順調に進行しつつあるが、特に50%重水中におけるカルボニルシグナルの線型を利用するDEALS法の確立は最も特記すべき成果であり、昨年9月のドイツにおける生体系磁気共鳴国際会議の招待講演として発表し、現在論文を作成中である。

The protein content is different from that of SSI. The main reason is that the carbon [^ (13) C]-NMR is very important. The SSI bacteria were cultured in the ground, and the results showed that the acid extraction rate was low, and the second and third residues were good. This is very important to determine the results of this test. The results show that the conditions for the production of SSI without sugar culture have been established, and that the whole residue has been determined [^ (15) N], [^ (13) C]-the method has been successfully used. The position of the main gold 113 residue is about 70% of the residue position. In many cases, you can make sure that you are responsible for the growth of your protein. You have been working on it for many years, and you have been using the protein solution to make the system in your solution. During this year's annual planning program, we are going to make sure that the most important results are obtained by using the DEALS method. In September last year, the International Conference on students and students was invited to host the performance of the International Conference.