甲状腺ホルモンによるアフリカツメガエル肝細胞の分化機構

甲状腺激素诱导非洲爪蟾肝细胞分化的机制

• 批准号: 01540599
• 负责人: 河原 明
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01540599/
• 关键词: 甲状腺ホルモン; 肝細胞分化; アフリカツメガエル; 変態; 遺伝子発現ヴィテロジェニン

これまでに、アフリカツメカエル肝細胞のエストロゲン依存性ヴィテロジェニン合成能力は変能期に獲得され、甲状腺ホルモンが直接関与することを初代培養肝細胞を用いて明らかにした(Dev.Biol.1989)。さらに、甲状腺ホルモンはエストロゲンレセプタ-の核内濃度を高める働きを持つことも明らかにした(動物学会支部会報1989年)。一方、ヴィテロジェニン合成能力のある肝細胞は変能肝細胞の一部にすぎず、合成能力の増大は合成能のある細胞の増加と関係していると考えられた。そこで、in situハイブリダイゼ-ション法により、ヴィテロジェニン遺伝子の時間的、空間的発現パタ-ンについて調べた。その結果、変態最盛期の初期には極めて少数の肝細胞にのみヴィテロジェニンmRNAが認められるが、後期には急激にその数が増加することが明らかになった。その分布は肝臓中に散乱した状態であり、特に位置特異性は認められなかった。(日本動物学会第60回大会1989年)。一連の結果は、甲状腺ホルモンが直接的に肝細胞の成熟分化の最終段階に働き、成体型肝細胞に分化させていることを示唆している。そこで肝細胞分化の分子機構をさらに明らかにするため、成体期、変能期、幼生期のそれぞれの肝臓よりポリA^+RNAを調整し、それらのcDNAライブラリ-をλファ-ジベクタ-を用いて作製した。さらに、発生段階特異的cDNAクロ-ンを得るためライブラリ-相互の差cDNAライブラリ-を単鎖ファ-ジミドDNAライブラリ-間のハイブリダイゼ-ション法により作製した。このライブラリ-から、元のcDNAとのコロニ-ハイブリダイゼ-ションにより、幾つかの発生段階特異的クロ-ンを得ることが出来た。現在、これらのクロ-ンについて、対応するmRNAの時間的、空間的発現パタ-ンを解析中である。

The ability of primary cultured hepatocytes to synthesize thyroid and thyroid hormones is directly related to the ability of primary cultured hepatocytes to synthesize thyroid hormones (Dev.Biol.1989). In addition, the thyroid gland may be affected by the increase in nuclear concentration (Journal of the Zoological Society, 1989). A study of the relationship between the synthesis ability of hepatocytes and the growth of hepatocytes. The time and space of the child's occurrence are adjusted according to the method of "in situ" and "in situ". In the early stage of the peak period, the number of cells in the liver increased, and the number of cells in the liver increased. The distribution is scattered, and the location is specific. (60th Congress of Zoological Society of Japan, 1989). As a result, the thyroid gland is directly related to the final stage of hepatocyte maturation and differentiation, and the differentiation of adult hepatocytes is also related to the development of thyroid gland. The molecular mechanism of hepatocyte differentiation is regulated by cDNA, which is used in the development of liver cells, adult cells, adult cells and juvenile cells. In addition, the development of segment-specific cDNA fragments was carried out by the method of DNA fragment analysis. The cDNA of the gene is derived from the gene of the gene, and the gene is derived from the gene of the gene. The temporal and spatial occurrence of mRNA in the analysis of the expression of mRNA

项目成果

K.Watanabe: "Scleral fibroblasts of the chick embryo poliferate by an autocrine mechanism in protein-free primary cultures:Differential secretion of growth factors depending on the growth state" Experimental Cell Research. 182. 321-329 (1989)

K.Watanabe：“鸡胚的巩膜成纤维细胞在无蛋白质原代培养物中通过自分泌机制进行增殖：生长因子的不同分泌取决于生长状态”实验细胞研究。

M.Fujioka: "Purification of an autocrine growth factor in conditioned medium obtained from primary cultures of scleral fibroblasts of the Chick embryo" Experimental Cell Research. 181. 400-408 (1989)

M.Fujioka：“从鸡胚巩膜成纤维细胞原代培养物中获得的条件培养基中自分泌生长因子的纯化”实验细胞研究。

H.Takata: "Role of thyroid hormone on estrogen-induced vitellogenin synthesis" 日本動物学会中国四国支部会報. 41. 10 (1989)

H.Takata：“甲状腺激素对雌激素诱导的卵黄蛋白原合成的作用”日本动物学会中国四国分会通报 41. 10 (1989)。

Y.Kawamura: "Temporal and spacial expression of vitellogenin gene during the metamorphosis of Xenopus laevis" Zoological Science. (1989)

Y.Kawamura：“非洲爪蟾变态过程中卵黄蛋白原基因的时间和空间表达”动物学科学。

A. Kawahara: "Thyroid hormone directly induces hepatocyte competence for estrogendependent vitellogenin synthesis during the metamorphosis of Xenopus laevis" Developmental Biology 132. 73-80 (1989)

A. Kawahara：“在非洲爪蟾变态过程中，甲状腺激素直接诱导肝细胞合成雌激素依赖性卵黄蛋白原的能力”《发育生物学》132. 73-80 (1989)