G-Protein/Effektor-Interaktion in der visuellen Kaskade - Mechanismus und Kinetik

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Im beantragten Projekt soll die Rolle der co-translationalen Myristoylierung von G-Protein a-Untereinheiten bei der Assoziation der Untereinheiten sowie bei der Wechselwirkung des GProteins mit Membranen untersucht werden. Objekte der Untersuchung sind die aus Stäbchenaußensegmenten gewonnenen GtUntereinheiten (Gat und Gb1g1), myristoylierte und unmyristoylierte Gai1-Untereinheiten (ohne zusätzliche Palmitoylierung) sowie verschiedene Gb2g-Untereinheiten. Die Assoziation der Untereinheiten in Lösung kann mit analytischer Gelfitration untersucht werden. Die Protein-Membran Wechselwirkung soll mit kinetischer Lichtstreuung, "resonant mirror" Spektroskopie und mit Zentrifugations/SDS-PAGE-Experimenten analysiert werden. Die Methoden erlauben neben der Bestimmung von Dissoziationskonstanten auch die Analyse der Reakionsraten der G-Protein/Membran Interaktion.