Molekulargenetische und funktionelle Untersuchungen zu dem Nicht-Lee kodierten Effektor A (NleA) von Shiga Toxin-produzierenden E. coli und seinen Varianten

产志贺毒素大肠杆菌及其变种非Lee编码效应子A(NleA)的分子遗传学和功能研究

基本信息

项目摘要

Nicht-LEE kodierte Typ IM Effektoren sind innerhalb der Shiga Toxin-produzierenden Escherichia coli weit verbreitet. Der phagenkodierte Effektor NleA4795 von E. coli O84:H4 Stamm 4795/97 wird mit Hilfe des Typ III Sekretionssystems des „Locus of enterocyte effacement in eukaryontische Zellen transloziert und kann dort in der Nähe des Golgi-Apparates nachgewiesen werden. Im Rahmen des beantragten Projekts sollen der genetische Hintergrund, die Regulation der Genexpression und die intrazelluläre Funktion des Nicht-LEE kodierten Effektors NleA4795 und einiger seiner Varianten, untersucht werden. Im Einzelnen sollen Domänen von NleA4795 identifiziert werden, die für die Translokation, die subzelluläre Lokalisation und die Funktion des Proteins, bzw. die Interaktion mit intrazellulären Interaktionspartnern, verantwortlich sind. Hierzu werden Deletionsmutanten und GFP-Fusionen hergestellt, die dann für die Untersuchung in HeLa Zellen eingesetzt werden. Mit Hilfe von Antikörpern gegen dieses Protein kann die subzelluläre Lokalisation bestimmt werden. Weiterhin soll untersucht werden ob die in den Vorarbeiten nachgewiesenen Typ MI Effektoren phagenkodiert sind und unter welchen Bedingungen sie exprimiert werden. Die Lokalisation von nleA im Prophagen BP-4795 weist auf horizontale Verbreitung dieser Varianten hin. Phagentransduktion und Wirtsspektrum sollen im Rahmen des beantragten Projekts untersucht werden.
不明显的肠内毒素对产滋贺毒素大肠埃希菌有抑制作用。E.大肠杆菌O 84:H4 Stamm 4795/97用真核细胞中肠上皮细胞消失位点的III型分离系统进行了筛选,并在随后的韦尔登中进行了表达。通过对基因表达调控和NleA 4795非线性效应的细胞内功能的研究,我们发现了一个新的基因表达调控的基因组学研究项目,其中包括韦尔登。Im Einzelnen sollen Domänen von NleA 4795 identifiziert韦尔登,die für die Translokation,die subzelluläre Lokalisation und die Funktion des Proteins,bzw.通过内部合作伙伴的合作,我们可以做到这一点。Hierzu韦尔登删除和GFP融合,然后在HeLa Zellen中进行研究,然后在韦尔登中进行研究。Mit Hilfe von Antikörpern gegen dieses Protein kann die subzelluläre Localisation bestimmt韦尔登。其他的韦尔登人在他们的心脏病发作时也会受到影响,他们也会受到韦尔登人的影响。BP-4795项目中nleA的本地化是在水平方向上进行的。Phagentransduktion和Wirtsspektrum sollen im Rahmen des beantragten Projekts untersucht韦尔登。

项目成果

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