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ILー6による抗腫瘍活性の解析及びILー6と異なるKHFの遺伝子クローニング

IL-6抗肿瘤活性分析及与IL-6不同的KHF基因克隆

基本信息

批准号：
01015064
负责人：
岡田全司
金额：
$ 3.14万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.ILー6によるin vivoキラーT(Tc)細胞分化機構の解析;マイトマイシン処理FBLー3白血病細胞をC57BL/6マウスにiーp投与し、1日後よりヒトrILー6(5×10^4u/日)をi・p投与するとリンパ節、PECに腫瘍特異的なTcが誘導された。すなわちILー6は生体内Tcの分化に重要な役割を果たすことが示された。2.ILー6の生体内投与による抗腫瘍効果及びその機構の解析;viableFBLー3をi・p投与しヒトrILー6を同様に6日間投与すると16匹中15匹(94%)と高い完全治癒率が認められた。この治癒マウス脾細胞よりMLTCにて、正常マウスでは誘導されない腫瘍特異的Tcが誘導された。さらに大量のFBLー3を治癒マウスに再接種すると生体内で強い腫瘍特異的CD8^+Tcが誘導され、腫瘍は拒絶された。一方、正常マウスではTcは誘導されず全例死亡した。すなわち、rILー6生体内投与による抗腫瘍効果はTcの分化誘導を介して発揮されることが示された。3.ILー6遺伝子導入癌細胞による抗腫瘍効果の解析;低免疫原性のRL♀8lymphoma(Balb/c由来)にヒトILー6cDNAをレトロウイルスベクターを用い移入した。このILー6遺伝子導入癌細胞はヒトILー6を産生し、これを同系マウスにi・p投与すると50%のマウスで完全治癒が認められた。この抗腫瘍効果はTc誘導を介して発揮された。この方法はより強い抗腫瘍効果を得る新しい方法として発展が期待される。4.KHFー1の精製cDNAクローニング;KHF産生ヒトTハイブリドーマ24Aの大量培養上清より種々のHPLCカラム、SDSーPAGEを用い精製し25Kdと18Kdの二本のバンドを得た。oocyte注入法にて1.6KbmKNA分画にKHFmRNAが含まれ、これよりcDNAライブラリーを作製した。これを再びRNAに翻約しKHFcDNAを解析中である。またKHFは生体内肺癌転移抑制効果を示した。

1. Analysis of the differentiation mechanism of T(Tc) cells in IL による 6によるin vivoキラキラマイトマイシン処 Richard FBL ー 3 leukemia cells を C57BL / 6 マウスにー p I cast and し, 1st よりヒト rIL ー 6 (5 x 10 ^ 4 u/day) を I cast and p. するとリンパ section, PEC に swollen sores specific な Tc が induced された. Youdaoplaceholder0 IL <s:1> 6 in vivo Tc <s:1> differentiation に important な harvest を fruit たすされたとがとがとが show された. 2. Analysis of the anti-swelling effect of administration of il-による 6 <s:1> in vivo and the mechanism of びそ <s:1>; ViableFBL ー 3 を I cast and p. しヒト rIL ー 6 を with others に cast with 6 daytime すると 16 in 15 (94%), high とい horse horse completely cure rate が recognize められた. <s:1> ウスで cure <s:1> ウス spleen cells よよ MLTCにて, normal <s:1> ウスでされた induce されなウス abscuse-specific Tcが induce された. さらに large の FBL ー 3 を cure マウスに reinoculation すると raw body strong でい swollen sores specific CD8 ^ + Tc が induced され, swollen sores は refused された. One party, normal ウスでウスでウスで Tc されず induced されず total death たた. In vivo administration of すなわち and rIL <s:1> 6, the anti-swelling effect of による Tc <s:1> differentiation induction を mediate て release されるとがとがとが shows された. 3. Analysis of the anti-swelling effect of the 伝 seed of il-伝 6 in cancer cells による; Low immunogenicity の RL ♀ 8 lymphoma (origin) Balb/c にヒト IL 6 cdna ーをレトロウイルスベクターを with い move した. この IL ー 6 heritage 伝 child into cancer cells はヒト IL 6 をーし, これを homologous マウスに i. p. cast with すると 50% のマウスで completely cured が recognize められた. <s:1> anti-swelling effect て Tc induces を mediating て to release された. The <s:1> method よよ has a strong anti-swelling effect of を. The る method とて is being developed. Youdaoplaceholder5 is expected to される. 4.KHF ロ 1 strain refined cDNA ニロググ; KHF produce ヒト T ハイブリドーマ 24 a の mass culture supernatant より kind 々の HPLC カラム, SDS ー PAGE を with 25 kd い refined しと 18 kd の 2 のバンドをた. Oocyte injection method にて 1.6 KbmKNA painting に KHFmRNA が containing まれ, これより cDNA ライブラリーを cropping した. <s:1> れを is rewritten from びRNAに to <s:1> KHFcDNAを in the analysis である. The inhibitory effect of またKHF 転 on the metastasis of lung cancer in vivo を shows that <s:1> た.