筋収縮時のミオシン・サブフラグメントー1の運動

肌肉收缩期间肌球蛋白亚片段 1 的运动

• 批准号: 63540666
• 负责人: 山本 啓一
• 金额: --
• 依托单位: The Open University of Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63540666/
• 关键词: スピンラベル; ミオシン・サブフラグメントー1; 筋収縮

サブフラグメントー1の角度変化(首振り)を検出するのに最も適している方法はESRスペクトルによるものであるが、問題はスピン化合物をどの様に筋肉中のサブフラグメントー1に導入するかという点にある。筋肉中にはいろいろなタンパク質がある。スピン化合物がサブフラグメントー1以外の部分にもはいってしまうと本来のサブフラグメントー1の動きによる信号が他のものによる信号によって隠されてしまうのでこの点をどうするかが研究のポイントになる。色々と検討した結果、本実験は帆立貝の筋肉とニワトリ砂嚢平滑筋のミオシン軽鎖を用いて行なわれた。帆立貝の筋肉を50%グリセリン溶液に漬けた後生理的イオン強度の液に戻すと、浸透圧により細胞膜が破れ外部からいろいろな薬物、タンパク質を導入できるようになる。こうした筋肉をEDTAで処理するとミオシンサブフラグメントー1部分から軽鎖がはずれる。そこへ予めスピン標識したニワトリ砂嚢ミオシンの軽鎖を導入する。スピン標識はシステイン残基のSH基と反応するMaleimide Tempoによって行なった。軽鎖を置換したグリセリン筋のCa感受性を調べたところ、導入された標識軽鎖のうち85%以上が元の軽鎖が抜けた後に正しく結合したということが分かった。こうして再構成されたグリセリン処理筋のESRスペクトルを調べた。収縮中の筋肉では、軽鎖上に標識されたスピン化合物からの信号はサブフラグメントー1がかなりいろいろな方向を向いていることを示唆しているように見える。これは首ふりモデルを支持する結果であるが、まだ実験の回数が少ないのではっきりと結論を出すには条件を変えてもう少し実験を行なう必要がある。

サブフラグメントー1のangle changing (first vibration)を検出するのにmost suitable methodはESRスペクトルによるものであるが、questionはスピンcompoundをどの様に木肉中のサブフラグメントー1にImport するかという点にある. Muscles and muscles are in good condition. The part other than the スピン compound がサブフラグメントー1 にもはいってしまうと originally the のサブフラグメントー1 の动きThe signal is the signal of the signalまうのでこの点をどうするかが研究のポイントになる. Color 々と検した results, 本実験はscallopsの muscle meat とニワトリ sand 嚢 smooth ribs のミオシン軽 lock を用いて行なわれた. The physiological strength of the scallop's muscles after 50% グリセリン solution is soaked and soaked The pressure of the cell membrane is broken, and the outer layer of the cell membrane is broken.こうした muscle をEDTAで processing するとミオシンサブフラグメントー1 part から軽LOCK がはずれる.そこへyuめスピンLOGOしたニワトリ沙嚢ミオシンの軽LOCKをImportする.スピンLOGO はシステイン residue のSH group とanti応するMaleimide Tempo によって行なった.軽 lock を replacement し た グ リ セ リ ン のCa sensitivities を tune べ た と こ ろ, import さ れ た logo 軽 lock More than 85% of のうちが元の軽 lock が抜けた后に正しくcombineしたということが分かった. The こうして reconstructs the されたグリセリン processing tendon のESR スペクトルを Adjustment べた. The muscles that are contracting and the muscles that are contracted are the signs that are on the lock and the signs are the same.ントー1がかなりいろいろな Direction を向いていることをshows 唆しているように见える.これは头ふりモデルをsupports するRESULTS であるが、まだ実験の码不多ないのではっきりとConclusionを出すにはconditionsを変えてもう小し実験を行なうNecessaryがある.