权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Trans-translationの高感度検出系の確立とtmRNAの生理機能

tmRNA转译及生理功能高灵敏检测体系的建立

基本信息

批准号：
12878130
负责人：
饗場弘二
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12878130/
关键词：
SsrA RNA tmRNA mRNA Trans-translation ペプチドタグプロテアーゼ LacI lacオペロン

项目摘要

SsrA RNA(tmRNA)は、何らかの原因でストップコドンを欠くmRNAが生ずると、tRNAとmRNAの双方の働きをしてtrans-translationと呼ばれる反応により、新生ポリペプチド鎖に特異的なペプチドタグを付加し、ポリペプチド鎖はC末端特異的プロテアーゼの標的となり速やかに分解される。しかしながら、この反応が細胞本来の遺伝子系で実際に機能しているかどうかは不明であった。本研究は、trans-translationの生理学的意義とその分子機構を理解するための今後の研究の基礎を築くことを目的として行われ、以下の成果が得られた。1)高感度tagging検出系の確立変異型SsrAを作成し高感度でタグを検出できる系の構築に成功した。SsrA-DD、SsrA-FLAGおよびSsrA-Hisがいずれもプロテアーゼ耐性型のタグ配列を効果的に標的タンパク質に付加できること、特異的抗体を用いたWestern blottingでタグ付加タンパク質を感度よく検出できることが判明した。高感度tagging検出系の確立はtrans-translationの生理的意義とそのメカニズム解析の強力なツールとなりうる。2)LacIにおけるtrans-translationとその生理的機能LacI遺伝子はC末端領域に補助的operatorがあるためLacI自身の結合に起因する不完全長のmRNAの産生を経てtrans-translationの特異的標的になることを発見した。また、SsrAを欠損する菌はlacオペロンの発現誘導が起こりにくいこと、LacIにおけるtrans-translationがlacオペロンの外界の変化に対する迅速な応答の維持、保証に関与していることを明らかにした。

SsrA RNA (tmRNA), cause (s), reason (s), reason, reason, The source of the information is that the child of the international machine is responsible for the detection of unknown information. In this study, the meaning of trans-translation physiology is understood by the molecular institution that the following results have been successful in future research. 1) the high sensitivity tagging system ensures the establishment of the high sensitivity type SsrA to produce the high sensitivity signal. SsrA-DD, SsrA-FLAG, SsrA-His, tolerance, tolerance, High sensitivity tagging makes sure that the physiological meaning of trans-translation is related to the analysis of stress. 2) the physiological function of LacI is related to the physiological function of operator. The C-terminal domain of operator is assisted by the combination of operator and LacI itself. The cause of the disease is not completely long-term. It is important to know that mRNA is responsible for trans-translation disease. Both SsrA and SsrA are not responsible for the maintenance, maintenance and maintenance of bacteria, trans-translation, lac, and maintenance of the outside world.