家族性大腸ポリポ-ジスにおける発癌機構の解析

家族性结直肠息肉病致癌机制分析

• 批准号: 02151020
• 负责人: 外村 晶
• 金额: $ 5.44万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 1990
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02151020/
• 关键词: 家族性大腸ポリポ-ジス; 染色体異常; 対立遺伝子のヘテロ接合型消失; 大腸癌培養細胞への単一染色体移入; 大腸関連癌遺伝子のcDNAクロ-ニング; マイクロ波固定癌組織のインサイチュウハイブリダイゼ-ショ

1.家族性大腸ポリポ-シス(以下,FAPと略す)患者およびその家系構成員より末梢血,ポリ-プ,大腸癌等の試料を採取し,班員に配布した(岩間,宇都宮)。末梢血の一部はEBVを用いてリンパ芽球細胞株を樹立し,凍結保存した(池内)。2.大腸癌3例,腺腫8例とデスモイド腫瘍1例の染色体分析を行なった。腺腫は1個ずつ別々に培養したが,小形の場合は何個かずつまとめて培養した。いずれの場合も,7,13,20番染色体のトリソミ-と20,22番のモノソミ-が特徴的であった(外村,池内)。3.17pのp53遺伝子について調べたところ,対立遺伝子欠失とエキソン5〜8の点突然変異をともに有する浸潤癌が7例見いだされたので,癌ではp53遺伝子は不活性されていると推測された。一方,大腸癌培養細胞に正常体細胞由来の5,18番染色体をそれぞれ単一に移入したところ,ヌ-ドマウス移植性が消失し,癌形質の抑制が起こることが判明(宮木,押村)。4.p53遺伝子のヘテロ接合性の消失(LOH)が腺腫で23例中4例(17%),大腸癌で9例中5例(56%)に検出された。また18g上のDCC遺伝子のLOHを検索した結果,腺腫で21例中6例(29%),大腸癌で3例中2例(75%)に認められ,大腸癌発生過程にこれらの遺伝子の関与が示唆された(笹月)。5.ヌ-ドマウスを使う方法により,FAP患者細胞DNAから得られた癌遺伝子のcDNAクロ-ニングに成功した。一部,DNA塩基配列を決定し,ホモロジ-検索を行なったところ,Bーraf遺伝子と同一であった。cDNAの5′側はBーraf protoーoncogeneの配列とは異なっていたので,再配列が起こっているものと考えられた(湯淺)。6.マイクロ波(MW)照射によって固定した26の大腸癌の癌遺伝子の発現を調べたところ,6例にHaーras m RNA,7例にKiーras m RNA,12例にCーmyc m RNAが検出され,免疫組織化学的手法の結果と一致した(森)。

1. Peripheral blood samples from family members of patients with familial colon cancer (hereinafter referred to as FAP) were collected from patients with peripheral blood, colon cancer, etc., and members of the team were assigned to the hospital (Iwama, Utsunomiya). A part of the peripheral blood EBV was established using the Tonkin germ cell strain and was frozen and preserved (Ikeuchi). 2. There were 3 cases of colorectal cancer, 8 cases of adenoma, and 1 case of tumor and ulcer. Chromosome analysis was carried out. Adenoma can be cultivated by one individual, and it can be cultivated by small-shaped cases.いずれのoccasion も, 7, 13, 20 chromosomes のトリソミ-と20, 22nd chromosomes のモノソミ-が特徴’s であった (Outer Village, Ikeuchi). 3.17p のp53 伝子について调べたところ,対立伝子讷无とエキソン5~8のPoints suddenly change をThere are 7 cases of invasive cancer in the hospital, and there are 7 cases of invasive cancer, and the cancer is still inactive, and it is speculated. On the one hand, colorectal cancer cultured cells are derived from normal somatic cells and the chromosomes 5 and 18 are transferred into them.ころ, ヌ-ドマウス transplantation が disappeared し, cancerous morphology の suppression が こ る こ と が was found out (Miyagi, Oshimura). 4. p53 zygosity loss (LOH) was caused by adenoma in 4 out of 23 cases (17%), and colorectal cancer was found in 5 out of 9 cases (56%). The results of the DCC 18g on the LOH test showed that 6 out of 21 cases (29%) were adenoma and colorectal cancer. 2 out of 3 cases (75%) were diagnosed with colorectal cancer. 5. The DNA of FAP patients' cells was successfully obtained using the method of ヌ-ドマウスを. Part 1, DNA base alignment decision, ホモロジ-検SO を行なったところ, Bーraf 伝子と同であった. The 5′ side of cDNA is はBーraf protoーoncogene とはISO なっていたので, and then it is matched with こっているものと考えられた(Yuasa). 6. Macrowave (MW) irradiation has fixed the colorectal cancer in 26 cases, and the cancer remains in the colon have been fixed, and the 6 cases have been treated with にHaーras m RNA, and 7 cases have been treated with にKiーras m RNA, Cーmyc mRNA in 12 cases, the results of the immunohistochemistry method are consistent with each other (Mori).

项目成果

Hoshino,Y.,Horikawa,I.,<Oshimura,M.>___ー& <Yuasa,Y.>___ー: "Normal human chromosome 5,on which a familial adenomatous polyposis gene is located,has tumor suppressive activity." Biochemical and Biophysical Research Communications.

Hoshino, Y., Horikawa, I.,<Oshimura,M.>___ー& <Yuasa,Y.>___ー：“正常人 5 号染色体上有家族性腺瘤性息肉病基因，具有肿瘤抑制活性。”生物化学和生物物理研究通讯。

Okamoto,M.,Sato,C.,Kohno,Y.,Mori,T.,<Iwama,T.>___ー,<Tonomura,A.>___ーMiki,Y.,<Utsunomiya,J>___ー.,Nakamura,Y.,White,R.& <Miyaki,M>___ー.: "Molecular nature of chromosome 5q loss in colorectal tumors and desmoids from patients with familial adenomatous polypo

冈本 M.、佐藤 C.、河野 Y.、森 T.、<岩间 T.>___、<殿村 A.>_____ 三木 Y.、<宇都宫 J>__ _ー.,Nakamura,Y.,White,R.& <Miyaki,M>___ー.：“家族性腺瘤性息肉患者结直肠肿瘤和硬纤维瘤中染色体 5q 丢失的分子性质

Sasaki,M.,Sugio,K.,<Sasazuki,T.>___ー: "Kーras Activation in Colorectal Tumors From Patients With Familial Polyposis Coli." Cancer. 65. 2576-2579 (1990)

Sasaki,M.,Sugio,K.,<Sasazuki,T.>___ー：“家族性结肠息肉病患者的结直肠肿瘤中的 K-ras 激活。”65。2576-2579 (1990)