大腸菌におけるグルコース応答の分子機構

大肠杆菌葡萄糖反应的分子机制

• 批准号: 07253207
• 负责人: 饗場 弘二
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07253207/
• 关键词: グルコース効果; カタボライト抑制; CRP; CAMP; 大腸菌; ラクトースオペロン; アデニレートシクラーゼ

1)過去2年間の研究で、グルコースがCRPレベルを減少させること、このことがcAMPレベルの減少と並んでグルコース抑制の重要な要因であることを発見した。また、グルコースによるCRPの発現低下は、crp遺伝子の自己制御ループを介して引き起こされるというモデルを提唱した。グルコース抑制におけるCRPレベルの変動の役割をより明確に検討するために、cAMPに依存しないCRP産生変異(crp^*)とアデニレートシクラーゼ遺伝子(cya)欠損異変を組み合わせた2重変異株の解析を行なった。この株においてはグルコースによるCRP^*レベル低下とラクトースオペロンの発現低下との間に正の相関があることを明かにした。また、グルコースの効果はcrpプロモーターに依存していることを示し、先に提唱したモデルの正しさを確認した。2)CRPによるcAMPレベルの制御機構を解明するため、すでに発見しているCRP-cAMPによるcya遺伝子の転写抑制機構の寄与をcyaプロモーターの変異体を構築、解析することにより評価した。cyaプロモーターを構成的なプロモーターに置き換えるとCRP-cAMPによるcya遺伝子の転写抑制は消失し、CRP欠損株におけるcAMPレベルの増大は約20倍となった。また、アデニレートシクラーゼのC末48アミノ酸を欠失するとCRP-cAMPによるcya遺伝子の転写抑制は変化しないが、CRP欠損株におけるcAMPレベルの増大は約5倍となった。さらに、プロモーター置換とC末の欠失を同時に行なうとCRP欠損株におけるcAMPの過剰生産は完全に消失した。この結果、CRPによるcAMPレベルの制御は、転写段階で約5倍、活性段階で約20倍の抑制であること、活性段階の制御にはアデニレートシクラーゼのC末が関与していることが明かになった。

1) in the past two years, there has been a significant increase in the number of research and development efforts in the past two years. In the past two years, there has been a significant increase in the number of CRP studies in the past two years, both in the past two years. Please tell me that the CRP is low, and that the crp will make its own system and introduce it to you. Do you want to reduce the number of people you want to use?

项目成果

饗場弘二: "Role of CRP in transcription activation at Esherichia coli lac promoter : CRP is dispensable after" Nucl. Acids Res.23. 599-605 (1995)

Koji Oba：“CRP 在大肠杆菌 lac 启动子转录激活中的作用：CRP 在 Nucl. Acids Res.23 (1995) 之后是可有可无的。

饗場弘二: "Glucose lowers CRP^* levels resulting in repression of the lac operon in cells lacking cAMP" Mol.Microbiol.17. 251-258 (1995)

Koji Yaba：“葡萄糖降低 CRP^* 水平，导致缺乏 cAMP 的细胞中 lac 操纵子受到抑制”Mol.Microbiol.17 (1995)。

饗場弘二: "Mechanism resopnsible for glucose-lactose diauxie in Escherichia coli" Genes to Cells. 1 (in press). (1995)

Koji Yoba：“大肠杆菌中葡萄糖-乳糖双酶的机制”《基因到细胞》（正在出版）。