ミオシン・サブフラグメント-1におけるエネルギ-変換機構

肌球蛋白亚片段1的能量转换机制

• 批准号: 01540606
• 负责人: 山本 啓一
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: The Open University of Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01540606/
• 关键词: ミオシン; プロテア-ゼ; ペプチド; アミノ酸配列; ATPア-ゼ

サブフラグメント-1におけるエネルギ-変換機構を知るためにATP分解時の構造変化を種々のプロテア-ゼによる切断の受け方から調べた。ATPの存在下、非存在下での切断のおこり易さの程度はSDSポリアクリルアミドゲル電気泳動でペプチドを分離し、デンシトメトリ-によって定量化した。切断部位がどこであるかはペプチド断片のN末端のアミノ酸配列をペプチドシ-クエンサ-によって5残基ほど決め、サブフラグメント-1上のアミノ酸配列と照合して決定した。その結果、サブフラグメント1上にはATPによって切断され易さが変る部位が3カ所発見された。1つはN末端から30残基付近で、ATPが存在する時のみサティライシンとサ-モライシンによって切断が起る。第2の部位はN末端から210残基付近にある。この部位は親水性が高いので外部に突き出していると考えられ、用いたプロテア-ゼすべてによって切断された。この部位で興味深い点は、ほとんどのプロテア-ゼがATPによって抑制されたのに、この領域の中央部を切断するサ-モライシンだけは促進された事である。第3の部位はN末端から635番付近にあり、ここも種々のプロテア-ゼにより切断を受ける。この領域ではほとんどのプロテア-ゼがATPの影響を受けないがV_8とArg-CだけがATPによって抑制された。切断の抑制・促進と実際の構造変化とを対応させることは、プロテア-ゼの活性中心の構造が関係する事なので難しいが、多くの場合ATPが結合すると外に出ていたペプチドが引込み切れにくくなると解釈して良いだろう。

サブフラグメント-1におけるエネルギ-変Change mechanism を知るためにATP When decomposing, the structural change is a kind of structural change. In the presence and absence of ATP, it is easy to cut off the degree of SDS. Microelectrophoresis is used for separation and electrophoresis, and microelectrophoresis is used for quantification. Cutting site がどこであるかはペプチド fragment のN terminal のアミノ acid arrangement をペプチドシ-クエンサ-によって5 residues are determined, and the acid combination on the サブフラグメント-1 is determined according to the combination.そのRESULTS, サブフラグメント1上にはATPによって Cut off されeasily さが変る PART が3カ発见された. 1つはN terminal から30 residues are close to で, ATP が is present and のみサティライシンとサ-モライシンによって is cut off. The N-terminal end of the 2nd part is the 210th residue close to it. The hydrophilic part of the part is high and the external protrusion is out of the water, and the water is cut off with the water. The part is interesting and the point is deep, the point is deep, and the ATP is suppressed.のに、この区のcentral part をcut off するサ-モライシンだけは to promote された事である. The 3rd part of N-terminal part 635 is close to にあり, and the ここもkind of 々のプロテア-ゼにより cuts off and receives ける.この区ではほとんどのプロテア-ゼがATPの Impact をAffected by けないがV_8とArg-C だけがATP によって Suppressed された. Cut off the inhibition and promotion of the structure of the relationship between the structure of the active center and the structure of the active center. It's difficult and difficult, and it's difficult and difficult to use ATP in many situations.ペプチドが见込み Cut れにくくなると解釈して好いだろう.

项目成果

山本啓一: "ATP-induced Structural Change in Myosin Subfragment-1 Revealed by the Location of Protease Cleavage Sites on the Primary Structure" Journal of Molecular Biology. 209. 703-709 (1989)

Keiichi Yamamoto：“一级结构上蛋白酶切割位点的位置揭示了 ATP 诱导的肌球蛋白亚片段 1 的结构变化”《分子生物学杂志》209. 703-709 (1989)。