课题基金 / 基金详情

mRNA安定性による遺伝子発現の制御-転写終結領域の機能

mRNA安定性による遺伝子発現の制御-転写終結領域の機能
通过 mRNA 稳定性控制基因表达 - 转录终止区的功能
批准号:
01580249
负责人:
饗場 弘二
金额:
$1.28万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份:
1989
资助国家:
日本
项目状态:
已结题
起止时间:
1989 至 --

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
1)プラスミド上にクロ-ン化した大腸菌crp遺伝子の3′フランキング領域にある逆くり返し配列の一部を欠失した変異遺伝子を作製した。これらの欠失は、DNA配列を決定することにより確認した。2)変異crpを菌内に導入し、合成されるCRP量を、CAMP結合能の測定およびPAGEにより解析したところ、変異crpから合成されるCRP量は、野生型の約1/3に低下していることが明らかになった。3)SIアッセイにより、crpmRNA量を解析した結果、変異crpのmRNA量は、野生型に比べ1/3量に低下していた。4)SIアッセイにより、crpmRNAの安定性を解析したところ、変異型crpのmRNAの半減期は、野生型に比べ約1/2に低下していた。5)ノ-ザンブロッティングにより、crpmRNAのサイズを解析した結果、野生型では、逆くり返し配列部分で終結したRNAが大多数であるのに対し、変異型では、それより大きな転写産物が検出された。このことは逆くり返し配列が転写のタ-ミネ-タ-として機能していることおよび逆くり返し配列の欠失はタ-ミネ-タ-の機能を阻害し転写のリ-ドスル-をひきおこしていることを示している。6)上記の結果から、crpタ-ミネ-タ-は、転写終結機能とともに、mRNAの安定化により、遺伝子発現の正の制御因子としても働いていることが明らかになった。
英文摘要
1)プラスミド上にクロ-ン化した大腸菌crp遺伝子の3′フランキング領域にある逆くり返し配列の一部を欠失した変異遺伝子を作製した。これらの欠失は、DNA配列を決定することにより確認した。2)変異crpを菌内に導入し、合成されるCRP量を、CAMP結合能の測定およびPAGEにより解析したところ、変異crpから合成されるCRP量は、野生型の約1/3に低下していることが明らかになった。3)SIアッセイにより、crpmRNA量を解析した結果、変異crpのmRNA量は、野生型に比べ1/3量に低下していた。4)SIアッセイにより、crpmRNAの安定性を解析したところ、変異型crpのmRNAの半減期は、野生型に比べ約1/2に低下していた。5)ノ-ザンブロッティングにより、crpmRNAのサイズを解析した結果、野生型では、逆くり返し配列部分で終結したRNAが大多数であるのに対し、変異型では、それより大きな転写産物が検出された。このことは逆くり返し配列が転写のタ-ミネ-タ-として機能していることおよび逆くり返し配列の欠失はタ-ミネ-タ-の機能を阻害し転写のリ-ドスル-をひきおこしていることを示している。6)上記の結果から、crpタ-ミネ-タ-は、転写終結機能とともに、mRNAの安定化により、遺伝子発現の正の制御因子としても働いていることが明らかになった。
期刊论文(1)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
原核生物小分子RNAを利用した遺伝子ノックダウン系の構築
  • 批准号:
    21657032
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
  • 资助金额:
    $1.98万
  • 财政年份:
    2009
  • 负责人:
    饗場 弘二
  • 依托单位:
リボソームによるmRNA切断:分子機構と生理的意義
  • 批准号:
    16657050
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额:
    $1.86万
  • 财政年份:
    2004
  • 负责人:
    饗場 弘二
  • 依托单位:
TmRNA系による標的タンパク質の精製と同定の試み
  • 批准号:
    13878128
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额:
    $1.34万
  • 财政年份:
    2001
  • 负责人:
    饗場 弘二
  • 依托单位:
Trans-translationの高感度検出系の確立とtmRNAの生理機能
  • 批准号:
    12878130
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额:
    $1.6万
  • 财政年份:
    2000
  • 负责人:
    饗場 弘二
  • 依托单位: