G-Protein/Effektor-Interaktion in der visuellen Kaskade - Mechanismus und Kinetik

本课题旨在研究G-蛋白α-Untereinheiten与Untereinheiten结合的协同抑制作用，并将其与带韦尔登膜的G-蛋白进行共沉淀。研究对象是GtUntereinheiten（Gat和Gb 1g 1）的Stäbchenaußensegmenten，肉豆蔻酸酯和非肉豆蔻酸酯Gai 1-Untereinheiten（ohne zusätzliche Palmitoylierung），因此可以确定Gb 2g-Untereinheiten。Lösung的Untereinheiten协会可以通过分析凝胶过滤来实现韦尔登。蛋白质-膜的选择性电泳采用动力学发光法、“共振镜”法和电泳/SDS-PAGE-韦尔登实验分析法。该方法也可用于G蛋白/膜相互作用反应速率的分析。

Im beantragten Projekt soll die Rolle der co-translationalen Myristoylierung von G-Protein a-Untereinheiten bei der Assoziation der Untereinheiten sowie bei der Wechselwirkung des GProteins mit Membranen untersucht werden. Objekte der Untersuchung sind die aus Stäbchenaußensegmenten gewonnenen GtUntereinheiten (Gat und Gb1g1), myristoylierte und unmyristoylierte Gai1-Untereinheiten (ohne zusätzliche Palmitoylierung) sowie verschiedene Gb2g-Untereinheiten. Die Assoziation der Untereinheiten in Lösung kann mit analytischer Gelfitration untersucht werden. Die Protein-Membran Wechselwirkung soll mit kinetischer Lichtstreuung, "resonant mirror" Spektroskopie und mit Zentrifugations/SDS-PAGE-Experimenten analysiert werden. Die Methoden erlauben neben der Bestimmung von Dissoziationskonstanten auch die Analyse der Reakionsraten der G-Protein/Membran Interaktion.