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シトクロム酸化酵素におけるプロトンポンプと酸素還元反応とのカップリング機構

质子泵与细胞色素氧化酶氧还原反应的耦合机制

基本信息

批准号：
62617521
负责人：
北川禎三
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Okazaki National Research Institutes
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の最初の年度であるので, 装置づくりよりスタートした. シトクロム酸化酵素と酸素との反応中間体の時間分解共鳴ラマンスペクトルを測定することを目的とし, ミクストフロー装置を改良した. すなわちラマンセルの直後にもう一つのフローセルを置き, 分光光度計の試料室の光路よりとり出したオプチカルファイバーで第二のセルを流れる試料の吸収スペクトルを測定することに成功した. その有効性を西洋わさびペルオキシダーゼ反応中間体で示した. しかしこの装置では, ラマン散乱測定部と吸収スペクトル測定部に少し時間のずれがあるので, 早い反応の場合には問題があった. 空間的に同一の部分のラマンスペクトルと吸収スペクトルを時間測定することを考え, 装置を作った. それはラマン測定用レーザー光と吸収スペクトル測定用白色光を1つのオプチカルファイバーにいれて混合してしまうという新しい発想によるもので, その装置の詳細とヘムタンパクへの応用例を論文として発表した. この装置をフローする酵素に適用するに際し, 長時間の積算が必要であることがわかった. 酵素量は限られているので, フロー中に酵素を再生する新しい系を作り, それを人工心肺装置と命名した. それらの装置を組合わせ, 目的とするチトクロム酸化酵素反応中間体を調べた. フローする分子が光ビーム中に滞在する時間が1msという条件で測定した可視吸収スペクトルは, B.Chanceが低温で検出したCompoundBのものと一致した. またフローする分子が光ビーム中に滞在する時間が150μs以内という条件で測定した可視スペクトルは, B.Chanceが低温で検出したCompoundAのものと一致した. それぞれの共鳴ラマンスペクトルを今回初めて確立したが, 同位体シフトの観測が次年度以降に残された. 共存するチトクロムCの可視吸収スペクトルより, CompoundAの段階では新たな電子移動が起こってないが, CompoundBでは起こっていることが明らかになった.

In the initial year of this study, the device was installed. The time decomposition resonance of the intermediate of acidifying enzyme and acid is improved. The optical path of the sample chamber of the spectrophotometric method was successfully determined. The reaction intermediate is shown in the table below. The device is equipped with a scattering measuring unit and an absorption measuring unit. The same part of the space is used for the measurement of absorption time. For example, the white light for measurement is mixed with the white light for absorption, and the white light for measurement is mixed with the white light for absorption. When the device is suitable for use, it is necessary to accumulate the enzyme for a long time. The amount of enzyme is limited, and the enzyme regeneration in the heart and lung is new. The aim of the present invention is to provide a device for the regulation of enzyme intermediates. The time required for determining the absorption of light in the molecule is 1ms, and the time required for determining the absorption of light in the molecule is 1 ms The time delay of the molecule in the optical system is less than 150μs, and the condition of the molecule in the optical system is less than 150μs. The condition of the molecule in the optical system is less than 150 μ s. The resonance of the isotope was established at the beginning of this year, and the isotope was detected at the end of the next year. Blue shift, C visible absorption, CompoundA new electron shift, CompoundB new electron shift, CompoundB new electron shift.